罗格列酮对急性时相血清淀粉样蛋白A诱导的内皮细胞MCP-1、PAI-1基因表达的影响

目的观察急性时相血清淀粉样蛋白A(A-SAA)和PPAR-γ激动剂罗格列酮(RSG)对内皮细胞单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和纤溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)基因表达的影响。方法分别用不同浓度(0.5μg/ml、5μg/ml)的A-SAA、RSG(10μmol/L)处理ECV304内皮细胞8h、24h后抽提总RNA,用半定量RT-PCR技术检测MCP-1、PAI-1 mRNA的表达。结果A-SAA能显著促进ECV304细胞MCP-1、PAI-1 mRNA的表达,并呈剂量和时效依赖性(P<0.01)。而RSG能部分减低A-SAA对ECV304细胞MCP-1和PAI-1 mRNA表达的促进作用。结论A-SAA可通过促进内皮细胞MCP-1、PAI-1的表达和分泌,参与动脉粥样硬化的形成;RSG可通过部分减低A-SAA对内皮细胞MCP-1和PAI-1表达的促进作用发挥其抗炎、抗AS的作用。

固醇调节元件结合蛋白1c对骨骼肌细胞胰岛素受体底物1表达调控的影响

目的 探讨固醇调节元件结合蛋白1c（SREBP-1c）对大鼠骨骼肌细胞胰岛素受体底物1（IRS-1）表达调控的影响.方法 采用酶联合消化法取2～3 d SPF级雄性SD大鼠原代骨骼肌细胞,将原代细胞分为对照组（C）、对照＋胰岛素组（C＋I）、高脂组（PA）及高脂＋胰岛素组（PA＋I）.将表达SREBP-1c腺病毒转染L6细胞,根据感染复数（MOI）分为含绿色荧光蛋白阴性载体（GFP）组、MOI值为5、50、100、200组.将靶基因为SREBP-1c的干扰RNA （siRNA）转染L6细胞,并分为空白对照组、阴性siRNA组及SREBP-1c siRNA组.Western blotting和实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测SREBP-1c、IRS-1、蛋白激酶B（Akt）基因及蛋白表达,油红O染色法检测细胞内脂质沉积情况.多组资料比较采用方差分析,两两比较采用最小显著差异法.结果 与C组相比,PA组SREBP-1c基因和蛋白水平升高（分别为2.72±0.08比1.00±0.18,3.02 ±0.19比1.00±0.05,t=15.240、18.289,均P＜0.05）,IRS-1基因和蛋白水平降低（分别为0.71 ±0.04比1.00 ±0.05,0.82 ±0.04比1.00±0.04,t=-7.960、-6.052,均P＜0.05）,丝氨酸磷酸化IRS-1蛋白表达升高,丝氨酸磷酸化Akt（p-Akt）蛋白表达下降（t=20.987、-5.869,均P＜0.05）.与GFP组相比,MOI值为50、100和200组的SREBP-1c基因和蛋白表达呈剂量依赖性上升（均P＜0.05）,IRS-1基因和蛋白表达水平呈剂量依赖性下降（均P＜0.05）.与空白对照组和阴性siRNA组相比,SREBP-1c siRNA组SREBP-1c基因和蛋白水平降低,IRS-1蛋白表达升高（均P＜0.05）.结论 SREBP-1c可抑制骨骼肌IRS-1胰岛素信号通路,参与肌细胞胰岛素抵抗的发生.