南京地区肺炎链球菌的耐药变迁及喹诺酮耐药机制研究

目的了解南京地区肺炎链球菌临床分离株的耐药性变迁及对喹诺酮类的耐药机制。方法收集2010—2012年南京7所教学医院共147株肺炎链球菌,琼脂稀释法测定9种抗菌药物的MIC,与南京2006—2007年分离的肺炎链球菌耐药情况进行比较。并对氟喹诺酮耐药株的gyrA、gyrB、parE和parC基因喹喏酮耐药决定区域(QRDR)进行PCR扩增及测序。结果 147株肺炎链球菌中,对红霉素的耐药率为89.1%;青霉素不敏感肺炎链球菌(MIC≥4 mg/L)占3.4%;对头孢呋辛、头孢曲松、美罗培南、左氧氟沙星、莫西沙星的耐药率分别为26.5%、1.4%、3.4%、1.4%、0.7%;所有分离株对万古霉素、利奈唑胺敏感。与2006—2007年分离株相比,2010—2012年临床分离株对青霉素、头孢呋辛耐药率下降,对红霉素、头孢曲松耐药率变化不大,出现了少数左氧氟沙星及莫西沙星耐药株。对喹诺酮耐药株进行基因测序发现1菌株有gyrA突变(Asn167—Ile)和ParE突变(Ile 460—Val);另1菌株则有ParC突变(Ser 81—Gly;Asn 94—Asp)。结论南京地区肺炎链球菌对红霉素耐药率居高不下,对青霉素仍较敏感,出现了少数莫西沙星、左氧氟沙星耐药株。喹诺酮耐药株有gyrA、parE和parC的QRDR突变。

南京地区肺炎链球菌耐药情况分析

目的了解南京地区肺炎链球菌对常用抗菌药物的耐药性。方法琼脂稀释法测定14种抗菌药物对130株肺炎链球菌MIC。结果130株肺炎链球菌中,耐青霉素肺炎链球菌(PRSP,MIC≥2mg/L)占51.5%;对阿莫西林、头孢呋辛、头孢噻肟和头孢曲松的耐药率依次为6.2%、69.2%、17.7%和3.1%;对红霉素、阿奇霉素、克林霉素和四环素耐药率分别为92.3%、90.8%、89.2%和93.8%;对万古霉素、左氧氟沙星、莫西沙星、替加环素和利奈唑胺均敏感。结论南京地区肺炎链球菌对青霉素、红霉素、阿奇霉素、克林霉素、四环素和头孢呋辛等抗生素耐药性高,应注意合理选择用药。

南京部队1560例中老年干部生化结果的规律

目的调查南京军区中老年干部生化指标随年龄增加变化的规律及异常检出率。方法研究对象为南京军区中老年干部,共计1 556例（男1 417例,女139例）,全自动生化仪检测生化指标。结果球蛋白（Glo）、葡萄糖（Glu）水平随年龄增长而增高;总蛋白（TP）、白蛋白（Alb）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平随年龄增长而减低。每10年血Glu增高0.14 mmol/L,其中从49-69岁,每10年血Glu增高0.34 mmol/L;男性尿素（Urea）、肌酐（Cr）随年龄增长而增高,Urea每10年上升0.244 mmol/L,Cr每10年上升2.78μmol/L,总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）随年龄增长而减低;女性50岁以后TC、TG、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、非高密度脂蛋白胆固醇（Non-HDL-C）水平明显升高。Cr异常增高率最低,另有3.4%的人为低血糖。本人群所有指标均呈偏态分布,除Cr外所有指标的95%百分区间均大于目前国内参考范围。结论由于不同人群生化参考值存在年龄和地区性等差异,因此在临床应用时,实验室针对不同年龄和地区人群设立不同参考值更为适用。

2006～2007年南京地区肺炎链球菌耐药情况分析

目的 了解南京地区肺炎链球菌对常用抗菌药物的耐药性.方法 琼脂稀释法测定130株肺炎链球菌对14种抗菌药物最低抑菌浓度.结果 130株肺炎链球菌中,耐青霉素肺炎链球菌的检出率为51.5%;头孢呋辛、头孢噻肟、阿莫西林、头孢曲松的耐药率依次为69.2%、17.7%、6.2%和3.1%;四环素、红霉素、阿奇霉素和克林霉素耐药率分别为93.8%、92.3%、90.8%和89.2%;万古霉素、新喹诺酮类左氧氟沙星和莫西沙星、替加环素、利奈唑胺均敏感.结论 南京地区肺炎链球菌对青霉素、红霉素、阿奇霉素、克林霉素、四环素、头孢呋辛等抗生素耐药性高,应注意合理选择用药.

产ESBLs肠杆菌科细菌的检测及耐药性分析

目的 了解产超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)的肠杆菌科细菌的耐药性、耐药特点 ,指导临床用药。 方法 应用双纸片法检测 4 64株肠杆菌科细菌ESBLs,并用K B纸片扩散法测定其对 14种抗生素的耐药性。结果 阴沟肠杆菌、粘质沙雷菌、弗劳地枸橼酸杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌 5种肠杆菌产ESBLs的检出率分别为 4 0 .3 %、2 9.6%、2 8.6%、2 6.4 %、2 1.2 % ;5种产ESBLs的肠杆菌对氨苄西林、哌拉西林、头孢唑啉、头孢呋辛的耐药率为10 0 % ;对头孢三嗪、头孢噻肟、头孢哌酮、头孢他啶表现为敏感者占 7%～ 2 6% ;产ESBLs株与不产酶株对三代头孢的耐药率有显著差异 (P <0 .0 1) ;未见产酶株对泰能耐药。结论 检出ESBLs细菌可指导临床用药 ,对ESBLs细菌的治疗需要β 内酰胺类抗生素加酶抑制的复合制剂 。

冠心病患者血清脂蛋白相关磷脂酶A2与氧化低密度脂蛋白水平

目的分析冠心病(CAD)患者血清脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)水平。方法分别检测100例急性冠脉综合征(ACS)、75例稳定性心绞痛(SAP)患者和50例健康人对照者的血清Lp-PLA2、ox-LDL水平及CAD病变程度,分析其相关关系。结果与健康人对照组相比,CAD患者血清Lp-PLA2、ox-LDL水平均显著升高(P<0.01);与SAP组相比,ACS组血清Lp-PLA2、ox-LDL、肌钙蛋白I(TnI)水平及Gensini积分均显著升高(P<0.01)。相关性分析显示,CAD患者Gensini积分分别与血清Lp-PLA2(r=0.426,P<0.01)、ox-LDL(r=0.331,P<0.01)水平呈正相关,Lp-PLA2与ox-LDL之间亦显著正相关(r=0.238,P<0.01)。多元回归分析显示,CAD患者血清Lp-PLA2(β=0.366,P<0.01)和ox-LDL(β=0.253,P<0.01)水平共同决定了22.7%的Gensini积分变化;Gensini积分是血清Lp-PLA2的唯一显著的独立预测因子(β=0.420,P<0.01);LDL胆固醇(LDL-C)(β=0.411,P<0.01)、Gensini积分(β=0.285,P<0.01)共同决定了25.9%的ox-LDL变化。结论 CAD患者血清Lp-PLA2、ox-LDL水平升高,且与动脉粥样硬化(As)病变程度密切相关。

2型糖尿病患者血清β_2-GPI/ox-LDL复合物水平

目的检测分析2型糖尿病(T2DM)患者血清β2-糖蛋白I/氧化低密度脂蛋白(β2-GPI/ox-LDL)复合物水平。方法以抗人β2-GPI抗体为包被抗体、酶标记抗apoB为检测抗体的血清β2-GPI/ox-LDLELISA检测法,对42例T2DM患者和41例年龄、性别匹配的健康对照者检测分析。用ELISA方法检测血清ox-LDL水平,同时对受检者进行常规血脂水平测定。结果 T2DM组β2-GPI/ox-LDL水平显著高于对照组[(0.89±0.15)U/mlvs(0.81±0.09)U/ml,P<0.05],ox-LDL浓度也明显升高[(48.10±60.40)mg/Lvs(27.06±12.25)mg/L,P<0.05]。相关分析显示,β2-GPI/ox-LDL水平与总胆固醇(TC)、LDL-胆固醇(LDL-C)以及ox-LDL呈显著正相关。结论 T2DM患者血清β2-GPI/ox-LDL复合物水平增高,患者高浓度的血清LDL-C、ox-LDL和机体的高氧化应激状态是β2-GPI/ox-LDL升高的主要原因。

自动分析仪在脑脊液和胸腹水细胞计数中的应用研究

目的分析比较UF-1000i全自动尿沉渣分析仪和XE-2100全自动血液分析仪在脑脊液和胸腹水细胞计数中的应用。方法随机取自住院和门诊患者送检脑脊液和胸腹水标本共143例,同时采用UF-1000i尿沉渣分析仪和XE-2100血液分析仪检测红细胞和白细胞数,以手工镜检法为标准进行比较,并作统计学分析。结果 UF-1000i尿沉渣分析仪对标本红细胞和白细胞数检测结果与镜检法相比显著相关(r2分别为0.993和0.989,P<0.01),差异无统计学意义(P>0.05)。XE-2100血液分析仪对标本白细胞数检测结果与镜检法相比显著相关(r2=0.969,P<0.01),差异无统计学意义(P>0.05)。结论使用UF-1000i尿沉渣分析仪检测脑脊液和胸腹水中红、白细胞数均具有可行性;XE-2100血液分析仪可用于检测脑脊液和胸腹水标本白细胞数,但不适宜检测红细胞数。

多发性骨髓瘤患者M蛋白水平的回顾性分析

目的回顾分析113例多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者的血清免疫固定电泳(IFE)及血清免疫球蛋白(Ig)的M蛋白的测定结果,探讨M蛋白在MM诊断中的应用。方法对113例确诊为MM的患者同时做免疫固定电泳(IFE)、血清蛋白质电泳和Ig定量测定,并对结果进行分析比较。结果 113例MM患者年龄≥50岁者居多(95人),50岁以下较少(18人),男性略多于女性(66∶47);IgG类MM所占比例最高(51.3%),IgM类MM最低(4.4%);无论是Kappa型还是Lambda型M蛋白,κ/λ比值均显著异常。各指标检出M蛋白的阳性率κ/λ最高(73.5%),血清Ig定量最低(47.8%)。结论 M蛋白分类和分型对临床MM的诊断和治疗可提供重要依据。

ELISA法检测IgA肾病患者血清β_2-GPI/LDL复合物

目的建立人血清β2-糖蛋白Ⅰ/低密度脂蛋白(β2-GPI/LDL)复合物ELISA检测法,探讨其对IgA肾病的诊断价值。方法建立以抗人β2-GPI抗体为包被抗体、酶标记抗apoB为检测抗体的β2-GPI/LDL ELISA检测法,对50例IgA肾病患者和50例健康对照者检测分析。结果建立的β2-GPI/LDL ELISA检测法灵敏度0.25 U/m l,批内、批间变异系数为5.73%和10.67%,参考范围(0.66±0.17)U/m l。IgA肾病组β2-GPI/LDL水平显著高于对照组[(1.27±0.23)U/m l vs(0.66±0.17)U/m l,P<0.0001]。敏感性86%,特异性为100%。结论β2-GPI/LDL以健康对照组x-+2s即1.0 U/m l为cut off值,对IgA肾病有较高的敏感性与特异性,提示其有潜在的临床诊断价值。

头孢哌酮-舒巴坦治疗下呼吸道感染73例

目的：观察头孢哌酮-舒巴坦治疗下呼吸道感染的临床疗效及细菌对该药的耐药性。方法：下呼吸道感染住院病人７３例［男性５３例，女性２０例，年龄（５７ ± ｓ １４） ａ］，应用头孢派酮一舒巴坦 ２． ０ ｇ，加入 ０． ９％氯化钠注射液 １００ ｍｌ。中静脉滴注， ｂｉｄ，疗程（１０ ± ３） ｄ；并对我院临床分离的 ７３８株致病菌进行药敏试验。结果：应用头孢哌酮－舒巴坦治疗的有效率为 ９２％，细菌清除率为 ８４％。头孢哌酮－舒巴坦对临床分离的革兰阴性杆菌的敏感性为 ９４％，对革兰阳性球菌的敏感性为 ８６％。结论：头孢哌酮－舒巴坦治疗下呼吸道感染的临床疗效好，细菌耐药性低，是一种抗菌谱广、杀菌作用强的耐酶抗生素。

自制肝素亲和柱分离纯化载脂蛋白H及其抗体制备与鉴定

目的:自制肝素-琼脂糖6B亲和柱提纯人血清载脂蛋白H(apoH),免疫制备多克隆抗体,为大量制备与进一步研究做准备。方法:利用间接还原胺化法制备亲和层析柱,并优化反应条件。运用高氯酸沉淀、离子交换及亲和层析从人血清中纯化抗原,制备兔源多克隆抗体。结果:自制亲和柱肝素结合量约5mg/g(介质体积)。纯化的抗原经SDS-PAGE鉴定分子量约50kD,无杂带;16种氨基酸组成分析结果与报道一致。多克隆抗体与购置的国外抗体一样,在进行ELISA与dot-ELISA时与小牛血清白蛋白有交叉反应;但在变性且还原的条件下,Western blot结果显示无交叉反应。结论:自制亲和柱成本低、亲和性好、肝素结合稳定,用之分离纯化得到了高纯度apoH;兔多克隆抗体用于检测血清中载脂蛋白H含量时需进一步纯化。

比色法测定尿中草酸

在常规临床实验室作尿草酸测定仍然有不少困难。本文报道一种测定尿草酸的比色法。草酸被锌还原成羟基乙酸，后者与变色酸反应显色，最大吸收波长５７０ｎｍ，草酸浓度在０～１０００μｇ／Ｌ（终浓度）范围内与吸光度成线性，批内ＣＶ１０．３％，批间ＣＶ１７．３％，平均回收率９４％，尿葡萄糖３ｇ／Ｌ抗坏血酸１００ｍｇ／Ｌ无干扰，正常参考值０．２９～０．５２ｍｍｏｌ／２４ｈ尿，这些实验结果与国外文献报道一致。本法不需特殊设备，适合于一般常规临床实验室使用。

胰岛素不同配置时间和方法对其有效浓度的影响

目的 :研究危重病人营养支持期间胰岛素注射剂配置的最佳时间和方法。 方法 :将临床常用的胰岛素注射剂配置方法分为两组 :①TPN组 :胰岛素直接加入完全胃肠外营养 (TPN)液中 ,连续输注 2 0～ 2 4h ;②对照组 :胰岛素加入等渗盐水 (NS)中 ,用 5 0ml注射器经微量泵持续静脉输注 ,并观察两种方法胰岛素浓度的改变 ,将 10U胰岛素分别加入TPN 10ml和NS 10ml中 ,每组 10例。在配置后 0、4、8、12、2 0和 2 4h的六个时相点 ,采用化学发光法分别测定TPN和NS中的胰岛素有效浓度。 结果 :对照组胰岛素配置后 0h的浓度为 (5 1.11± 11.6 3)mU/L ,12h时下降为 (2 8.5 7± 5 .39)mU/L ,到 2 4h已下降为 (2 0 .88± 4 .18)mU/L ,是配置当时的 4 0 .85 % ,与 0h比明显下降 (P <0 .0 5 ) ;TPN组胰岛素配置后 0h的浓度为 (6 9.6 3± 8.5 6 )mU/L ,12h时下降为 (38.72± 4 .99)mU/L ,到 2 4h已下降为(2 4 .73± 3.19)mU/L ,是配置当时的 35 .5 2 % ,与 0h比明显下降 (P <0 .0 5 )。 结论 :胰岛素配置后有效浓度随时间的延长而下降。将胰岛素直接加入TPN中输注 ,方法简便 。

检测血清β_2-GPI/ox-LDL复合物对系统性红斑狼疮的临床诊断价值

目的:低密度脂蛋白(LDL)的氧化修饰在自身免疫疾病早发动脉粥样硬化过程中起重要作用。国外研究发现,在循环血和动脉斑块中氧化LDL(ox-LDL)能与抗心磷脂抗体的主要自身抗体β2-糖蛋白I(β2-GPI)结合成稳定的复合物。文中通过检测中国SLE患者血清β2-GPI/ox-LDL复合物水平,进一步探讨该复合物的临床诊断价值。方法:用ELISA法对47例系统性红斑狼疮(SLE)患者(SLE组)和42例健康对照者(对照组)检测比较。结果:SLE患者β2-GPI/ox-LDL水平显著高于对照组[(1.05±0.14)U/mlvs(0.79±0.11)U/ml,P<0.0001]。若以1 U/ml为临界值,SLE组中28例高于临界值(敏感性59.6%),对照组中仅4例异常(特异性90.5%)。2组β2-GPI/ox-LDL水平均与apoB和LDL呈显著正相关。结论:β2-GPI/ox-LDL对SLE有较高的敏感性与特异性,提示其潜在的临床诊断价值。

抗人甘露聚糖结合凝集素单抗的制备、鉴定及应用

目的 制备抗人甘露聚糖结合凝集素单克隆抗体及建立应用方法。方法 用亲和层析法自人血清中提取甘露聚糖结合凝集素 (MBL) ,免疫Balb/c小鼠 ,通过细胞融合的方法 ,得到 3株稳定分泌抗人MBL单克隆抗体 (mAb)的杂交瘤细胞株。建立检测MBL的ELISA。结果 本组mAb识别相对分子质量 (Mr)为 310 0 0的MBL分子 ,与MBL作用后可明显抑制MBL 甘露聚糖复合物的抗补体效应。用ELISA检测 186例健康人血清中MBL水平为 2 6 9± 1 5 8mg/L。结论 成功地获得了抗MBL的mAb并用于建立ELISA。