肿瘤疫苗的临床研究进展

近几十年来随着基础免疫研究的深入,肿瘤疫苗的研究取得了很大的进步。肿瘤疫苗的研发在继续不断的应用于临床,并取得了令人鼓舞的结果。本文就几类重要肿瘤瘤苗的临床研究进展作一概述。

肿瘤原位疫苗:临床应用与创新探索

随着近年来肿瘤免疫治疗的迅速发展,肿瘤疫苗技术越来越受到关注。其中,让肿瘤本身“提供”抗原,并改善肿瘤微环境,从而促进机体产生肿瘤特异性免疫反应的“原位疫苗”技术,在临床转化应用方面具有鲜明的实用优势,有望成为广泛应用的免疫治疗手段。该文就目前的肿瘤原位疫苗技术现状,介绍了原位疫苗的两种常见实现手段:放疗和瘤内免疫注射作为原位疫苗的作用机制、应用现状、存在的局限以及发展前景等,并简要介绍了笔者团队在原位疫苗方面的工作,以期使该领域的发展得到关注。

新型顺铂纳米微球的体内外抗肿瘤作用的研究

目的全面考察实验室前期自行合成的mPEG-PCL两嵌段高分子,并采用双乳化法将其用于负载顺铂,评价该纳米微球的体内外抗肿瘤活性。方法通过开环聚合法,制备mPEG-PCL两嵌段聚合物以及末端带有羟基的PCL作为载体,采用优化的w/o/w双乳化扩散/挥发法,制备负载顺铂的纳米微球。采用MTT法,评价该纳米微球在体外对于消化系肿瘤细胞株BGC823、H-epG2、H22的抗肿瘤活性,并与顺铂裸药相比较。在BGC823及LO2细胞株上验证空白微球的毒性。在ICR小鼠皮下接种H22肿瘤模型,采用瘤体内注射,验证纳米微球的抗肿瘤活性和副作用,并与顺铂裸药比较。结果通过开环聚合法合成mPEG-PCL两嵌段聚合物以及末端带有羟基的PCL,测定分子量和设计分子量相近。载药微球粒径(370.3±2.5)cm。顺铂的载药效率为77.4%,载药量为4.72%。体外释放实验显示,载药微球具有缓释特征。载药微球对于体外培养的肿瘤细胞系的抗肿瘤和顺铂裸药相似。空白微球对于肿瘤细胞BGC823及人肝细胞株LO2均无明显毒性。在体内实验中,载药微球对于肿瘤生长的抑制作用优于顺铂裸药,且呈现更好的剂量依赖性,当给药剂量从2.5 mg/kg增加到5 mg/kg时,抑瘤率提高,而顺铂裸药的抑瘤率并不因剂量的增加而提高。当顺铂裸药的给药剂量从2.5 mg/kg增加到5 mg/kg时,小鼠的体重增长明显减缓,而顺铂微球的剂量增加时,小鼠的体重变化并不受到明显影响。结论采用mPEG-PCL为载体,双乳化法合成的顺铂纳米微球,具有稳定及缓释的性质,在体外实验中,其抗肿瘤活性略低于裸药,和纳米微球的缓释特性有关。在体内实验中,载药微球的抗肿瘤活性优于顺铂裸药,且副作用小,因此动物能够耐受更大给药剂量。空白微球在体内外实验中均无明显毒性,说明载体应用安全。认为,mPEG-PCL顺铂微球作为顺铂的载体,具有良好的应用价值。

培美曲塞联合奥沙利铂方案和紫杉醇脂质体联合替吉奥方案二线治疗晚期胃癌的临床研究

目的：观察培美曲塞联合奥沙利铂方案和紫杉醇脂质体联合替吉奥方案在晚期胃癌二线治疗中的近期疗效和安全性。方法：经病理组织学或细胞学确诊的60例晚期胃癌患者随机分为两组，A 组28例（培美曲塞500mg／m^2 iv d1，奥沙利铂85mg／m^2 iv d1），B 组32例（紫杉醇脂质体135mg／m^2 iv d1，替吉奥40mg／m^2 bid d1～14），21天为1周期，2周期后评价疗效及不良反应发生情况。结果：60例患者均可评价疗效，A 组和 B 组有效率分别是14．29％和18．75％（P ＞0．05），疾病控制率分别是46．43％和56．25％（P ＞0．05），中位 TTP 分别为5．8个月和6．2个月（P ＞0．05）。化疗不良反应总体上均可耐受，A 组乏力、皮疹和脱发发生率为78．57％、35．71％和25．0％（P ＜0．05），B 组白细胞减少、血小板减少发生率分别为68．75％和62．50％（P ＜0．05）。结论：培美曲塞联合奥沙利铂方案和紫杉醇脂质体联合替吉奥方案二线治疗晚期胃癌的近期疗效相当，不良反应可耐受，可以作为晚期胃癌的有效姑息治疗方案。

汉防己甲素抑制恶性腹腔积液中原代肿瘤细胞作用的观察

目的:研究中药单体汉防己甲素对恶性腹腔积液中原代肿瘤细胞的抗肿瘤作用。方法:体外培养肿瘤细胞系BGC-823、LOVO和SMMC-7721,WST-8法检测汉防己甲素在细胞系中的抗肿瘤作用。收集21例经病理确诊的恶性腹腔积液并分离原代肿瘤细胞,用WST-8法检测原代肿瘤细胞中汉防己甲素及化疗药的药物敏感性,荧光定量RT-PCR法检测汉防己甲素对凋亡相关蛋白基因Survivin及Bcl-2mRNA表达的作用。结果:汉防己甲素对21例恶性腹腔积液中原代肿瘤细胞IC50平均值为32.96μm,与三株细胞系中的IC50差异无统计学意义,P>0.05。汉防己甲素对胃癌、大肠癌及其他消化道肿瘤来源的腹水中原代肿瘤细胞的抗肿瘤作用差异无统计学意义,P>0.05。2例对汉防己甲素耐药的原代肿瘤细胞对多西紫杉醇、氟尿嘧啶和顺铂存在交叉耐药,而对化疗药物耐药的原代肿瘤细胞对汉防己甲素无交叉耐药。汉防己甲素对部分细胞系及原代细胞中凋亡相关蛋白Survivin及Bcl-2mRNA有明显下调作用,P<0.05。结论:汉防己甲素对恶性腹腔积液原代肿瘤细胞,尤其对化疗药物耐药的肿瘤细胞有一定的抗肿瘤作用。

微环境pH值对肿瘤细胞生长的影响

目的观察肿瘤细胞外pH值(pHe)对于肿瘤细胞活力和生物学行为的影响。方法以人大肠癌株SW116、LoVo细胞及人胃癌细胞株MKN-28为研究对象,采用MTT法比较细胞在不同微环境pH值下细胞活力的变化,并观察细胞形态的变化,测定细胞在不同pH值下的凋亡率。采用实时荧光定量PCR测定不同pH值下Bcl-2及survivin基因表达的变化。结果当培养液pH值从7.4下降到6.8后,三株细胞的活力均有明显增加(P<0.05)。形态观察发现,在pHe 6.8时,细胞在培养液的密度更高,形态较pHe7.4时无明显变化。凋亡检测显示,pHe6.8时细胞活力良好,未发生凋亡。在pHe6.8环境下,细胞Bcl-2基因表达较pHe7.4时显著降低(P<0.05),survivin基因表达的变化差异无统计学意义。结论肿瘤局部微环境的低pH值使肿瘤细胞加速生长,细胞活力及形态无变化,细胞凋亡相关基因Bcl-2的表达亦受到影响。

循环肿瘤细胞与个体化药物治疗

循环肿瘤细胞(circulating tumorcells,CTC)已经被证实存在于肿瘤患者尤其是晚期患者的外周血中。近年来CTC的研究技术迅速发展并且在肿瘤个体化药物治疗方面显示出良好的发展前景。CTC的重要性在于它可以使基因表达/突变的检测变得切实可行,从而实现"实时"个体化药物治疗。本文主要介绍现有的CTC检测/收集技术及其在个体化药物治疗方面的作用。

血清CYFRA21-1水平与鼻咽癌临床分期的关系研究

目的探讨血清CYFRA21-1水平与鼻咽癌临床分期的关系。方法收集117例鼻咽癌患者入院时采用电化学发光法测定的血清细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)结果,患者依照鼻咽癌福州分期标准(2008版)进行临床分期:Ⅰ期2例(1.7%),Ⅱ期21例(18.0%),Ⅲ期58例(49.6%),Ⅳa期26例(22.2%),Ⅳb期10例(8.5%),观察并比较不同临床分期患者血清CYFRA21-1水平。结果不同临床分期鼻咽癌患者血清CYFRA21-1水平有统计学差异(P<0.05),CYFRA21-1水平随临床分期升高呈上升趋势,Ⅳb期患者血清CYFRA21-1水平最高,为5.18(2.70,20.28)ng/ml。结论鼻咽癌患者血清CYFRA21-1水平越高,可能病期越晚。血清CYFRA21-1水平对鼻咽癌临床分期的判断有一定的参考作用。

药物相关基因指导下的胃肠道肿瘤个体化疗

药物相关基因指导下的个体化疗是肿瘤化疗最引人瞩目的发展方向。本文主要介绍最近5年来国外5-氟尿嘧啶、铂类及羟基喜树碱类代谢相关基因及其与胃癌、大肠癌化疗效果的相关性,旨在为消化道肿瘤个体化疗提高疗效、减少毒副作用提供帮助。

配比结构影响mPEG-PCL顺铂纳米粒子体外抗肿瘤的作用

目的探讨实验室前期自行合成的5种配比的顺铂纳米粒子在体外的抗肿瘤作用。方法通过开环聚合法制备mPEG-PCL两嵌段高分子和末端带有羟基的PCL,在开环聚合反应时,控制PEG和PCL的比例,合成不同亲水/疏水比例的聚合物。采用优化的w/o/w双乳化扩散/挥发法,制备负载顺铂药物的纳米粒子。采用MTT法研究其在体外对人胃癌细胞株BGC-823及SGC-7901的抗肿瘤活性,并在BGC-823及SGC-7901上验证空白纳米粒子的毒性。结果体外实验显示5种配比纳米粒子的细胞毒性均呈现一定的异质性。所有纳米粒子均显示出良好的生物相容性。结论纳米粒子的配比不同,其粒径、载药量等方面的性质也存在一定差异,体外抗肿瘤效果则呈现出一定的异质性,应当选择最佳配比进行深入研究和应用。

COX-2和HER-2在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的研究COX-2和HER-2在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测了68例非小细胞肺癌组织中COX-2和HER-2的表达水平,分析两者与临床病理参数之间的关系以及分析两者之间的相互关系。结果非小细胞肺癌中COX-2阳性表达率为54/68(79.41%),COX-2的高表达与病理类型及TNM分期相关(P<0.05);HER-2阳性表达率为26/68(38.24%),HER-2的表达与年龄相关(P<0.05)。HER-2与COX-2的表达强度之间呈显著正相关(r=0.2486,P=0.041)。HER-2阳性/COX-2高表达的NSCLC临床分期晚、淋巴结转移率高。结论COX-2在NSCLC中高水平表达并与HER-2密切相关,检测COX-2与HER-2的表达对NSCLC预后的判断可能具有重要价值。

新型顺铂纳米微球的制备及性质研究

目的:采用自行合成的高分子载体,制备负载顺铂的纳米微球,全面考察其性质。方法:通过开环聚合法,制备单甲氧基聚乙二醇-聚己内酯(mPEG-PCL)两嵌段聚合物以及末端带有羟基的PCL作为载体,采用优化的w/o/w双乳化扩散/挥发法,制备负载顺铂的纳米微球。考察载体的结构、分子量、纳米微球的形态、粒径分布、稳定性、生物相容性等性质。结果:通过开环聚合法合成mPEG-PCL两嵌段聚合物以及末端带有羟基的PCL,测定分子量和设计分子量相近。通过双乳剂法制备的空白粒子平均粒径为326.9±5.4nm,载药粒子在冻干前后的粒径分别为339.1±4.9及370.3±2.5nm。粒子呈规整的球形,在水溶液中稳定。顺铂的载药效率为77.4%,载药量为4.72%。体外释放实验显示,载药粒子具有缓释特征,在6h、24h、48h分别释放53%、75%、93%。载体在高浓度时对细胞生长无抑制作用,毒性低。结论:研究表明这种新型载药系统具有良好的应用价值。

硝酸甘油提高晚期非小细胞肺癌化疗疗效研究进展

0引言硝酸甘油是众所周知的扩血管药物,它能减轻心脏前后负荷,主要用于缓解急性发作的心绞痛。近五年来的基础与临床试验研究发现,硝酸甘油能够显著提高晚期非小细胞肺癌患者的化疗疗效[1]。本文将从基础研究和临床试验两方面综述硝酸甘油提高晚期非小细胞肺癌化疗疗效的研究进展。

伴神经内分泌分化胃癌的临床病理特征及预后分析

目的比较伴与不伴神经内分泌分化(NED)胃癌患者的临床病理特征及预后。方法回顾性分析2010年1月至2017年8月就诊于南京鼓楼医院伴NED 98例胃癌患者和同期不伴NED 338例患者的临床病理资料,比较两组患者临床病理特征的差异,Kaplan-Meier法进行生存分析并行Log-rank检验,Cox风险比例回归模型分析影响预后的独立影响因素。结果伴与不伴NED的两组胃癌患者均具有以下特征:起病症状相似,年龄<65岁和肿瘤直径≥4 cm更多见,神经浸润比例较高及淋巴结和远处转移比例相仿;而两组在性别、组织学类型、T分期、TNM分期及脉管浸润等方面的差异有统计学意义(P<0.05)。Cg A、Syn的阳性率分别为70.4%、75.5%,共同阳性率为45.9%。生存分析显示伴NED胃癌患者术后1、3、5年生存率分别为73.5%、46.2%、34.2%,明显低于不伴NED胃癌患者的88.9%、64.1%、53.7%,差异有统计学意义(P<0.05)。单因素预后分析结果显示,伴NED胃癌患者的预后与年龄、肿瘤直径、分化程度、TNM分期、脉管和神经是否浸润有关(P<0.05)。多因素分析结果显示,年龄是影响伴NED胃癌患者预后的独立因素(P<0.05)。结论免疫组化染色是判定胃癌伴NED的主要方法,伴NED胃癌患者预后较差。

部分临床常用药物作为抗肿瘤增效药物的应用与机制

部分临床常用药物虽并不作为抗肿瘤药物应用，却可增进化疗药物和分子靶向药物的疗效，或逆转肿瘤对化疗药物和分子靶向药物的耐药性。对于晚期、多线治疗失败的难治性肿瘤，值得尝试单独应用或与化疗药物、分子靶向药物联用。这些药物包括pH值调节药物、血糖调节药物及心血管类药物等。

土鳖虫含药血清对肝癌HepG-2细胞增殖的抑制作用

目的研究土鳖虫含药血清对肝癌HepG-2细胞增殖的抑制作用及其对细胞凋亡和细胞周期的影响,探讨土鳖虫抗肿瘤效应。方法以土鳖虫乳剂给SD大鼠灌胃,采血并制备血清。四氮唑盐法(MTT法)检测含药血清对肝癌HepG-2细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪测定细胞周期和细胞凋亡。结果土鳖虫含药血清可明显抑制肝癌HepG-2细胞体外增殖,20%土鳖虫含药血清作用72h后抑制率高达56.728%,抑制率呈浓度依赖关系。流式细胞仪检测细胞凋亡发现肝癌HepG-2细胞以坏死居多,细胞周期多阻滞于G0-G1期。结论土鳖虫含药血清对肝癌HepG-2细胞体外增殖有明显的抑制作用。

液性撤退法联合同轴法减少CT引导下经皮肺穿刺活检气胸并发症

目的:为了降低CT引导下经皮肺穿刺活检的气胸并发症发生率,我们采用了"液性撤退法"。本文初步探讨液性撤退法与同轴法共同应用对于CT引导下经皮肺穿刺活检气胸并发症的减少作用。方法:回顾性分析从2013年1月至2014年12月38例采用同轴法联合液性撤退法进行CT引导下经皮肺穿刺活检的病人,主要研究气胸的发生率。结果:38例肺穿病人中,37例获得明确的病理结果。气胸共发生4例(10.5%),均为轻度气胸,1例操作中发生少量出血(2.6%),6例肺穿后少量痰中带血(15.8%),无感染、针道种植转移或空气栓塞的发生。结论:采用同轴法联合我们首创的液性撤退法,可准确、安全地对肺部病灶进行活检,与单纯应用同轴法比较(气胸发生率30%左右),液性撤退法可显著降低气胸的发生率(10%左右),该方法值得进一步研究和应用。

帕米膦酸二钠与唑来膦酸治疗肺癌骨转移性疼痛的近期疗效及成本效益分析

目的:比较帕米膦酸二钠与唑来膦酸治疗肺癌骨转移性疼痛的近期疗效、不良反应及其对于患者住院时间及住院费用的影响。方法:将40例确诊肺癌骨转移患者随机分为2组:帕米膦酸二钠组(20例)、唑来膦酸组(20例)。帕米膦酸二钠注射液60mg,加入500ml生理盐水内,静脉滴注4h;唑来膦酸注射液4mg,加入100ml生理盐水内,静脉滴注20min。两组均每4周给药1次,共2次给药。比较2组患者的疼痛控制效果、血碱性膦酸酶(AKP)、血钙的变化、平均住院时间及总住院费用。结果:帕米膦酸二钠、唑来膦酸组的获益率分别为90%及85%,不良反应发生率无明显差异,均未发生下颌骨坏死。2组治疗后AKP及血钙均明显下降(P<0.05)。2组病人的住院时间(P>0.05)及住院费用无明显差异(P>0.05)。结论:帕米膦酸二钠与唑来膦酸应用于本研究中的肺癌病人,在疗效、不良反应及成本效益方面均无明显差异。

中药与化疗药物的协同作用

体内外研究均证实部分中药(单体或有效成分)与化疗药物存在协同增效作用,其机理可能与中药能增强机体免疫功能、直接杀伤肿瘤细胞、诱导肿瘤细胞凋亡及调节细胞周期、逆转化疗耐药等有关。本文对近年来中药单体或方剂协同多种化疗药物的研究进行归纳分析,为肿瘤临床治疗过程中联合应用中药和化疗药物提供理论依据。

紫杉类药物温敏纳米胶束的小鼠LD_(50)及其毒性差异

目的研究紫杉醇(Pac)和多希紫杉醇(Doc)温敏纳米胶束的急性毒性作用及其在结合和未结合热疗情况下的毒性差异。方法用不同剂量Doc和Pac温敏纳米胶束对昆明鼠行尾静脉注射,每个剂量分为热疗和非热疗组,观察小鼠用药后的急性毒副反应,计算半数致死量(LD50)。分别以两种药物最大耐受剂量对相应实验组行小鼠尾静脉注射(对照组给予等剂量生理盐水),测定外周血的白细胞和血小板。结果Doc温敏纳米胶束热疗和非热疗时小鼠尾静脉注射的LD50分别为(330.94±23.58)mg/kg和(278.07±19.81)mg/kg,Pac温敏纳米胶束的LD50分别为(104.18±5.85)mg/kg和(95.50±5.10)mg/kg。Pac和Doc均可以引起外周血白细胞和血小板显著降低;而两种药物的温敏纳米胶束对外周血白细胞和血小板的影响较小,且热疗比非热疗时影响更小。结论Pac和Doc温敏纳米胶束的急性毒性和对外周血白细胞和血小板的影响小于临床上常用的Pac和Doc注射液,且热疗时的毒性更小。