牵张应力对Hedgehog通路相关基因和细胞增殖的影响研究

目的:观察牵张力下Hh通路相关基因的表达以及牵张力对成骨细胞增殖的影响,探索机械应力对成骨细胞的调控机制。方法:应用Flexcell 4000TM加力系统对大鼠成骨细胞施加0.5Hz,3%、6%和9%的张应变,作用时间4h、12h和24h。用机械通道抑制剂三氯化钆(GdCl3)对成骨细胞进行干预。采用流式细胞技术测定细胞周期分布与细胞增殖变化,定量PCR检测Hedgehog通路相关基因Ihh、Shh、Ptch和Smo的表达。采用SAS8.0软件包对结果进行统计分析。结果:不同强度、不同作用时间的张应变对Ihh表达量的上调作用亦不相同,6%张应变作用24h的对Ihh表达量上调最为明显,其下游基因Ptch和Smo的表达变化与Ihh类似;上述上调Ihh表达的作用均可被GdCl3抑制。;6%同3%牵张力相比,更能促进成骨细胞的增殖。结论:Ihh基因对力学刺激敏感;Ihh基因表达量的变化与成骨细胞的增殖相关。