子宫内膜癌内源性多肽PDAEP-1体外抗肿瘤活性分析

目的通过多肽组学分析,从子宫内膜癌组织中筛选获得具有潜在生物学活性的内源性多肽。方法收集3例子宫内膜样腺癌组织标本(以3例年龄匹配的健康女性子宫内膜样本为对照),通过液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)获得子宫内膜癌特异性内源性多肽,借助生物信息学方法筛选具有潜在活性的功能多肽,使用CCK-8实验、Transwell及划痕实验验证多肽对子宫内膜癌细胞株HEC-1-A增殖、侵袭、迁移的影响,并以PCR、Western Blot方法选择性观察多肽对Wnt/β-catenin/EMT通路相关分子表达的影响。结果鉴定获得序列为TAGNVLMH的多肽(PDAEP-1)对应前体为SLC38A10,其表达水平与子宫内膜癌患者5年生存率相关;该多肽对子宫内膜癌细胞的增殖、侵袭、迁移有明显的抑制作用,且作用后Vimentin、β-catenin两者的mRNA及蛋白水平均显著降低,而E-cadherin则上调。结论通过调变Wnt/β-catenin/EMT通路相关分子,内源性多肽PDAEP-1在体外有抑制子宫内膜癌细胞增殖、侵袭和迁移的抗肿瘤活性,具有潜在的诊疗应用价值。

琥珀酸亚铁联合维生素C纠正宫颈癌伴贫血患者的疗效评价及安全性

目的探究琥珀酸亚铁联合维生素C纠正宫颈癌患者贫血的临床疗效及安全性问题。方法筛选放疗科100例宫颈癌伴贫血患者作为研究对象,根据是否规范使用琥珀酸亚铁联合维生素C分为两组,实验组(n=50)采用口服琥珀酸亚铁和维生素C片进行常规治疗,对照组(n=50)未规范行抗贫血治疗。观察并分析两组患者治疗前后的血红蛋白(Hb)水平,规定Hb升高≥20 g/L或至正常值为治疗有效;同时统计两组患者胃肠道不良反应的发生情况。结果实验组患者贫血治疗的总有效率达48%,其中行术后辅助放化疗的患者总有效率为56%,行根治性放化疗的患者为40%,均明显优于对照组(P<0.05)。并且两组的胃肠道不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论琥珀酸亚铁联合维生素C用于治疗宫颈癌患者贫血的疗效显著,安全性可靠,临床上应在此类患者中常规、规范使用。

M6A修饰EGLN3、FOSL2参与鼻咽癌辐射抗拒

目的基于芯片数据并通过细胞实验验证鼻咽癌受m6A甲基化调控的关键放射抗拒基因。方法从GEO数据库分别下载鼻咽癌放射抗拒基因与鼻咽癌m6A调控基因以及鼻咽癌基因mRNA表达谱芯片数据,使用R软件进行差异基因的筛选与统计学分析,采用生物信息学方法对这些基因进行生物学过程、信号通路及互作网络分析。分别通过敲低m6A调控因子、放射抵抗株构建,以实时反转录PCR(qRT-PCR)和蛋白质印迹法对上述鼻咽癌m6A差异放射抗拒基因进行筛选验证。甲基化RNA免疫共沉淀后实时定量PCR(MeRIP-qPCR)验证筛选基因的m6A修饰及与甲基转移酶3(METTL3)直接结合的能力。在鼻咽癌细胞中转染筛选基因的siRNA,电离辐射处理后,用CCK-8、EdU法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,克隆形成实验检测放射敏感性。通过配对t检验,比较电离辐射处理后对照组与EGLN3敲减组Fe^(2+)丰度及脂质过氧化程度的差异趋势。结果芯片数据GSE48501与GSE200792、GSE53819交集得到6个差异基因,分别是EGLN3、FOSL2、ADM、JUN、VEGFA、PRDM1。经TNMplot、KMplot等生信数据平台进一步筛选得到目标基因EGLN3、FOSL2。目标基因mRNA直接与METTL3结合并受到其介导的m6A修饰。目标基因在电离辐射后的亲代细胞中呈现剂量、时间梯度上调;在放射抵抗细胞中也显著上调。沉默EGLN3/FOSL2后的鼻咽癌细胞经照射处理后,细胞增殖活性下降更多,与未下调者的放射增敏比的差异有统计学意义。沉默EGLN3后的鼻咽癌细胞经照射处理后,显著下调谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)表达,并进一步增加Fe^(2+)丰度及脂质过氧化程度,通过诱发铁死亡发挥放疗增敏作用。结论EGLN3、FOSL2在鼻咽癌中通过METTL3介导的m6A甲基化修饰发挥放射抵抗作用;下调EGLN3并联合电离辐射可以增加鼻咽癌细胞内Fe^(2+)丰度、脂质过氧化程度并降低GPX4表达,以铁死亡途径增鼻咽癌放射敏感性。