不同碳源对两株真菌纤维素酶合成的诱导和调控

定时测定B 6 (Aspergillussp .)、AS3 .3711(Trichodermasp .)在各类碳源中的纤维素酶活力 ,结果发现 ,酶的合成受培养基中碳源性质的调节控制 .结构相对完整的纤维类物质 (α 纤维素粉、微晶纤维素 )诱导活性较高 ,电泳结果表明 ,纤维素酶系是协同表达的 ,但酶系各组分的百分比在不同的诱导条件下却各不相同 .在测定糖耗与酶活力的关系中发现纤维二糖直接诱导B 6纤维素酶的合成 ,对AS3 .3711则起了间接诱导作用 ,其经菌体代谢后的某种转化产物才是AS3 .3711纤维素酶合成的真正诱导源 .图 6表 1参

大鼠慢性镉染毒后精子生成量和精子运动能力研究

目的:了解慢性镉中毒对精子生成量和精子运动能力的影响。方法:SD雄性大鼠60只,分成对照组、镉中剂量组、镉高剂量组,每组20只。采用精子头计数法研究镉染毒对精子生成量的影响;计算机辅助精子分析系统（CASA）观察附睾精子运动速度参数（VCL、VSL和VAP）和运动方式参数（BCF、ALH、LIN和STR）的变化。结果:染毒第3周时,高剂量组精子头计数和每日精子生成量均显著低于对照组（P<0.01）;中剂量组大鼠VCL显著降低,高剂量组BCF和STR也显著下降。染毒第6周时,两个染毒组精子头计数和每日精子生成量均明显低于对照组（P<0.01）;而高剂量组大鼠VSL和LIN显著降低（P<0.05）。第3、第6周其它运动指标变化均不明显。结论:慢性镉染毒对大鼠睾丸精子生产量和附睾尾精子运动能力直接造成毒性作用。

红酵母原生质体制备及其紫外诱变育种的研究

研 究 了 一 株 产 类 胡 萝 卜 素 红 酵 母 ns-1原 生 质 体 的 最 佳 制 备 条 件 ,并 在 此 基 础 上 进 行 诱 变 育 种 。 通 过 实 验 ,初 步 确 定 ns-1菌 株 原 生 质 体 最 佳 形 成 和 再 生 条 件 为 1.5%β- glucuronidase、1.5%lysing enzym e 和 1.5%lyticase 分 别 先 后 处 理 对 数 期 红 酵 母 细 胞 各 3h。通 过 紫 外 线 诱 变 原 生 质 体 , 获 得 类 胡 萝 卜 素 产 量 明 显 提 高 的 突 变 菌 株 U V ss,其 生 物 量 、色 素 含 量 、色 素 产 量 分 别 为 6.15g/L、1043.57μg/g 干 重 、6.41m g/L,生 物 量 、色 素 产 量 分 别 比 原 始 菌 株 提 高 了 67.6%、54.1%。

小麂、赤麂、黑麂mtDNA序列变异性及反映的进化关系

利用已测定的鹿科麂亚科动物小麂、赤麂、黑麂的线粒体全基因组序列 ,统计它们各自连接在一起的 1 3个蛋白编码基因、2 2个tRNA基因、2个rRNA基因和 1个控制区序列的碱基长度和组成 ,计算rRNA基因遗传距离 ,估算分歧时间 ,比较蛋白编码基因的碱基水平和氨基酸水平上的差异 ,基于连接在一起的 1 3个氨基酸序列 ,以羊为外群 ,通过邻位相连法和最大简约性法构建进化树 ,探讨小麂、赤麂、黑麂的进化关系。结果表明 ,小麂是较原始的物种 ,赤麂和黑麂较为近缘 。

胎儿骨髓间质干细胞体外诱导为神经细胞的初步实验研究

目的 :体外定向诱导胎儿骨髓间质干细胞 (MSC)分化为神经细胞。方法 :采用Ficoll淋巴细胞分离液分离MSC ,体外扩增、传代 ,采用 β 巯基乙醇等诱导剂诱导MSC分化为神经细胞 ,免疫组化鉴定神经丝蛋白(NF2 0 0 )、神经元烯醇化酶 (NSE)、胶质纤维酸性蛋白 (GFAP) ,并且用RT PCR鉴定NF2 0 0、NSE和GFAP的mR NA表达情况。结果 :胎儿骨髓MSC在体外扩增第 5代以后 ,经诱导后 ,形态学上可呈现神经细胞形态特征 ;免疫组化显示诱导出的神经细胞NF2 0 0、NSE和GFAP均有阳性表达 ;RT PCR也显示诱导后表达量明显增加。结论 :胎儿骨髓MSC在体外可以分化为神经细胞。

中药添加剂对中华绒螯蟹扣蟹非特异性免疫力影响的研究

根据有机水产养殖的标准要求 ,在河蟹扣蟹饲料中添加经筛选的中药添加剂 ,以扣蟹组织中溶菌酶 (Lysozyme,UL)活力和超氧化物歧化酶 (Superoxidedismutase,SOD)活性作为扣蟹非特异性免疫力的量化指标。研究表明 ,筛选出的中药添加剂对扣蟹的UL活力和SOD活性有明显的增强作用 ,饲料中添加1%的中药添加剂效果最好 ,作用 30天后的UL活力和SOD活性增幅最大 ,6 0天后SOD活性达到最大 ,UL活力趋于平稳。同时还证明了自制的有机饲料较常规饲料更能促进扣蟹非特异性免疫力的提高。

染色体显微切割与DOP-PCR结合对赤麂Sry基因克隆、测序及初步定位

应用显微切割技术获得赤麂１号、Ｙ１、Ｙ２染色体，通过ＤＯＰ－ＰＣＲ增加模板ＤＮＡ拷贝数，然后用人的性别决定基因（Ｓｅｘ－ｄｅｔｅｒｍｉｎｉｎｇ Ｒｅｇｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅ Ｙ， ＳＲＹ）中ＨＭＧ框内设计１对引物，对ＤＯＰ－ＰＣＲ产物进行扩增。在雄性赤麂Ｙ２染色体ＤＯＰ－ＰＣＲ产物中扩增出与人ＳＲＹ基因同源的Ｓｒｙ基因片段，克隆、测序，首次在分子水平上证明赤麂Ｙ２染色体是真正的Ｙ染色体，同时对赤麂Ｓｒｙ基因进行了初步定位。

西红花酸对心肌细胞氧化应激性损伤的作用

目的 :探讨西红花酸对心肌细胞氧化应激性损伤的效应。方法 :采用过氧化氢 (H2 O2 )诱导法制备大鼠培养心肌细胞氧化应激损伤模型 ,通过观察培养心肌细胞的形态 ,检测细胞培养液中乳酸脱氢酶 (LDH)活性、细胞内丙二醛 (MDA)含量和超氧化物歧化酶 (SOD)活性及培养细胞台盼蓝摄取率 ,反映西红花酸对该模型的影响。结果 :在本实验使用浓度范围内 ,H2 O2 损伤培养心肌细胞的作用呈浓度依赖性地增大 ;西红花酸则能减少该氧化应激细胞的形态学改变、降低培养液中LDH活性和胞内MDA含量、增加胞内SOD活性及减少细胞死亡数量。结论 :西红花酸对H2 O2 造成的培养心肌细胞氧化应激性损伤具有明显的保护作用。

九种精油的抗菌活性及其防腐特性研究

文章比较了九种精油的抑菌活性,并对其在牛奶和圣女果的防腐性进行了初步研究,实验表明:牛至、大蒜、山苍子和桉叶油对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和大肠杆菌有较强的抑杀作用,大蒜精油对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的MIC为0.125%,大蒜和花椒精油还具有很好的防腐作用,可抑制牛奶和圣女果的腐败变质。

扬子鳄外周血细胞的超微结构

对扬子鳄血细胞亚显微结构进行透射电镜观察。结果表明 ;在外周血细胞中可区分出红细胞、嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞以及血栓细胞。电镜图像显示 :与其它爬行动物相比 ,各类血细胞体积较小并具有不同程度的变形运动及吞噬能力。红细胞的特征是长梭形 ,其长短径之比值超过 3 .0。在外周血液中发现了多种未成熟型血细胞 ;进入外周血液中的红细胞普遍已分化到一定程度 ,但有的仍须在外周血液中完成其最后的发育 ;单核细胞在外周血液中经历了从幼单核细胞到成熟单核细胞的过程 ,并描述了从未成熟到成熟阶段细胞的超微结构的变化 ;嗜中性粒细胞在外周血液中经历了从早幼粒细胞、中幼粒细胞 ,晚幼粒细胞到成熟粒细胞的过程 ,描述了嗜中性粒细胞各个发育阶段细胞的超微结构及特征 ,并讨论了嗜天青粒细胞和嗜中性粒细胞的关系。

中国家蚕抗菌肽人工合成类CMⅣ基因在甜菜夜蛾虫体中的表达

将人工合成的中国家蚕抗菌肽类CMⅣ基因与抗菌肽信号肽基因连接 ,经EcoRⅠ、HindⅢ双酶切后 ,克隆于pFASTBacⅠ的EcoRⅠ、HindⅢ酶切位点之间 ,得到重组转座载体pFASTBac ABP ,经测序证明阳性克隆正确。将重组转座载体转化HD1 0Bac大肠杆菌 ,得到重组Bacmid ABP。将重组Bacmid转染sf2 1细胞及感染甜菜夜蛾 (Laphygmaexigua)幼虫 ,在培养细胞上清及虫体血淋巴中均测到抗菌活性。经Northernblotting证明感染甜菜夜蛾幼虫中有类CMⅣmRNA的存在。且表达产物在酸性电泳中电泳行为与天然抗菌肽CMⅣ组分相似。为进一步利用昆虫细胞及虫体生产抗菌肽药物打下了基础。

脐血造血干/祖细胞体外扩增及移植动物模型分析

目的 探讨脐血造血干 /祖细胞体外扩增和体内重建造血的潜能。方法 利用造血干 /祖细胞培养、体外扩增、移植动物模型等技术 ,研究不同比密ficoll分离液分离的脐血造血干 /祖细胞的造血活性。结果 比密 1.0 6 4 g/ml分离液分离的 10 5个脐血MNC中 ,CFU GM集落数为 373± 2 89,BFU E为 12 1± 70。在G3(GM CSF和IL 3融合蛋白 )、IL 6、TPO(thrombopoietin)作用下 ,1.0 6 4 g/ml分离液分离的脐血造血干 /祖细胞在体外扩增 14d ,CFU GM扩增 5 2 .2倍。给经 8.5Gy致死剂量照射的小鼠输注 1.0 6 4 g/ml分离液分离的脐血造血干 /祖细胞 ,体内产生的脾结节 (CFU S)是输注 1.0 77g/ml分离液分离细胞的 2 .2倍。结论 比密 1.0 6 4 g/ml分离液分离的脐血造血干 /祖细胞 ,在体外具有较高的增殖。

血清蛋白质组学研究中乙腈沉淀法去除清蛋白的实验研究

目的建立去除人血清清蛋白的乙腈沉淀法并研究其去除效果。方法血清经除脂后按血清:水:乙腈=1:2:4.5(v/v/v)比例沉淀分离高丰度清蛋白,用SDS-PAGE验证去除效果和重复性。分别对4名体检健康者和非小细胞肺癌患者去除清蛋白前后的血清凝胶电泳图像进行分析。结果经本法去除后血清清蛋白平均浓度由(50.65±2.82)g/L下降为(2.50±0.71)g/L,占血清总蛋白比例由65.1%下降为33.3%,呈显著降低,差异有统计学意义(P<0.001)。与等量上样原血清电泳结果相比,相对分子量(Mr)在50000～80000间的蛋白质被明显去除,而被其掩盖的低丰度蛋白质得以显现,蛋白质条带明显变窄。结论乙腈沉淀法提供了一种经济、简便,且重复性较好的人血清清蛋白去除方法,为血清蛋白质组学研究提供了技术支持。

骨髓间质干细胞绿色荧光蛋白基因的转染和克隆化研究

目的 建立能稳定表达绿色荧光蛋白 (GFP)并连续传代培养的骨髓间质干细胞 (MSCs)株。方法 采用电穿孔法将带有GFP的质粒 (pGFP N1)在不同条件下转染MSCs,经过G4 18筛选 ,有限稀释法筛选阳性克隆 ,荧光显微镜及流式细胞仪检测GFP的表达情况。结果 电穿孔以电容量 10 5 0 μF、电压 2 6 0V时效果最好 ,转染GFP的MSCs能在含有G4 18的培养基中生长 ,未转染的骨髓间质干细胞不断死亡。转染 2 4h后即能观察到少量荧光细胞 ,一个月后大部分荧光细胞呈集落样生长 ,荧光表达较强 ,转染率为 5 0 %～ 6 0 %。体外克隆后 ,能稳定表达至 10代 ,10代后荧光强度明显减弱。结论 GFP基因能在MSCs中进行有效的复制、转录和翻译 ,并可持续、稳定、高效表达 ;

猪链球菌2型烯醇化酶的分子克隆与免疫学特性

对新近测定的猪链球菌2型(S.Suis 2)05ZYH33全基因序列进行生物信息学分析,并与相关家族蛋白进行同源性比较,设计合成引物,PCR法扩增出约1.3 kb的烯醇化酶编码基因(enolase, eno),将其克隆入pMD-18T载体中,进一步亚克隆入表达载体pET32a。将重组表达质粒pET32a::eno转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE初步检测到分子量约为75kD的蛋白带。通过His-Tag亲和层析纯化,获得融合蛋白His-ENO。Western-blot表明该表达产物具有免疫原性。基于ELISA进行的细胞定位实验证实了Enolase可以部分存在S.suis 2 05ZYH33细菌的表面。这提示了Enolase作为一种新发现的抗原对于引发猪链球菌相关疾病可能发挥着重要的作用。

外源ASA对菹草(Potamogeton crispus)抗Cd^(2+)毒害的实验分析

实验以高等水生沉水植物菹草为材料,研究在不同浓度Cd2+毒害条件下外施乙酰水杨酸(ASA)对菹草叶中叶绿素含量、可容性蛋白含量、O2+产生速率、保护酶--超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性的影响.结果表明,施用ASA可以显著提高叶绿素和可溶性蛋白的含量,增强保护酶的活性,降低O2+产生速率,从而减轻了重金属Cd2+胁迫对植物体造成的伤害.

六味地黄方药物血清对血管内皮细胞胞内Ca^(2+)的影响

目的 :探讨六味地黄方药物血清保护血管内皮细胞的分子机制。方法 :取人脐静脉内皮细胞 (HUVEC) ,用脂多糖(LPS)造成凋亡细胞模型 ,通过激光共聚焦显微镜观察六味地黄方药物血清对胞内Ca2 + 的影响。结果 :六味地黄方药物血清可明显缓解其所致的钙超载。结论 :六味地黄方药物血清有抗HUVEC凋亡作用 ,其防治血栓性疾病的机理可能与其缓解细胞钙超载有关。

吉林延边智新盆地大拉子组孢粉组合

本文对产自吉林延边地区智新盆地大拉子组上段的孢子花粉进行了系统研究 ,共计 36属 91种 ,另有疑源类化石 1属 2种 ,组成以 Classopollis- Cicatricosisporites为代表的孢粉组合。根据组合内一些重要分子的地质时限讨论和与相关组合的对比 ,其时代应归为早白垩世晚期。根据疑源类和主要孢粉属种可能的母体植物生长环境 ,推测在早白垩世晚期吉林延边地区智新镇是一个宁静的湖泊 ,气候温暖、干燥。

星形细胞瘤患者癌组织和血清miR-497表达下降及其临床意义

目的检测星形细胞瘤患者癌组织和血清中miR-497的表达水平及治疗前后血清miR-497的变化,探讨其作为分子标志物的可能性。方法采集8例星形细胞瘤患者癌组织、4例癌旁组织、3例正常脑组织以及133例治疗前患者的(WHOⅡ级55例、Ⅲ级45例和IV级33例)血清样本,用实时荧光定量RT-PCR法检测miR-497含量,并以80例年龄、性别匹配的健康人作对照。对其中14例患者进行术前、术后血清miR-497含量的比较,ROC曲线分析miR-497对星形细胞瘤的诊断价值。结果miR-497在癌组织中的表达量明显低于癌旁组织和正常脑组织(F=13.78,P<0.05),在患者血清中的浓度也显著降低[(112.69±54.58)fmol/L vs(254.32±142.12)fmol/L,t=10.31,P<0.01]。用于星形细胞瘤诊断的miR-497 ROC曲线下面积(AUCROC)为0.894(95%CI,0.853～0.935),敏感性为82%,特异性为90%。血清miR-497在患者术后明显上升[术后(165.69±56.87)fmol/L vs术前(93.77±38.50)fmol/L,t=3.92,P<0.01]。结论星形细胞瘤患者癌组织和血清miR-497低表达,miR-497有望作为该病诊断及预后评价的检测指标。

振萎膏药物血清对钙超载骨骼肌细胞的影响

目的 :探讨治疗肌营养不良症的振萎膏药物血清对钙超载骨骼肌细胞的动态影响。方法 :取新生乳大鼠骨骼肌细胞 ,用 1mmol/L地塞米松造成骨骼肌细胞的钙超载模型 ,运用激光共聚焦显微镜观察振萎膏药物血清对其钙离子及形态的改变。结果 :振萎膏药物血清可缓解超生理剂量地塞米松引起的钙超载与细胞损伤。结论 :振萎膏治疗肌营养不良症的机理与其能降低钙离子浓度。