肿瘤疫苗的临床研究进展

近几十年来随着基础免疫研究的深入,肿瘤疫苗的研究取得了很大的进步。肿瘤疫苗的研发在继续不断的应用于临床,并取得了令人鼓舞的结果。本文就几类重要肿瘤瘤苗的临床研究进展作一概述。

小剂量奥沙利铂联合复方苦参注射液抗肿瘤血管生成的实验研究

目的:观察小剂量奥沙利铂(L-OHP)联合复方苦参注射液对小鼠皮下移植瘤生长的抑制作用以及对肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达和微血管密度(MVD)的影响。方法:建立H22肝癌荷瘤小鼠模型后随机分为5组:5%葡萄糖注射液20ml/kg阴性对照组、环磷酰胺(CTX)20mg/kg阳性对照组、奥沙利铂0.75mg/kg组、复方苦参注射液3ml/kg组,复方苦参注射液3ml/kg+奥沙利铂0.75mg/kg联合组,每组10只。各组均给予腹腔等容量注射,连续用药10天。停药次日处死小鼠,计算瘤重抑制率。免疫组化法检测肿瘤组织中VEGF和MVD的表达。结果:小剂量奥沙利铂单药及联合复方苦参注射液组的瘤重均明显低于阴性对照组(P<0.05);肿瘤组织中的VEGF和MVD的表达明显低于阴性对照组(P<0.01)。结论:小剂量奥沙利铂对H22肝癌细胞小鼠皮下移植瘤肿瘤组织具有明显抑制作用,联合复方苦参注射液具有明显相加抑制作用,能抑制肿瘤组织中VEGF和MVD的表达;小剂量奥沙利铂联合复方苦参注射液在体内可能具有抑制肿瘤组织血管生成的作用。

参麦注射液联合羟基喜树碱抗肿瘤血管生成的实验研究

目的观察小剂量羟基喜树碱联合参麦注射液对小鼠H22细胞移植瘤的生长抑制作用及对肿瘤组织中微血管密度(MVD)和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法建立小鼠皮下肝癌H22模型,随机分为5组:生理盐水注射液20m l/kg阴性对照组、环磷酰胺(CTX)20mg/kg阳性对照组、羟基喜树碱0.2mg/kg组、参麦注射液20m l/kg组,参麦注射液20m l/kg联合羟基喜树碱0.2mg/kg组,每组10只小鼠。连续腹腔给予参麦注射液、羟基喜树碱以及两药联合治疗10天,观察用药后肿瘤生长情况,计算抑瘤率,并用免疫组化方法检测肿瘤组织中VEGF和MVD的表达。结果参麦注射液、羟基喜树碱具有显著抑制H22移植瘤的作用,且两药联合具有协同作用;免疫组化结果显示治疗组H22瘤体内MVD、VEGF表达均明显低于对照组。结论小剂量羟基喜树碱对H22荷瘤小鼠移植瘤具有一定的生长抑制作用,联合参麦注射液具有协同作用。同时,两药联合可明显抑制肿瘤组织VEGF、CD34的表达,推测其血管生成抑制作用亦参与抗肿瘤。

ERCC1 codon118单核苷酸多态性与非小细胞肺癌铂类化疗的临床预后研究

目的:探讨肿瘤石蜡组织中ERCC1 codon118单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)与接受铂类药物化疗非小细胞肺癌(chemotherapy;non-small-cell lung cancer,NSCLC)患者临床预后之间的关系。方法:采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)的方法评价47例石蜡包埋NSCLC肿瘤组织中DNA修复基因ERCC1第118位密码子的单核苷酸多态性,并比较不同基因型与NSCLC组织临床病理及铂类化疗预后之间的关系。结果:所有NSCLC患者中位生存时间为16.0月(95%CI,16.4-28.4月),中位无进展生存期为8.0月(95%CI,9.4-16.9月)。ERCC1 codon118与NSCLC临床病理特征均未见相关性。携带ERCC1 C/C基因型的NSCLC患者的中位总生存时间为25.0月,而携带C/T及T/T基因型患者的中位总生存时间仅为10.5月,两者有统计学差异(P=0.012)。携带ERCC1 C/C基因型的NSCLC患者的中位无进展生存期为13.2月,而携带C/T及T/T基因型患者的中位无进展生存期仅为6.0月,两者有统计学差异(P=0.029)。结论:ERCC1 codon118基因单核苷酸多态性与接受铂类药物化疗的NSCLC患者的总生存时间和无进展生存期有关,在一定程度上可以作为判断NSCLC患者铂类药物化疗的预后指标。

胃印戒细胞癌临床病理特征和生物标志的研究现状

胃印戒细胞癌占原发性胃癌的3．4％～39％，是一种含有大量黏液的特殊胃癌类型，具有恶性程度高、分化差、胃壁内弥漫浸润性生长、进展速度快、预后差的特点。除了早期诊断、尽早手术切除外，放化疗等治疗策略对印戒细胞癌的控制均不理想。近年来发现胃印戒细胞癌具有特殊的生物学特征，长期以来人们对其认识并不十分科学。因此，本文将近年来胃印戒细胞癌相关的临床病理特征和生物标志等内容作一综述，以期为其诊断和治疗提供新的思路与策略。

培美曲塞联合奥沙利铂方案和紫杉醇脂质体联合替吉奥方案二线治疗晚期胃癌的临床研究

目的：观察培美曲塞联合奥沙利铂方案和紫杉醇脂质体联合替吉奥方案在晚期胃癌二线治疗中的近期疗效和安全性。方法：经病理组织学或细胞学确诊的60例晚期胃癌患者随机分为两组，A 组28例（培美曲塞500mg／m^2 iv d1，奥沙利铂85mg／m^2 iv d1），B 组32例（紫杉醇脂质体135mg／m^2 iv d1，替吉奥40mg／m^2 bid d1～14），21天为1周期，2周期后评价疗效及不良反应发生情况。结果：60例患者均可评价疗效，A 组和 B 组有效率分别是14．29％和18．75％（P ＞0．05），疾病控制率分别是46．43％和56．25％（P ＞0．05），中位 TTP 分别为5．8个月和6．2个月（P ＞0．05）。化疗不良反应总体上均可耐受，A 组乏力、皮疹和脱发发生率为78．57％、35．71％和25．0％（P ＜0．05），B 组白细胞减少、血小板减少发生率分别为68．75％和62．50％（P ＜0．05）。结论：培美曲塞联合奥沙利铂方案和紫杉醇脂质体联合替吉奥方案二线治疗晚期胃癌的近期疗效相当，不良反应可耐受，可以作为晚期胃癌的有效姑息治疗方案。

高密度脂蛋白作为肿瘤靶向载体的研究进展

高密度脂蛋白作为一种内源性纳米颗粒,具有良好的生物相容性、可彻底生物降解、无免疫原性,不被体内网状内皮系统识别而可以在体内长期循环,是一种值得研究的药物靶向载体。此文主要介绍了近年来HDL作为药物载体,尤其是肿瘤靶向载体的研究新进展。

MDM2作为肿瘤标志物的研究进展

MDM2蛋白是重要的p53功能负性调节因子之一,通过与抑癌基因p53相结合,介导p53泛素化蛋白水解酶途径的降解,从而参与调节细胞周期停滞、细胞凋亡和DNA损伤修复。此外,MDM2通过非p53依赖性方式调节pRB、p21和E2F1等多种重要的细胞周期调节蛋白活性。MDM2在细胞周期调节中的重要作用使其成为肿瘤研究的兴趣点之一。近年来研究显示,MDM2参与人类肿瘤的发生发展,不仅与恶性肿瘤的浸润、转移、预后不良有关,且对化疗敏感性也有一定的影响。

循环肿瘤细胞评估转移性结直肠癌微波消融治疗的初步研究

目的:利用循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)评估转移性结直肠癌微波消融治疗及其预后的相关性。方法:研究分析了2015年1月至2018年4月在东南大学附属第二医院因转移性结直肠癌行肺部或肝脏病灶微波消融治疗的34例患者的临床资料。术前及术后均进行CTCs检测,并搜集患者临床特征。应用统计方法进一步分析研究。结果:微波消融术后,患者的CTCs测量值较术前升高,差异具有统计学意义(P=0.003)。对性别、年龄、微波治疗部位(同转移部位)、微波术前后CTCs变化状况、微波术后CTCs数目与随访截止时期患者生存状态进行分析后得出:女性患者在随访截止时期的生存状态优于男性,差异具有统计学意义(P=0.011);微波术后CTCs数目<7个/ml的患者生存状态优于术后CTCs数目≥7个/ml者,差异具有统计学意义(P=0.030)。而年龄(P=0.274)、微波治疗部位(同转移部位)(P=0.271)、微波术前后CTCs变化状况(P=0.214)与随访截止时期患者的生存状态之间无统计学差异。结论:转移性结直肠癌的患者CTCs数目在微波消融术后会增加;女性患者在随访截止时期的生存状态优于男性;微波术后CTCs数目<7个/ml的患者生存状态优于术后CTCs数目≥7个/ml者;年龄、微波治疗部位(同转移部位)、微波术前后CTCs变化状况与随访截止时期患者疾病状态不相关。

西黄丸抗肿瘤作用的研究现状

西黄丸为抗肿瘤治疗的经典中药方剂。近十年,该药的抗肿瘤机制及临床应用得到了广泛的研究,本文就西黄丸抗肿瘤作用的机制及临床研究进行综述,并且对此研究存在的不足提出了自己的见解,以便为该药的进一步研究及应用提供参考。

循环肿瘤细胞监测在结直肠癌肝转移微波消融治疗中临床价值的评估

目的探讨利用循环肿瘤细胞(CTCs)评估结直肠癌肝转移微波消融治疗的疗效及其与预后的关系。方法收集2014年1月至2018年5月在南京市第二医院因结直肠癌肝转移行肝脏病灶微波消融治疗的29例患者的临床资料,并纳入术前与术后CTCs检测结果。计数资料分析采用χ~2检验或Fisher确切概率法;生存分析采用Kaplan-Meier法和Logrank检验。结果经影像学评估,29例患者局部病灶微波消融的近期疗效为完全消融者8例、部分消融16例和进展5例。29例患者微波消融术后CTCs测量值较术前升高,差异有统计学意义(Z=-2. 489,P=0. 013);患者的年龄、性别、术后CTCs升高与否、结直肠癌原发部位、同时性或异时性肝转移与微波消融近期疗效均无关(P>0. 05)。微波消融术后CTCs数目<7个/ml患者局部肝转移病灶的近期疗效优于术后CTCs数目≥7个/ml者(P=0. 031)。29例患者的中位生存时间(OS)为30. 0个月(95%CI:10. 7～49. 3个月)。入组患者的年龄、结直肠癌原发部位及肝转移后的治疗方式与中位OS相关(P<0. 05),而性别、同时性或异时性肝转移、术后CTCs升高与否及术后CTCs值/ml与中位OS均无关(P>0. 05)。结论微波消融是结直肠癌肝转移局部治疗的有效手段,治疗前后CTCs数量的监测可能有助于评估其近期疗效。

临床学科的研究方向与选题思考

临床学科的科学研究有其自身的特点和要求,而研究方向的把握和具体课题的选定是临床学科科学研究的关键步骤。文中从临床学科研究的实用性、先进性和创新性、可行性以及综合性原则等方面介绍把握研究方向与选题的经验,并对研究生选题能力的培养进行介绍。

血清CYFRA21-1水平与鼻咽癌临床分期的关系研究

目的探讨血清CYFRA21-1水平与鼻咽癌临床分期的关系。方法收集117例鼻咽癌患者入院时采用电化学发光法测定的血清细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)结果,患者依照鼻咽癌福州分期标准(2008版)进行临床分期:Ⅰ期2例(1.7%),Ⅱ期21例(18.0%),Ⅲ期58例(49.6%),Ⅳa期26例(22.2%),Ⅳb期10例(8.5%),观察并比较不同临床分期患者血清CYFRA21-1水平。结果不同临床分期鼻咽癌患者血清CYFRA21-1水平有统计学差异(P<0.05),CYFRA21-1水平随临床分期升高呈上升趋势,Ⅳb期患者血清CYFRA21-1水平最高,为5.18(2.70,20.28)ng/ml。结论鼻咽癌患者血清CYFRA21-1水平越高,可能病期越晚。血清CYFRA21-1水平对鼻咽癌临床分期的判断有一定的参考作用。

食管癌表皮生长因子受体信号通路相关靶向治疗的临床研究进展

食管癌由于早期症状隐匿,且内镜筛查普及度不高,故初诊时大部分患者已处于局部晚期或晚期.非手术食管癌患者放化疗的疗效已到瓶颈,总体5年生存率约为30%.近年来,随着对肿瘤发生发展相关的信号通路及分子机制的研究不断深入,越来越多靶向信号通路的单克隆抗体或酪氨酸激酶抑制剂被设计出来,并成功应用于各种恶性肿瘤的治疗中.食管癌被证实为表皮生长因子受体(EGFR)普遍高表达的肿瘤类型,且EGFR过表达与食管癌的肿瘤侵袭浸润、转移及放化疗的耐受均密切相关,迄今临床上已有众多抗EGFR单克隆抗体或EGFR酪氨酸激酶抑制剂单用或与化疗、放疗及放化疗联合应用治疗食管癌的临床试验已经或正在开展,但其结论仍存在较多争议,亟待梳理.本文针对食管癌EGFR信号通路相关靶向治疗的临床研究进展进行综述.

EBV阳性胃癌免疫卡控点干预治疗意义及抗肿瘤作用研究

目的本研究以EB病毒(EBV)相关胃癌为研究对象,探讨在EBV相关胃癌中介导免疫耐受的免疫卡控点基因,进一步建立靶向于EBV抗原的免疫卡控点基因敲除的细胞毒性T细胞(CTL)的方法,并通过联合低剂量放疗协同免疫细胞发挥抗肿瘤效应,由此建立一种新型的综合免疫治疗模式,评估该治疗模式在EBV相关胃癌治疗中的价值。方法通过GEO公共数据库分析EBV阳性胃癌相关的免疫调控基因的表达及免疫组化明确相关程序性死亡蛋白1(PD-1)/程序性死亡蛋白配体1(PD-L1)蛋白表达情况,进一步采用CRISPR-Cas9基因编辑系统,建立PD-1分子敲除的EBV-CTL,评价PD-1分子敲除对EBV-CTL功能的影响;并构建SNU-719荷瘤小鼠模型,联合小剂量放疗评价基因敲除后的细胞在动物体内抗肿瘤作用优势。结果 EBV相关胃癌患者胃癌组织中的免疫相关调控基因明显上调,PD-L1表达水平明显高于非EBV相关胃癌患者。在PD-1敲除的T细胞的基础上,采用EBV相关抗原潜伏膜蛋白2A(LMP2A)诱导的CTL具有更强的γ-干扰素(IFN-γ)分泌水平,在EBV相关胃癌的裸鼠模型中,联合低剂量放疗后该细胞的抗肿瘤效果明显增强。结论PD-1等免疫卡控点基因的阻断治疗联合细胞治疗有望为EBV阳性胃癌提供新的治疗策略。

新型顺铂纳米微球的体内外抗肿瘤作用的研究

目的全面考察实验室前期自行合成的mPEG-PCL两嵌段高分子,并采用双乳化法将其用于负载顺铂,评价该纳米微球的体内外抗肿瘤活性。方法通过开环聚合法,制备mPEG-PCL两嵌段聚合物以及末端带有羟基的PCL作为载体,采用优化的w/o/w双乳化扩散/挥发法,制备负载顺铂的纳米微球。采用MTT法,评价该纳米微球在体外对于消化系肿瘤细胞株BGC823、H-epG2、H22的抗肿瘤活性,并与顺铂裸药相比较。在BGC823及LO2细胞株上验证空白微球的毒性。在ICR小鼠皮下接种H22肿瘤模型,采用瘤体内注射,验证纳米微球的抗肿瘤活性和副作用,并与顺铂裸药比较。结果通过开环聚合法合成mPEG-PCL两嵌段聚合物以及末端带有羟基的PCL,测定分子量和设计分子量相近。载药微球粒径(370.3±2.5)cm。顺铂的载药效率为77.4%,载药量为4.72%。体外释放实验显示,载药微球具有缓释特征。载药微球对于体外培养的肿瘤细胞系的抗肿瘤和顺铂裸药相似。空白微球对于肿瘤细胞BGC823及人肝细胞株LO2均无明显毒性。在体内实验中,载药微球对于肿瘤生长的抑制作用优于顺铂裸药,且呈现更好的剂量依赖性,当给药剂量从2.5 mg/kg增加到5 mg/kg时,抑瘤率提高,而顺铂裸药的抑瘤率并不因剂量的增加而提高。当顺铂裸药的给药剂量从2.5 mg/kg增加到5 mg/kg时,小鼠的体重增长明显减缓,而顺铂微球的剂量增加时,小鼠的体重变化并不受到明显影响。结论采用mPEG-PCL为载体,双乳化法合成的顺铂纳米微球,具有稳定及缓释的性质,在体外实验中,其抗肿瘤活性略低于裸药,和纳米微球的缓释特性有关。在体内实验中,载药微球的抗肿瘤活性优于顺铂裸药,且副作用小,因此动物能够耐受更大给药剂量。空白微球在体内外实验中均无明显毒性,说明载体应用安全。认为,mPEG-PCL顺铂微球作为顺铂的载体,具有良好的应用价值。

肿瘤原位疫苗:临床应用与创新探索

随着近年来肿瘤免疫治疗的迅速发展,肿瘤疫苗技术越来越受到关注。其中,让肿瘤本身“提供”抗原,并改善肿瘤微环境,从而促进机体产生肿瘤特异性免疫反应的“原位疫苗”技术,在临床转化应用方面具有鲜明的实用优势,有望成为广泛应用的免疫治疗手段。该文就目前的肿瘤原位疫苗技术现状,介绍了原位疫苗的两种常见实现手段:放疗和瘤内免疫注射作为原位疫苗的作用机制、应用现状、存在的局限以及发展前景等,并简要介绍了笔者团队在原位疫苗方面的工作,以期使该领域的发展得到关注。

微卫星状态与术后大肠癌患者的临床及病理特征相关性研究

目的:分析微卫星状态与术后大肠癌患者的临床及病理特征的相关性。方法:选取南京大学医学院附属鼓楼医院2014年6月至2017年6月病理诊断确诊的572例大肠癌患者的临床及病理资料,并对其手术切除标本进行微卫星状态与KRAS、NRAS突变状态的检测,同时采用免疫组织化学法检测组织中Ki-67、EGFR、MGMT及Lgr5的表达情况。按照微卫星不稳定性(microsatellite instability,MSI)状态,分为高度微卫星不稳定(high-frequency MSI,MSI-H)大肠癌组与微卫星稳定状态(microsatellite stability,MSS)和低度微卫星不稳定(low-frequency MSI,MSI-L)大肠癌组,比较组间的临床、病理等资料的差异。结果:572例大肠癌患者中40例(7.0%)为MSI-H,532例(93.0%)为MSS/MSI-L。与MSS/MSI-L组大肠癌病例相比MSI-H组具有以下特征:1)病灶常位于右半结肠;2)不同年龄段的发病比例相当;3)肿瘤分期较早,即Ⅰ/Ⅱ期分期比例较大(P=0.003);4)淋巴结转移比例较低(P=0.023);5)形成癌结节比例较低(P=0.005);6)KRAS第2外显子突变率较低(P=0.004),NRAS未突变。两组在MGMT、EGFR、Lgr5、Ki-67免疫组织化学阳性率检测未见显著性差异。结论:微卫星状态与大肠癌患者的年龄相关,与MSS/MSI-L的大肠癌患者相比,MSI-H的患者具有其特殊的临床病理特征,且NRAS及KRAS第2外显子的突变率低,MGMT甲基化率高,可为大肠癌的个体化诊断和治疗提供依据。

基于ISET技术的晚期胃癌循环肿瘤细胞检测及其临床意义

目的:观察基于ISET分离技术的胃癌晚期患者外周血循环肿瘤细胞(CTCs)的检出情况,探索其与患者临床特征的关系。方法:采用KATOⅢ细胞株进行ISET技术回收率及敏感性测试实验。选取2014年10月至2015年7月在南京大学医学院附属南京鼓楼医院肿瘤科经病理证实的34例胃癌Ⅳ期患者为研究对象,并与15例健康体检者作对照;采集受试者2.5ml静脉血,经CTCBIOPSY异常细胞分离染色仪检测其CTCs阳性率,并分析CTCs与患者临床特征的关系。结果:ISET分离技术的回收率平均值为85.5%,其敏感性为1个/2.5ml。胃癌组CTCs阳性率为23.5%(8/34),对照组均未检出CTCs。CTCs≥4个组与CTCs=0个组AFP、CA199、CA242平均数分别为:6 484.3 vs 102.9ng/ml、4 595.5 vs 683.8U/ml、23 332.1 vs 806.0U/ml,2组比较差异有统计学意义(P=0.021,0.049,0.020)。结论:基于ISET法的CTCs捕获技术具有较高的检出率。胃癌晚期患者外周血CTCs阳性率与患者临床特征具有相关关系。

胃癌免疫治疗临床研究进展

胃癌发病率高、预后差,缺乏有效的治疗方法。近年来,肿瘤免疫治疗取得了突破性进展,为肿瘤治疗带来了革命性改变,也给恶性肿瘤患者带来了新希望。目前,程序性死亡蛋白1(programmed cell death protein 1,PD-1)/程序性死亡蛋白配体1(programmed death-ligand 1,PD-L1)单抗已被获批用于胃癌的治疗,多项肿瘤疫苗、过继性细胞疗法治疗胃癌的临床试验也在进行中,本文对胃癌免疫治疗临床研究进展进行综述。