电化学生物传感器及其在现代军事医学中的应用

电化学生物传感器将固定化的生物大分子或生物体本身作为敏感元件,利用电化学方法检测和分析电信号,具有专一性强、灵敏度高、响应快、检测范围广等优点,在现代军事医学领域有广阔的应用前景。文章介绍了电化学生物传感器的检测原理,分析了六类电化学生物传感器的结构与特点,探讨了电化学生物传感器在检测生物化学战剂、监测生理特征等方面的优势,并对其未来研究作出展望,提出电化学生物传感器将向微系统化、超微型化、多参数化发展。

极大螺旋藻胞内多糖对体外肿瘤细胞抑制作用的实验研究

研究了极大螺旋藻(Spirulina maxima)胞内多糖对SMMC7721等肿瘤细胞系的生长及凋亡的影响。在体外培养条件下,用半抑制浓度(80,5 mg/L)的极大螺旋藻胞内多糖(IPSⅠ,IPSⅡ)处理肿瘤细胞,并用MTT,SRB,DNA ladder,AnnexinⅤ等方法测定。结果表明,IPSⅠ(80 mg/L)对SMMC7721,A549,HeLa,U251等肿瘤细胞系抑制率分别为64.97%、46.1%、43.3%、27.02%;IPSⅡ(5 mg/L)能诱导SMMC7721细胞凋亡。

硒化紫球藻胞外多糖体外诱导BEL-7402肿瘤细胞凋亡的实验研究

目的研究硒化紫球藻胞外多糖对BEL-7402等肿瘤细胞系的生长及凋亡的影响。方法采用在培养液中添加亚硒酸,制备硒化紫球藻(Porphyridiumsp.)胞外多糖(Se-PSP);在体外培养条件下,用不同浓度的紫球藻胞外多糖(PSP)及硒多糖(Se-PSP)处理肿瘤细胞,并用MTT,DNA ladder,Focus等方法测定。结果与结论Se-PSP(80mg.L-1)对BEL-7402肿瘤细胞系有极为显著的抑制作用,且能诱导BEL-7402细胞凋亡。

抗菌肽对细菌杀伤作用的分子机制

抗菌肽是一类新型的抗菌物质,从最低等的生物病毒、细菌到高等的动植物都有广泛分布.以往的研究主要集中于抗菌肽对细菌细胞膜的作用机制,已经构建了三种作用模式.但近几年的研究表明,很多抗菌肽都能有效地穿过细菌的细胞膜,直接与胞内分子相互作用,并不引起膜的破裂.抗菌肽根据其结构特点有着多种杀菌穿膜的机制,其后分别与胞内的靶分子如核酸,蛋白质,信号转导通路等互相作用,最终实现对细菌的杀伤作用.

溶菌酶C及其生物学功能

在已知6类溶菌酶中,溶菌酶C是唯一存在于脊椎动物、原索动物和无脊椎动物中的类型,也是当前研究最广泛、最透彻的类型。该文从基因数目、基因表达、基因进化和基因功能几个方面详细介绍溶菌酶C的分子生物学研究进展,并认为未来的研究重点已经不是溶菌酶的杀菌作用,而是其消化功能和其他未知的生物学功能。

人可溶性增殖诱导配体在大肠杆菌中的表达、纯化及生物活性鉴定

人增殖诱导配体在促肿瘤细胞增殖以及自身免疫性疾病中具有重要的作用.从GenBank中查出人APRIL的序列号(AF046888),根据其胞外可溶部分序列设计引物,采用RT-PCR技术从健康人新鲜血液单核细胞(PBMCs)总RNA中克隆出人sAPRILcDNA,将该cDNA克隆入原核表达载体pET30a,经IPTG诱导后在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效表达,经SDS-PAGE后在17000左右有一明显的表达条带,该蛋白主要以包涵体形式存在,表达量达45%左右,将包涵体蛋白变复性后进行细胞生物活性实验,为进一步研究其临床应用奠定了基础.

甲基丙烯酸羟乙酯塑料包埋切片技术在小鼠胎脑组织学分析中的应用

目的探索塑料包埋切片法在小鼠胎脑组织学分析中的应用。方法取胚胎期13.5d(E13.5)小鼠,4%多聚甲醛4℃固定过夜,分离胎鼠头部,甲基丙烯酸羟乙酯(HEMA)塑料包埋组织并切片;对切片进行HE染色。结果与石蜡包埋相比,采用HEMA塑料包埋的方法进行胎鼠脑组织学分析,形态结构保存较完整、HE染色效果较清晰。结论利用塑料包埋技术进行小鼠胎脑组织学分析,优于石蜡包埋方法。

基于静电纺丝材料的军事皮肤创口敷料与电化学疗法

着眼军民深度融合推进战创伤智慧诊疗发展,针对技术发展,战争形态变化,应对当下创伤护理方面更高的要求,发展新型创口治疗手段具有重要意义。文章概述了静电纺丝与电化学疗法的相关研究进展,将两者有机结合,阐述其作为创新性疗法在军事皮肤创口治疗上的应用;重点分析了以静电纺丝材料为基础的电化学疗法的创新突破,展望了静电纺丝电化学疗法在现代军事皮肤创口的应用,为创口敷料的创新性研究提供深入的领域见解和分析,从而给予相关技术研究人员借鉴参考。

抗菌肽CM4基因克隆及其在毕赤酵母中的表达鉴定

为了在毕赤酵母中获得抗菌肽CM4表达,将抗菌肽CM4基因克隆入表达质粒pPIC9,SacⅠ线性化的重组表达质粒pPIC9-CM4电击转化P.pastorisGS115(his-),采用MM、MD板和PCR法筛选Mut+表型,甲醇诱导表达;抗菌活性检测、Tricine-SDS-PAGE及酸性活性电泳均表明抗菌肽CM4在毕赤酵母中成功地分泌表达;重组抗菌肽CM4对黑曲霉(Aspergillus niger)、绿色木霉(Trichoderma viride)都有很强的抑菌活性。

翻转小肠囊法研究环孢素A口服纳米脂质体在大鼠小肠的吸收行为

目的 :研究环孢素A(CsA)纳米脂质体在大鼠小肠的吸收行为。方法 :采用旋转薄膜 超声法制备CsA纳米脂质体。采用翻转小肠囊法研究脂质体在大鼠小肠的吸收行为。结果 :CsA纳米脂质体在 0到 9 16mg/ml的范围内有吸收饱和现象 ,脂质体在到达肠壁前在粘液中大量蓄积 ,脂质体与新山地明在小肠培养液和肠壁中的累积吸收量无显著性差异。结论 :CsA纳米脂质体在小肠的吸收有饱和现象 ,粘液层是到达肠壁前脂质体扩散的屏障 ,脂质体与新山地明在小肠的吸收程度生物等效。

刺梨汁和诺丽汁对人卵巢癌细胞株COC_2抑制作用的研究

目的 探讨刺梨汁（RRTJ）、诺丽汁（NoniJ）及刺梨汁联合诺丽汁对卵巢癌细胞株COC，体外生长的抑制作用。方法 RRTJ组、NoniJ组及RRTJ＋NoniJ组分别作用COC2细胞和健康人外周血单个核细胞。应用细胞计数测定细胞生长情况；流式细胞术分析细胞周期变化；Hoechst33258荧光染色观察细胞凋亡情况；并通过测定人单个核细胞上清液乳酸脱氢酶（LDH）活性分析对细胞的毒性作用。结果 RRTJ显著抑制COC2细胞的生长，并表现出剂量依赖性，4-16μl／ml的RRTJ与COC2细胞培养48h后，可将细胞阻滞于G0／G1期（P〈0．05）；经Hoechst 33258染色，细胞核呈现荧光强度高的亮蓝色团块状。NoniJ与RRTJ联用后，上述作用显著增强。人单个核细胞培养上清液中LDH活性无显著增加，提示两种果汁对细胞均无毒性。结论 RRTJ抑制卵巢癌细胞株COC2细胞生长、增殖，并诱导其凋亡，NoniJ和RRTJ协同作用效果更显著。

少棘蜈蚣水提取物的抗菌活性

用含有大肠杆菌Escherichia coli K12D31／poly IC和昆虫生理盐水注射液诱导3～4d的少棘蜈蚣Scolo—pendra subspinipes mutilans水提取物表现出较高的抗菌活性，经测定发现在设定的不同温度、pH值及离子强度条件下表现出良好的抗菌活性；对不同的蛋白酶表现出不同的敏感程度；除了对Proteus mirobilis未表现出抑菌外，对其它9种革兰氏阳性菌和阴性菌、真菌都有抗菌作用，表明有广谱抗菌活性；在600μg/ml以下，没有表现出溶血和凝集活性；电镜观察表明可损伤大肠杆菌的外壁，内容物外泄，菌体死亡。

镉诱发肝细胞毒性和胞内Ca^(2+)变化及硒的保护作用研究

本文通过研究镉诱发鼠肝细胞毒性和胞内游离Ca2+变化及硒的干预效应,探讨镉致肝细胞损伤机制及硒的保护作用。分离培养新生鼠原代肝细胞,随机分为正常对照组、4个5、25、100和250μmol/LCdCl2组、2个10和20μmol/LNa2SeO3组和8个用10和20μmol/LNa2SeO3分别与5、25、100和250μmol/LCdCl2联合作用组。在实验后第12h检测肝细胞存活及其MDA含量和培养液中LDH活性,激光共聚焦显微镜分析肝细胞内游离Ca2+水平([Ca2+]i)。结果显示,镉处理的肝细胞存活随镉浓度增加明显下降,硒处理组与对照组差异不明显;硒提高或明显提高镉染毒肝细胞存活。肝细胞培养上清液LDH活性随镉浓度增加而逐渐升高,且100和250μmol/LCdCl2组显著高于对照组,而硒处理组未见明显变化;给予硒的25、100和250μmol/LCdCl2处理组LDH活性下降或明显下降。不同浓度镉均诱发肝细胞MDA含量显著升高,而硒处理组未见类似表现;10和20μmol/LNa2SeO3抑制或显著地降低25、100和250μmol/LCdCl2诱发的MDA的生成。经镉处理的肝细胞[Ca2+]i荧光强度明显高于对照组,且随镉浓度的增加而上升,而给予硒的肝细胞[Ca2+]i荧光强度未见升高,与对照组相近;加入硒的镉染毒肝细胞[Ca2+]i均比各对应浓度的镉处理组有较大幅度地下降,其中给予硒的25μmol/LCdCl2处理组差异显著,且接近对照组的水平。结果提示,镉诱发肝细胞毒性和损伤以及肝细胞[Ca2+]i升高;硒可能通过干预肝损伤细胞脂质过氧化反应,改善和保护肝细胞[Ca2+]i稳态而减轻镉诱发的细胞毒性和损伤过程。

SLE患者血清氧化LDL水平检测分析

目的检测、分析SLE患者血清氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)水平。方法采用ELISA检测47例SLE患者和42例健康对照者血清ox-LDL,同时对受检者常规血脂水平进行测定。结果SLE患者ox-LDL水平显著高于对照组[(143.40±65.36)mg/L vs(65.77±26.19)mg/L,P<0.01],总胆固醇、三酰甘油、LDL-胆固醇(LDL-C)和载脂蛋白B(apo B)等常规血脂水平也明显升高。以对照组ox-LDL水平的x-+s值为cut off值,SLE组37例高于此值(敏感性78.7%),健康对照组6例异常(特异性85.7%)。多因素分析显示,患者组ox-LDL水平与LDL-C显著正相关。结论SLE患者血清ox-LDL水平升高,检测ox-LDL水平有助于预测SLE患者As的发生风险。

少棘蜈蚣抗菌肽粗品对小鼠巨噬细胞的体外激活作用

分别用62.5、125、250、500和1000μg/ml的少棘蜈蚣抗菌肽粗品,体外诱导对小鼠腹腔巨噬细胞(PMΦ)及肺泡巨噬细胞(AMΦ)48 h,测定巨噬细胞内酸性磷酸酶(ACP)和乳酸脱氢酶(LDH)的活力,并进一步观察巨噬细胞摄取中性红的能力。结果显示,少棘蜈蚣水提取物使正常小鼠PMΦ、AMΦ内ACP、LDH活力显著升高,并能显著增强小鼠PMΦ、AMΦ的吞噬能力,表明少棘蜈蚣水提取物对腹腔及肺泡巨噬细胞具有激活作用。

急性冠状动脉综合征患者血浆氧化脂蛋白(a)水平

目的探讨急性冠状动脉综合征(ACS)患者血浆氧化脂蛋白(a)[ox-Lp(a)]水平的变化及机制。方法分别检测96例ACS、89例非ACS患者和100例健康人血浆ox-Lp(a)水平,冠状动脉造影确认冠状动脉病变程度。结果ACS组和非ACS组ox-Lp(a)水平均高于对照组,且ACS组ox-Lp(a)水平显著高于非ACS组。ACS组ox-Lp(a)/Lp(a)比值高于非ACS组和健康对照组,后两者中该比值无显著差别。ACS患者中ox-Lp(a)水平与冠状动脉病变程度相关(r=0.370,P=0.000),非ACS组中两者不相关(r=0.051,P=0.634)。多因素分析显示,ox-Lp(a)、TG水平及年龄解释ACS患者15.1%的病变程度。结论高ox-Lp(a)水平与ACS的发生、病变程度有关,有益于鉴别ACS。

小鼠卵母细胞第一极体的采集与保存

用孕马血清（PMSG）和人绒毛膜促性腺激素（hCG）对6—8周龄的雌性昆明系及ICR系小鼠进行超数排卯处理，从注射hCG后10h起每间隔2h采集小鼠的卵丘卵母细胞复合体（COCs），对卵母细胞的第一极体（PbI）进行数量和形态分级统计，并用台盼蓝染色法鉴定第一极怵的活力；同时，对新获取的卵丘卵母细胞复合体进行不同温度保存条件试验。结果表明，在注射hCG后12h所获得的第一极体活性最高；在室温和37℃下，第一极体的活力在6h后便完全丧失，而在4℃下保存的第一极体，经过48h后其活力依然良好。

极大螺旋藻胞内多糖分离纯化及其结构的初步分析

本文以原产于非洲乍得湖的极大螺旋藻 (Spirulinamaxima)为材料 ,热水提取胞内粗多糖 ,丙酮、乙醚脱水脱色 ,再经改良的Sevag等方法脱蛋白 ,获得胞内多糖半精品 (Intracellularpolysaccharide ,IPSⅠ ) ,经DE 5 2、SephadexG 10 0层析柱纯化 ,得到两种单一组分的多糖精品 :IPSⅡA和IPSⅡB。利用HPLC、IR等方法测定其初步结构。结果显示 :IPSⅡA的平均分子量为 2 38,0 0 0Dt,主要单糖组成为L 岩藻糖、L 鼠李糖、D 木糖、D 半乳糖 (摩尔比为 6 .0 9∶3.38∶0 .6 6∶0 .0 72 ) ,硫酸根含量为 2 6 .3± 3.7μg/mg ,糖醛酸含量约为 13.37± 0 .4 5 μg/mg ;IPSⅡB的平均分子量为 34,90 0Dt ,主要单糖组成包括D 木糖、L 鼠李糖、D 果糖、D 葡萄糖、L 岩藻糖、D 甘露糖 (摩尔比为 6 .6 6∶4 .6 3∶0 .2 8∶0 .12∶0 .0 87∶0 .0 2 2 ) ,糖苷键构型以α型为主 ,硫酸根含量为2 1.5± 1.2 μg/mg。

肽类抗生素对细胞选择性作用研究进展

抗菌肽是一种广泛存在于生物界的抵抗病原微生物入侵的重要防御分子。抗菌肽具有广谱抗细菌、真菌、肿瘤细胞等活性,具有自身随着物种适应环境而产生的结构多样性以及具有区别于传统抗生素的杀菌机理的独特性,是一类极有潜力的肽类抗生素。不同抗菌肽对不同类型靶细胞表现出活性上的巨大差异,即是抗菌肽作用的选择性,这种作用的选择性受到多种因素的影响。探讨抗菌肽作用细胞的机理,特别是选择性作用的机理将有助于设计出活性更高的新型肽类抗生素。本文主要从细胞表面结构特异性、抗菌肽自身结构特点阐述近年来抗菌肽活性与选择性作用研究的新进展。