大肠埃希菌DNA质控品的研制

研制大肠埃希菌DNA残留量测定所用质控品。抽提大肠埃希菌基因组DNA作为质控品原料,通过紫外分光光度法和电泳进行纯度和含量测定,采用紫外分光光度法和定量PCR法检测其均匀性和稳定性,并评价其加标回收率。经检测,A_(260)/A_(280)均在1.8~2.0之间,电泳图谱条带单一,无RNA和寡核苷酸存在。应用紫外分光光度法和定量PCR法对质控品进行均匀性和稳定性检测,统计结果表明,质控品均匀性良好;在-20℃的保存条件下,半年内未发现不稳定现象;在25℃的保存条件下,7 d内未发现不稳定现象。进行定量PCR法测定,在10^(-2)~10^(3)pg之间线性良好,标准曲线R值为0.997,斜率为-3.65,同时每组加标样品的回收率在70%~130%之间,S_(RSD)≤20%。该批大肠杆菌DNA质控品各项指标均符合要求,可作为质控品用于定量PCR检测大肠埃希菌的DNA残留量,含量定为111.73μg/mL。