γ-氨酪酸和谷氨酸与胃癌关系的研究

目的 :探讨γ 氨酪酸 (GABA)和谷氨酸 (Glu)在胃癌组织、正常胃黏膜组织含量的差异。 方法 :采用高效液相色谱法 ,用异硫氰酸苯酯 (PITC)作衍生剂 ,紫外检测波长 2 5 4nm ,检测 30例胃癌组织、正常胃黏膜组织中GABA和Glu含量。 结果 :与正常胃黏膜组织比较 ,胃癌组织中GABA和Glu含量明显增加 (P <0 .0 5 ) ,但与胃癌的组织分型及淋巴结转移无显著性相关 (P >0 .0 5 )。 结论 :GABA和Glu参与胃癌的发生 ,有望成为胃癌诊断、治疗的新方向。

人胃癌裸小鼠体内原位移植浸润转移特征的研究

观察人胃癌原位移植至裸小鼠体内后的浸润转移特征，并探讨其发生机制。ＢＡＬＢ／Ｃ－ｎｕ／ｎｕ裸小鼠１２只，以ＳＧＣ－７９０１人胃癌细胞株裸鼠皮下移植瘤为材料，通过手术将瘤组织块移植到裸小鼠胃壁，待动物濒临死亡时进行系统解剖，观察其浸润转移的部位及特征。原位移植瘤全部成功，且所有动物均出现局部浸润及淋巴结转移，肝脏转移率为６６．７％，癌性腹水的发生率为５０％。移植肿瘤晚期还可向脾脏、胰腺及肾脏等处浸润转移，荷瘤鼠最后死于全身衰竭。人胃癌原位移植到裸小鼠体内后。

家族性Peutz-Jeghers综合征患者LKB1基因胚系突变的分析

目的研究家族性Peutz-Jeghers综合征患者中LKB1基因胚系突变特征。方法收集11个Peutz—Jeghers综合征家系，各家系先证者均有典型的黏膜黑斑以及肠道错构瘤性息肉。提取先证者外周血DNA，PCR扩增LKB1基因的9个外显子及其侧翼的部分内含子序列，测序并分析其变异情况和突变性质。收集250名正常人外周血并提取DNA，聚合酶链反应-变性高效液相色谱筛查验证。结果11个家系先证者中有8例患者LKB1基因外显子及侧翼碱基序列存在杂合性变异，变异类型共9种，包括7种点突变，1种外显子区域小片段碱基缺失以及1种侧翼内含子小片段碱基插入。其中4种考虑为病理性突变，还有4种仅为基因多态性表现，另外有1种变异性质未定。结论LKB1基因病理性突变是中国人家族性Peutz-Jeghers综合征患者的常见病因，且以点突变为主。

内镜活检诊断上皮样胃肠道间质瘤四例

胃肠道间质瘤（gastrointestinal stromal tumors，GIST）大多数能完整切除，不推荐手术前常规活检，部分有术前活检指征的患者活检阳性率也很低。但是部分GIST在黏膜面形成溃疡，可通过内镜活检而在术前获得病理诊断，多数为梭形细胞GIST，诊断较容易，但少数上皮样GIST诊断时可能需要与其他肿瘤鉴别，我们在会诊中曾遇到4例上皮样GIST，现将诊断过程中的体会报告如下。

CpG甲基转移酶诱导紧密连接蛋白7和8基因表达下调对人结肠癌HT-29细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨CpG甲基转移酶M．SssI对人结肠癌HT-29细胞中紧密连接蛋白7（claudin-7）和claudin-8表达的调节作用，及其对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法以50U／ml的M．SssI处理HT-29细胞24h（过甲基化组），采用重亚硫酸盐测序法检测claudin-7和claudin-8基因启动子区域CpG岛的甲基化状态，实时荧光定量PCR法检测claudin-8和claudin-8mRNA的表达，细胞免疫荧光技术和Westernblot法检测claudin-7和claudin-8蛋白的表达，Hoechst33342荧光染色法和流式细胞术检测HT-29细胞的凋亡，四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测HT-29细胞的增殖。同时设对照组（以2山PBS处理HT-29细胞）和5-Azacytidine组（以10I．t,moL／L5-Azaeytidine处理HT-29细胞）。结果过甲基化组claudin-7和claudin-8靶序列中发生甲基化的CpG胞嘧啶数目分别为25和10个，对照组分别为9和5个，5-Azacytidine组分别为0和3个。过甲基化组claudin-7和chudin-8 mRNA和蛋白的表达均明显低于对照组（均P〈0．05），而5-Azacyfidine组ciaudin-7和claudin-8mRNA和蛋白的表达均明显高于对照组（均P〈0．05）。Hoechst33342荧光染色结果显示，对照组和5-Azacytidine组的HT-29细胞均呈均匀蓝色荧光，细胞呈圆形，大小一致，无明显差异；而过甲基化组HT-29细胞呈高度白色荧光的凋亡细胞明显增多。流式细胞术检测结果显示，过甲基化组HT-29细胞的早期凋亡率比对照组增加84．7％（P=0．002）。MTr法检测结果显示，过甲基化组HT-29细胞的生长速度较对照组缓慢（P=0．002），HT-29细胞的增殖抑制率为32．1％；5-Azacytidine组HT-29细胞的增殖水平与对照组相似（P=0．084）。结论CpG甲基转移酶可以通过上调claudin-7和claudin-8基因启动子区的甲基化程度，下调HT-29细胞中claudin-8和elaudin-8mRNA和蛋白的表达，从而诱导细胞产生凋亡，并抑制其增殖。