先天性心脏病患者CHD7基因突变的研究

目的筛查先天性心脏病（congenital heart disease，CHD）患者CHD7（chromodomain helicase DNA-binding protein gene）基因的胚系突变，探讨其在先心病发生中的作用。方法采集67例临床确诊的CHD患儿、100名正常对照的外周静脉血，提取白细胞基因组DNA，PCR扩增C1-h97基因，变性高效液相色谱分析技术对PCR产物进行突变筛选，出现异常峰型的扩增片段进行DNA测序，明确突变位点和类型，并进一步结合病例对照和生物信息学分析探讨变异的功能意义。结果67例先心病患者中共检出7种单碱基的替换，位于CHD7的不同内含子。其中，IVS11＋127A〉G和IVS12＋21T〉G的等位基因频率均为0．0075，为罕见变异；而Ⅳs2＋34G〉A、IVS4＋39G〉A、IVS12—5T〉C和IVS16＋51C〉A等位基因频率为0．2635、0．2156、0．1505、0．3636，属于单核苷酸多态性；IVS12—5T〉C在CHD组的检出频率显著低于正常对照组（5．42％VS9．57％，P〈0．05）；而IVS14—35C〉G则仅见于CHD患儿。生物信息学分析显示，IVS12—5T〉C替换具有增强外显子剪切的效应。结论CHD7基因单核苷酸多态性变异IVS12—5T〉C对CHD的发生可能具有保护作用，而CHD7基因的突变并不是构成散发性先天性心脏病的主要原因。