克罗恩病患者粪便具核梭杆菌与钙卫蛋白相关性研究

背景:具核梭杆菌(Fn)是一种常见的肠道细菌,其可能作为条件致病菌参与了炎症性肠病(IBD)的发生。目前尚缺乏IBD患者肠道Fn的定量数据。目的:建立绝对定量real-time PCR方法,检测克罗恩病(CD)患者的粪便Fn,分析其与CD炎症指标的相关性。方法:收集苏州市立医院57例CD患者和41例健康体检者的粪便样本,提取基因组DNA。构建Fn菌株ATCC 25586特异的nusG(transcription antitermination protein)基因至pUC57质粒,作为标准品,以SYBR Green real-time PCR法检测梯度稀释的标准品质粒,建立绝对定量标准曲线。评价该检测方法的敏感性、特异性和稳定性,并以之检测CD患者和健康对照者的粪便Fn丰度,分析Fn丰度与粪便钙卫蛋白(FC)、C反应蛋白(CRP)和红细胞沉降率(ESR)的相关性。结果:本研究建立的粪便Fn绝对定量real-time PCR方法敏感性高、特异性强、稳定性好。CD患者粪便Fn检出率和丰度均显著高于健康对照者(P=0.034;P=0.039),且Fn丰度与FC水平呈显著正相关(r=0.459,P=0.011)。结论:本研究建立的绝对定量real-time PCR方法可用于人粪便样本Fn丰度检测。苏州地区CD患者粪便Fn检出率和丰度显著升高,Fn丰度与炎症活动度指标FC相关。