circFOXK2靶向miR-4677-3p促进口腔鳞癌细胞增殖、侵袭和迁移

目的:探讨circFOXK2靶向miR-4677-3p对口腔鳞癌(OSCC)细胞恶性行为的影响。方法:RT-qPCR检测circFOXK2和miR-4677-3p在OSCC组织和癌旁组织的表达。分别将si-circFOXK2、si-NC、miR-NC、miR-4677-3p模拟物、pcDNA、pcDNA-circFOXK2、si-circFOXK2+anti-miR-NC、si-circFOXK2+anti-miR-4677-3p转染OSCC细胞HSC3。通过划痕愈合实验、CCK-8法、Transwell实验、集落形成实验检测circFOXK2和miR-4677-3p表达对HSC3细胞恶行行为的影响。circFOXK2和miR-4677-3p的靶向关系通过双荧光素酶法确定。结果:OSCC组织中circFOXK2表达水平显著高于癌旁组织(P<0.01),miR-4677-3p表达水平显著低于癌旁组织(P<0.01)。抑制circFOXK2表达后HSC3细胞吸光度(OD)值、划痕愈合率、克隆形成数、侵袭数显著降低(P<0.01),miR-4677-3p表达水平显著升高(P<0.01)。过表达miR-4677-3p后HSC3细胞OD值、划痕愈合率、克隆形成数、侵袭数显著降低(P<0.01)。miR-4677-3p是circFOXK2的靶基因。下调miR-4677-3p显著减弱抑制circFOXK2表达对HSC3细胞OD值、划痕愈合率、克隆形成数、侵袭数的影响(P<0.01)。结论:抑制circFOXK2可通过促进miR-4677-3p表达来抑制OSCC细胞增殖、迁移和侵袭。

miR-155在炎症微环境下对牙周膜干细胞成骨分化的调控作用

目的 研究miR-155在炎症微环境下对牙周膜干细胞(periodontal ligment stem cells, PDLSCs)成骨分化的调控作用。方法 将PDLSCs按照不同处理方法分为对照组、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)组、miR-阴性对照(NC)组、TNF-α+miR-NC组、TNF-α+miR-155抑制物组、miR-155组,采用荧光定量PCR检测miR-155、Runt相关转录因子2(recombinant runt related transcription factor 2,Runx2)、骨钙素(osteocalcin, OCN)、Ⅰ型胶原(collagenⅠ,Col-Ⅰ)、骨形态发生蛋白5(bone morphogenetic protein 5,BMP5)、骨形态发生蛋白10(bone morphogenetic protein 10,BMP10) mRNA表达水平;Western blot检测Runx2、OCN、Col-Ⅰ、BMP5、BMP10蛋白表达;茜素红染色检测细胞钙结节形成;双荧光素酶报告基因验证miR-155靶向BMP5、BMP10。结果 与对照组比较,TNF-α组PDLSCs中miR-155的表达水平明显升高,Runx2、OCN、Col-Ⅰ的mRNA和蛋白表达水平以及钙结节形成量降低(P<0.05);与miR-NC组比较,TNF-α+miR-NC组PDLSCs中Runx2、OCN、Col-Ⅰ的mRNA和蛋白表达水平及钙结节形成量降低,差异有统计学意义(P<0.05);与TNF-α+miR-NC组比较,TNF-α+miR-155抑制物组PDLSCs中Runx2、OCN、Col-Ⅰ的mRNA和蛋白表达水平及钙结节形成量明显升高(P<0.05);miR-155靶向负调控BMP5、BMP10表达。结论 炎症微环境下PDLSCs中miR-155表达增加,敲低miR-155可促进炎症微环境下PDLSCs成骨分化,靶向调控BMP5及BMP10是相关分子机制。