雷洛昔芬通过促进一氧化氮释放诱导脂肪干细胞向成骨细胞分化

目的探讨雷洛昔芬诱导脂肪干细胞向成骨细胞分化作用及其机制。方法从大鼠体内提取分离脂肪干细胞,并进行多向分化能力鉴定。在成骨诱导培养液中加入不同浓度雷洛昔芬(0、0.01、0.1、1μmol.L-1)、非选择性一氧化氮合成酶抑制剂L-硝基精氨酸甲酯(L-NAME(1 mmol.L-1))、雷洛昔芬(1μmol.L-1)+L-NAME(1 mmol.L-1),在共同条件培养14～28 d,测定各项成骨细胞形成指标。结果雷洛昔芬(0.01～1μmol.L-1)能明显提高脂肪干细胞胞质一氧化氮的释放和成骨细胞分化标志基因(碱性磷酸酶、骨形态发生蛋白2和Ⅰ型胶原)的表达以及矿化结节的生成,L-NAME可以拮抗雷洛昔芬引起的胞质一氧化氮的释放,并同时抑制雷洛昔芬诱导脂肪干细胞向成骨分化的作用。结论雷洛昔芬可以促进胞质一氧化氮释放,从而诱导脂肪干细胞向成骨细胞分化。

结合激光微切割与cDNA芯片技术筛选胃癌进展过程中差异表达的基因

目的:结合激光微切割(LMD)和基因芯片技术筛选胃癌淋巴结转移相关基因,从中进一步确定在胃癌发生和转移过程中都有差异表达的基因。方法:采用LMD技术,从17例胃癌患者手术标本中获取高纯度的正常胃黏膜细胞及原发灶和相应淋巴结转移灶中的肿瘤细胞。用基因芯片比较其中2例原发灶与淋巴结转移灶中肿瘤细胞基因表达谱的差异,半定量RT-PCR方法验证芯片结果;并在另15份标本中,进一步确定在胃癌发生和转移过程中都有差异表达的基因。结果:发现49个基因的表达在胃癌原发灶肿瘤细胞中比淋巴结转移灶明显上调,37个基因的表达明显下调,mRNA水平的验证结果与芯片结果相符。同时,筛选出4个在胃癌发生和转移过程中都有差异表达的基因,其中3个基因(OPCML,RNASE1和YES1)的表达规律与肿瘤抑制基因相似,即正常黏膜中表达最高,肿瘤原发灶次之,淋巴结转移灶表达最低;而另一个基因(AKC1)的表达规律则与癌基因相似。结论:采用LMD和基因芯片技术,成功筛选出胃癌进展过程中的差异表达基因,为进一步研究胃癌发生和转移的机制奠定了良好的基础。