新型冠状病毒肺炎疫情期间男科实验室生物安全

2019年12月新发现的新型冠状病毒感染的肺炎(2019冠状病毒病)疫情来势迅猛,临床发现新型冠状病毒感染者和无症状感染者均可能成为传染源。尽管经呼吸道飞沫和密切接触传播被认为是主要的传播途径,但在相对封闭的环境中存在经气溶胶传播的可能。现已发现鼻咽拭子、痰和其他下呼吸道分泌物、血液、粪便、尿液等标本中可检测出新型冠状病毒核酸,精液中是否可检出新型冠状病毒核酸尚无定论。有报道发现新型冠状病毒可能影响血管紧张素转化酶2(ACE2)高表达的睾丸,同时精液与尿液的排出有着共同通道。因此,理论上精液也有可能携带病毒。男科实验室不仅可能接触包含精液在内的以上多数的体液标本,而且男科实验室的许多操作为开放性操作,有产生气溶胶的风险。因此,在新型冠状病毒疫情期间有必要采取相应的防护措施以降低感染风险。通过参照现有的疫情认知并借鉴其他相关经验,结合男科实验室的工作特点,我们将疫情期间男科实验室工作需要注意的生物安全问题进行总结,供同行参考。

新型冠状病毒肺炎疫情期间男科疾病的管理方法与思考

新型冠状病毒肺炎(COVID-19),已被国家卫生健康委员会列为乙类传染病,按照甲类传染病进行管理,此次疫情同时被WHO定义为国际关注的突发公共卫生事件。疫情期间非必要的门诊就诊无疑增加了很多病患、医患之间感染的风险。如何为男科疾病患者提供科学的医疗指导显得尤为重要,也是男科管理的当务之急。此外,新型冠状病毒肺炎及其目前临床治疗方案是否会对男性生殖系统造成损伤,也值得广大临床科研工作者关注。

雄蚕益肾方对LOH大鼠Leydig细胞胆固醇转运蛋白、睾酮合成酶和SF-1表达的影响

目的:探讨雄蚕益肾方对LOH大鼠Leydig细胞胆固醇转运蛋白、睾酮合成酶和SF-1表达的影响。方法:25只18月龄雄性SD大鼠随机均分为模型组、丙酸睾酮组、雄蚕益肾方-低、中、高剂量组,2月龄雄性SD大鼠5只设为正常组。雄蚕益肾方-低、中、高剂量组分别给予10.4、20.8、41.6 g/(kg·d)体重剂量的雄蚕益肾方配方颗粒剂灌胃;丙酸睾酮组大鼠肌注5.21 mg/(kg·d).体重剂量的丙酸睾酮,每周3次;正常组和模型组给予相同体积的蒸馏水灌胃,均连续28 d。实验结束后取睾丸组织进行Western印迹检测StAR、TSPO、CYP11A1、HSD3B7、HSD17B4和SF-1蛋白表达。结果:模型组大鼠睾丸组织StAR、TSPO、CYP11A1、HSD3B7、HSD17B4蛋白和SF-1表达均显著低于正常组(P<0.05);与模型组相比,雄蚕益肾方-低、中、高各剂量组大鼠睾丸组织StAR、TSPO、CYP11A1、HSD3B7、HSD17B4蛋白和SF-1显著增高(P<0.05)。结论:雄蚕益肾方能上调LOH大鼠睾丸组织胆固醇转运蛋白(StAR、TSPO)、睾酮合成酶(CYP11A1、HSD3B7、HSD17B4)以及上游转录因子SF-1表达水平,可能是其干预LOH的机制之一。

雄蚕益肾方通过PINK1/Parkin通路介导LOH大鼠睾丸间质细胞线粒体自噬研究

目的:探讨雄蚕益肾方介导PINK1/Parkin通路对迟发性性腺功能减退症(LOH)大鼠睾丸间质细胞(LC)线粒体自噬的影响。方法:20只18月龄雄性SD大鼠随机均分为LOH模型组,雄蚕益肾方低、中、高剂量组,2月龄雄性SD大鼠5只设为正常对照组。雄蚕益肾方低、中、高剂量组分别给予10.4、20.8、41.6 g/kg体重剂量的雄蚕益肾方配方颗粒剂灌胃;正常对照组和LOH模型组给予相同体积的蒸馏水灌胃,均连续28 d。实验结束后电镜观察睾丸组织LC超微结构,Western印迹检测PINK1、Parkin和p62蛋白表达。结果:正常对照组LC线粒体形态基本正常,存在明显自噬现象,LOH模型组线粒体自噬少,雄蚕益肾方低、中、高剂量组线粒体有自噬发生。LOH模型组大鼠睾丸组织PINK1、Parkin蛋白表达均显著低于正常对照组(P<0.05),p62蛋白表达显著高于正常对照组(P<0.05);与LOH模型组比较,雄蚕益肾方干预后大鼠睾丸组织PINK1蛋白(低、中、高剂量组)、Parkin蛋白(中、高剂量组)表达显著升高(P<0.05),p62蛋白(低、中、高剂量组)表达显著降低(P<0.05)。结论:LOH大鼠睾丸组织线粒体自噬水平下降,雄蚕益肾方干预后线粒体自噬水平增加,可能与提高睾丸组织PINK1、Parkin蛋白表达,降低p62蛋白表达,影响LC超微结构等有关。

AAPH体外诱导小鼠睾丸间质细胞氧化应激模型建立与评价

目的:利用偶氮二异丁脒盐酸盐(AAPH)作为刺激源,建立体外小鼠睾丸间质细胞(LCs)氧化应激损伤模型,并进行生理功能评价。方法:实验一将小鼠睾丸间质细胞(TM3)随机分为6组,分别加入0、1、5、10、50和100mmol/L AAPH,分别作用4、8、24 h。测定TM3细胞活性(MTS法)、衰老情况(β-半乳糖苷染色法)、线粒体膜电位(JC-1荧光法)、线粒体DNA拷贝数(QPCR法)。实验二在实验一筛选得出AAPH作用浓度区间(≤10 mmol/L)基础上,将TM3细胞随机分为9组,分别加入0、0.1、0.5、1、2、4、6、8和10 mmol/L AAPH,分别作用24、48、72 h。测定TM3细胞活性、ROS水平、衰老情况。筛选出AAPH诱导TM3细胞氧化应激损伤的最佳作用浓度和作用时间。结果:实验一表明,4 h 50 mmol/L、8 h 10 mmol/L、24 h 5 mmol/L AAPH组TM3细胞存活率均≥50%,AAPH初步浓度应≤10mmol/L,作用时间可≥24 h。实验二表明,24 h 6 mmol/L AAPH组TM3细胞存活率≥70%、ROS阳性率为56.88%、线粒体膜电位正常、mtDNA拷贝数上升、未出现衰老,可以作为诱导TM3细胞氧化损伤模型的适宜条件。结论:AAPH浓度6 mmol/L,作用时间24 h,可作为诱导TM3细胞氧化损伤模型的适宜条件。