慢性感染性难愈合创面病原菌分布与药物敏感性及相关危险因素分析

目的回顾性分析慢性感染性难愈合创面病原菌分布特点、药物敏感性及相关危险因素。方法选取2016年10月至2018年12月南京大学医学院附属南京鼓楼医院收治的183例慢性难愈合创面患者作为研究对象,分析感染性创面病原菌分布特点、主要病原菌药物敏感情况及创面感染的相关危险因素。结果183例患者经创面病原菌检测,创面存在感染者150例,设为感染组;创面无感染者33例,设为非感染组。感染组150例患者共采集标本180份,均为阳性,分离培养出病原菌33种,其中革兰氏阴性菌占59.4%、革兰氏阳性菌占38.3%、真菌占2.3%。主要革兰氏阴性菌中铜绿假单胞菌对丁胺卡那、妥布霉素敏感率较高,鲍曼不动杆菌对多粘菌素B敏感率较高,大肠埃希菌对哌拉西林舒巴坦、头孢替坦、头孢他啶、厄他培南、亚胺培南敏感率较高,奇异变形杆菌对大部分抗菌药物较敏感,而肺炎克雷伯杆菌对大部分抗菌药物敏感性较低。主要革兰氏阳性菌中金黄色葡萄球菌对青霉素、红霉素、克林霉素敏感率普遍较低,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对喹努普汀/达福普汀、利奈唑胺、万古霉素、替加环素、利福平、复方新诺明敏感率较高,肠球菌属对青霉素、氨苄西林敏感率较高,链球菌属对检验药物敏感率均较高。多因素Logistic回归分析结果显示,创面深达皮肤深层及长期卧床是慢性感染性难愈合创面的独立危险因素(P均<0.05)。结论铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、金黄色葡萄球菌是慢性难愈合创面感染的主要致病菌,且对各种抗生素敏感率差异较大;创面深达皮肤深层、长期卧床是创面感染的独立危险因素,早期合理应用抗菌药物、提前对危险因素进行干预是控制慢性难愈合创面感染的必要措施。

血管内皮生长因子165基因对真皮替代物血管化影响的实验研究

目的研究血管内皮生长因子165（VEGF165）琏因对真皮替代物体内血管化的影响。一方法采用含量体积分数10％FBS的M199培养基（简称完全培养基）培养人脐静脉内皮细胞（HUVEC）。（1）按随机数字表法将HUVEC分为3组，每组6孔：未转染组，不行转染；空载质粒组，转染pIRES2-增幔型绿色荧光坐h（EGFP）质粒；VEGF质粒组，转染pIRES2-EGFP-血管内皮生长因子（VEGF）质粒。转染后24h，倒置相差荧光显微镜下观察各组细胞中绿色荧光蛋白（GFP）表达情况，流式细胞仪榆测各组细胞pIGFP的表达率；未转染组行相同检测。以新霉素筛选出空载质粒组和VEGF质粒绀稳转细胞进行实验。分别采用实时荧光定髓PCR法和蛋白质印迹法、ELIISA法枪测3组细胞中、VEGF、165mRNA和蛋白表达以及细胞培养上清液中VEGF165的蛋白含量。（2）按随机数字表法将48只雄性裸鼠分为4组，每组12只：生理盐水组，背部两侧（部位下同）埋植经生理盐水培养2d的真皮替代物；培养基组，埋植经完全培养基培养2d的真皮替代物；未转染细胞组，埋植经含未转染HLjVEC的完全培养琏培养2d的真皮棒代物；转染细胞绀，埋植经含VEGF质粒稳转HUVEC的完食培养堪培养2d的真皮替代物。埋植术后3、7、14和21d取出各组真皮替代物，行免疫组织化学染色，观察其上微血管和HUVEC分布，技数术后14d微血管数量；蛋白质印迹法检查真皮替代物中VEGF165蛋白表达。各项检测及观察均重复进行3次，数抓采用单因素方差分析和bD法处理。结果（1）转染后24h，仅红2个转染组细胞中观察到明显绿色荧光。细胞中GFP表达率：未转染绀为0，守载质粒组（85．2±3．2）％，VEGF质粒组（93．1±2．4）％。末转染组、审载质粒组、VEGF质粒组细胞中VEGF 165mRNA相对表达啦分别为1、I．05±0．09、3．02±0．13（F=5．28，P〈0．05），VEGF165蛋白相对表达量分别为0．78±0．16、0．76±0．13、I．92±0．18（F=7．62，P〈0．05）；细胞㈠占液中VEGF165堡白含量分别为（62．4±2．7）、（73．1±3．8）、（117．5±3．1）pg／mL（F=15．08，P〈0．05）。VEGF、质粒组各项指标水甲均显著高于其余2组，P值均小于0．05。、（2）术后14d起转染细胞组真皮替代物中HUVEC明显多于其他3组。术后4d，各组真皮替代物中每200倍视野中微血管数量：生理盐水组（4．2±1，1）个、培养基组（5．2±1．1）个、未转染细胞纰（6．6±0．9）个、转染细胞绀（13．8±0．8）个，4组间比较，著芹有统训学意义，F=17．96，P〈0．01；转染细胞组微血管数明显多于其余3组（P值均小于0．05）。真皮替代物上VEGF165蛋白相对表达量比值：术后7d起，转染细胞组显著高于牛理盐水组（P〈0．05）；术后14、21d术转染细胞组（1．652±0．086、2．152±0．062）与转染细胞组（2．403±0．091、2．879±0．047）均显著高于生理盐水组（1．299±0．027、1．362±0．103，P值均小于0．05），且转染细胞组明娃高于未转染细胞组（P值均小于0．05）。各组真皮铪代物中VEGF165蛋白含量均随术后时间延长而增加。结论VEGF、165基因转染使HUVEC持续高表达VEGF165蛋白，可有效促进真皮棒代物体内血管化。

随意型皮瓣在面部软组织缺损美学修复中的应用

目的探讨随意型皮瓣在修复面部软组织缺损中的美学效果。方法针对各种原因所致的面部软组织缺损，根据缺损部位所处的面部美学亚单位、缺损形态及缺损面积等设计随意型皮瓣，如旋转皮瓣、推进皮瓣、易位皮瓣、“风筝”皮瓣等，对36例患者进行修复。切口设计顺皮纹方向，切口无张力缝合。结果术后36例患者的皮瓣全部成活，切口均Ⅰ期愈合，切口瘢痕轻微，随访2～12个月，美学效果满意。结论应用随意型皮瓣修复面部软组织缺损，皮瓣质地柔软，色泽无明显差异，能最大限度地保留面部美观及功能。

血小板源性生长因子BB对体外培养肌腱细胞增殖的影响

目的了解不同浓度的血小板源性生长因子BB（PDGF—BB）对体外培养的肌腱细胞增殖的影响。方法体外培养并鉴定大鼠肌腱细胞，用含不同浓度的PDGF—BB培养液培养肌腱细胞，根据培养液中所加PDGF-BB浓度不同分为1、5、10、20、50、100、150、200、250ng／mL PDGF—BB组，分别用含以上终浓度的PDGF及体积分数0．5％FBS的培养液培养。对照组，用含体积分数0．5％FBS的培养液培养。以噻唑蓝法检测细胞增殖能力。丁加入PDGF—BB培养前（0h）以及培养后12、24、36、48、60、72h，检测20ng／mL PDGF—BB组及对照组肌腱细胞的吸光度值。结果分离培养的细胞Ⅰ型胶原染色呈阳性，Ⅲ型胶原染色呈阴性，证明为大鼠肌腱细胞。与对照组相比，除250ng／mLPDGF—BB组外，其他各组细胞的吸光度值均升高（P〈0．05或P〈0．01）。随着PDGF—BB浓度的增加，其吸光度值先逐渐增大，达一定浓度（20ng／mL）后又逐渐减小。20ng／mL PDGF—BB组培养12h肌腱细胞开始增加，至48h达高峰（0．53±0．04），24～72h均明显高于对照组（P〈0．01）。结论PDGF—BB在一定浓度和时间范周内具有促进肌腱细胞增殖的作用。

Stahl耳畸形的治疗进展

Stahl耳畸形是一种较为罕见的先天性耳廓畸形，因Stahl最早报道而得名。Slam耳畸形发生的具体机制尚未明确。