融水小型猪的实验动物化系列研究概述

融水小型猪的种源来自广西融水县,2012年被引到广东繁育并测定了基础数据,包括种质特性、繁殖性能、生长曲线、血液学指标、血生化指标、脏器系数、染色体分析。参照国家和地方有关实验动物标准,初步建立了融水小型猪微生物与寄生虫、环境与设施、饲料、病理学、遗传学等质量控制标准。融水小型猪能适应当地气候,繁殖良好,自然受孕率为88.3%,妊娠期平均112 d,初产平均胎产仔6.1头,经产平均产仔7.9头。融水小型猪体型小,雌雄成年体重(6月龄)分别为17.21±5.20 kg和16.35±5.23 kg,性情温顺,线粒体DNA分析表明融水小型猪比兰屿猪更为古老。通过标准化的饲养管理与质量控制,具有培育成实验用小型猪的基本条件。

人胚神经干细胞移植治疗大鼠脑缺血的实验研究

目的研究人胚神经干细胞(hNSCs)移植治疗脑缺血大鼠的效果及其在缺血大鼠脑内的状况.方法从自然流产的孕10～13周的人胚脑组织中分离、培养神经干细胞.采用线栓法制作大鼠脑缺血模型,1 d后经尾静脉移植未分化的hNSCs入脑缺血大鼠体内,对移植后大鼠进行神经损害严重程度评分(NSS),用免疫组化方法观察移植后hNSCs的存活、迁徙、分化状况.结果从人胎脑中成功培养出hNSCs,培养条件下呈悬浮状态生长,形成神经球,绝大多数的细胞表达神经干细胞的标记物神经巢蛋白(nestin).hNSCs移植组大鼠自移植后3周末起其NSS显著低于对照组(P＜0.05);移植后2、3、4、5周脑组织切片中均可见5-溴脱氧嘧啶尿苷(Brdu)染色阳性细胞,缺血侧明显多于对侧(P＜0.05),移植后3、4、5周末明显多于移植后2周(均P＜0.05);移植组各时间点脑组织切片中均可见nestin染色阳性细胞;在Brdu阳性细胞群中,73.8%为胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色阳性的星形胶质细胞,16.7%为2,3-环核苷酸磷酸二脂酶(CNPase)染色阳性的少突胶质细胞,9.5%为神经元特异性烯醇化酶(NSE)染色阳性的神经元.结论经静脉移植hNSCs能有效改善脑梗死动物的神经功能,hNSCs体内体外均具有多向分化潜能,受缺血部位微环境信号的影响分化成3种主要类型的神经细胞.

淫羊藿黄酮类化合物对骨及软骨细胞作用研究进展

淫羊藿是一种补肾壮骨中药,广泛应用于骨科临床,其中主要有效成分为黄酮类化合物,包括淫羊藿总黄酮、淫羊藿苷和淫羊藿次苷等,具有促进成骨细胞分化、抑制破骨细胞分化与生成、促进软骨细胞生成等作用。故对近年来淫羊藿黄酮类化合物对骨及软骨细胞作用的实验研究作一综述,为其应用于临床提供理论依据。

Lipofectamine ^(TM)2000介导pIRES2-EGFP-NT3转染新生小鼠离体耳蜗基底膜的实验研究

目的构建真核表达质粒载体pIRES2-EGFP-NT3,检测其在阳离子脂质体介导下对新生小鼠离体耳蜗基底膜的转染情况。方法构建含有目的基因NT3的真核表达质粒载体pIRES2-EGFP-NT3后,在阳离子脂质体LipofectamineTM2000介导下将其转染新生小鼠离体耳蜗基底膜培养组织,转染后24 h,通过Confocal显微镜观察小鼠离体耳蜗基底膜的转染情况和转染效率。结果成功构建了真核表达质粒载体pIRES2-EGFP-NT3,通过阳离子脂质体LipofectamineTM2000介导,该质粒在新生小鼠离体耳蜗基底膜转染的范围内转染进17个细胞,说明该质粒在阳离子脂质体介导下能转染新生小鼠离体耳蜗基底膜培养组织。结论含有目的基因NT3的真核表达质粒载体pIRES2-EGFP-NT3的成功构建,及其在阳离子脂质体介导下对新生小鼠离体耳蜗基底膜培养组织的有效转染,为研究NT3基因转染对正常及致聋小鼠耳蜗效应的实验奠定了基础。

CYP72B1基因和AUR3基因响应光、生长素和油菜素内酯的转录调控机制研究

为研究光、生长素和油菜素内酯在基因层次上的互作机制,开发了转录调控元件识别工具OCMMat,其中,在对共表达基因信息和直系同源基因信息进行整合时,利用了转录调控元件在直系同源基因启动子中的富集性.利用该方法发现,CYP72B1基因和AUR3基因启动子含有3个相同的调控模序GAGACA、AAGAAAAA、ATCATG,它们分别承担了AuxRE元件、GT元件和GT辅助元件的功能.其中,ATCATG模序是目前尚未报道过的调控元件,与AAGAAAAA模序的距离相对恒定.基于调控元件识别结果,构建了CYP72B1基因和AUR3基因响应光、生长素和油菜素内酯的转录调控模型,模型显示:光信号和生长素、油菜素内酯信号在CYP72B1基因和AUR3基因的转录调控元件上相互交叠,而生长素和油菜素内酯信号则在转录因子ARF水平上相交.

三七活性成分对运动系统作用研究进展

三七[Panax notoginseng（Burk．）F．H．Chen]别名山漆、参三七、田七、田三七、金不换、血参、滇三七等，为五加科植物三七的根及根茎。不仅在中国。在其他亚洲及西方国家．三七亦为最广泛应用的传统中药之一。作为药用植物。三七的应用已有数百年历史，最早记载于明代李时珍的《本草纲目·草部》。其性温，味甘、微苦。入肝、胃、大肠经。主要功效为活血止血、消肿定痛。

小鼠的遗传学研究

自20世纪初,小鼠的遗传学研究从宠物农场进入哈佛大学的实验室只有短短一百年的历史;但是,由于小鼠基因组与人类基因组高度同源、小鼠基因组改造手段非常成熟以及小鼠近交系、突变系和工具小鼠品系种类繁多,小鼠遗传学已成为发育生物学、功能基因组学和疾病机理研究的核心研究领域,小鼠也成为最重要的模式生物之一。近年来,随着小鼠基因组序列测序的完成,不同小鼠近交系品系特异的微卫星标记或单核苷酸多态性不断被发现,小鼠生理生化表型分析手段和数据也越来越完善,这些前期工作导致了目前大规模的基因剔除计划、基因突变计划及构建和分析重组近交系计划的实施。这些计划可能构成未来10￣20年中生命科学和医学研究领域的最重要的内容之一。

荧光素酶活体发光技术在肺癌分子影像学研究中的初步应用

目的建立稳定表达荧光素酶报告基因的人肺癌细胞系,并将该肺癌细胞接种于严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠的皮下,构建异种移植动物模型,为下一步进行肺癌进展、转移以及药物敏感性等相关的分子影像学研究奠定基础。材料与方法利用表达重组荧光素酶基因的慢病毒载体(Lenti-Luc)感染人肺癌细胞系NCI-H460,获得稳定表达荧光素酶基因的肺癌细胞,将该细胞接种于SCID小鼠的皮下。肿瘤细胞接种2周后,利用生物发光成像系统及MRI对肿瘤进行检测,确定肿瘤的大小和位置,并进行组织病理学检查验证。结果接种肺癌细胞的4只SCID小鼠中,均生长出肿瘤。生物发光检测和MRI的结果相符,病理证实小鼠皮下肿块为癌组织。结论成功建立了稳定表达荧光素酶报告基因的肺癌细胞系及异种移植动物模型。荧光素酶活体发光是一种进行肿瘤分子影像学研究的重要手段。

实验动物生物学特性数据化表达的规范化与数据共享

生物学特性数据化表达是实验动物标准化的内容之一,也是实验动物资源共享平台建设的重要组成部分和实现资源整合与共享的条件之一。制定实验动物资源描述规范和有关规程,对实验动物生物学特性和基本信息进行规范化和标准的整理和描述,可为科技工作者提供深入、详尽的资源信息,推动实验动物资源的建设与共享。

心脏发育过程中的信号调控机制研究

我国是出生缺陷高发国家,其中先天性心脏病在各类出生缺陷中居于首位,严重地影响我国的人口素质[1]。同样,后天性心脏血管疾病(心血管疾病)也是影响国民健康和社会发展的主要疾病[2]。近年来研究表明,所谓"后天性"心脏血管疾病虽然大多不在胚胎期表现出功能异常,但遗传因素在发病过程中也起关键作用,因此,"后天性"心血管疾病也有其发育生物学基础。在一些心血管疾病中,胚胎发育基因如ANF和β-MHC的表达说明胚胎发育的某些机制参与了发病过程。由于出生缺陷和心血管疾病的防治是我国公共卫生和社会发展中亟待解决的重大健康问题,了解心血管系统正常发生发育规律和机制及发病机理并在此基础上建立新的防治策略和防治措施是生命科学需要解决的重大基础科学问题[1-2]。本文主要综述了目前模式动物,特别是小鼠心脏发育过程中的信号传导调控机制的研究现状及进展。

Akt基因多态性与先天性心脏病发病关系的研究

目的分析先天性心脏病（CHD）患儿外周血中Akt1及Akt2基因的第1～4个外显子（编码PH结构域）的突变情况，探讨Akt1及Akt2基因与CHD发病之间的关系。方法应用PCR—DNA测序技术在18例先天性心脏病患儿外周血中筛查Akt1及Akt2基因PH结构域的突变情况。结果18例样本中，未见Akt1以及Akt2编码区的突变，但在Akt1内含子部分筛查到5个单核苷酸多态性（SNPs）位点，其中有2个未被报道过。Western blot技术分析显示，部分样本Akt1的蛋白表达水平降低。结论Akt1基因SNPs可能与CHD的发病有关，AKT基因与CHD发病之间的关系有待进一步证实。

他汀类药物潜在治疗骨性关节炎研究进展

骨性关节炎(OA)是常见的关节退行性疾病,好发于老年人,是造成老年人疼痛和残疾的主要原因。随着我国人口老龄化加剧,OA将会给我国造成沉重的经济和社会负担。然而至今仍缺乏改变OA疾病进程的药物。近些年,应用他汀类药物治疗OA从基础及临床层面都取得了一些进展。相关研究表明,他汀类药物具有抗炎、抗软骨细胞老化及退变、防止细胞外基质降解等作用。故他汀类药物有望成为改变OA疾病进程的药物。

实验动物地方标准的查新和确认机制的建立及地方标准的应用

实验动物地方标准是我国实验动物标准体系的重要组成部分。在科技主管部门和质检部门的指导和支持下,我国实验动物地方标准研究工作发展很快。建立实验动物地方标准查新与确认机制,控制执行标准的有效性,对保证实验动物工作的科学监管、实验动物质量检测工作的科学、准确、可靠意义重大。

p53抑癌功能的研究进展

p53是最重要的抑癌因子之一,其抑癌机制一直是研究热点之一,并取得了系列成果。本文综合阐述p53抑制肿瘤发生、发展的几个主要功能,包括调控细胞周期、细胞自噬、清除自由基、修复受损DNA、清除不能修复的细胞、调控细胞的过度增殖和肿瘤血管生成、参与调控炎症和参与调控免疫应答反应等方面。目前,对大多数细胞自主性p53功能已有比较明确的认识,而细胞非自主性p53功能的研究,特别是炎症相关的p53功能的研究则是今后p53研究新的重要方面。

国内外云计算研究的现状与发展——基于INSPEC数据库的分析

运用文献计量方法,通过科学文摘数据库检索1969年至今所有云计算的文献,并从文献量、著者、期刊和关键词等方面对云计算领域研究论文进行分析,从而探讨世界范围内的云计算研究的现状与发展趋势。

小鼠胚胎房室管内皮细胞EMT体外研究方法的改良

目的:对小鼠胚胎房室通道内皮细胞向间充质细胞转化(epithelial-mesenchymal transdifferentiation,EMT)体外研究方法的改良。方法:根据小鼠胚胎房室管内皮细胞EMT体外胶原凝胶实验方法进行改良,去胚胎时以37℃的1×M199培养基代替冰PBS,培养液中加入了ITS。结果:显微镜下观察培养8h内皮细胞贴着胶原表面生长;48h后,爬出的间充质细胞数量和爬行的距离达到顶峰;细胞PECAM-1阳性信号的细胞与SMA阳性信号的细胞没有共定位;爬入胶原的细胞数量比率平均达(95.7±1.4)%。结论:本方法介绍的小鼠胚胎房室通道EMT体外研究方法,是很理想的体外实验的模型,可以满足各种心脏瓣膜发育实验研究的要求,为先天性心脏病的研究提供有力的实验平台。

黄酮类化合物调节干细胞分化的研究进展

干细胞不仅是研究机体发育、组织形成的良好模型,也是用于组织再生和修复的理想种子细胞。一些黄酮类化合物对干细胞的增殖、凋亡、分化起到调控作用。该文就近年来黄酮类化合物对干细胞成骨分化、成软骨分化、成心肌分化、成神经分化的作用及其机制研究作一综述,为提高干细胞的应用提供思路。

X-连锁低磷酸盐血症Pug小鼠的听力学和耳形态学研究

目的Phex基因点突变Pug小鼠是典型的人类X-连锁低磷酸盐血症小鼠模型。通过研究Pug小鼠的听力学表型,探讨Phex基因点突变对小鼠听觉功能与内耳形态的影响。方法运用听性脑干诱发电位(ABR)对4月龄Pug小鼠和野生型小鼠进行听功能测试,取小鼠耳蜗进行大体形态观察,运用石蜡切片观察小鼠耳蜗骨壁、前庭膜、血管纹、螺旋韧带、盖膜、Corti器、螺旋神经节等结构。运用扫描电镜观察小鼠耳蜗Corti器上的内、外毛细胞及其表皮板等结构。结果Pug小鼠的ABR在短声和8kHz、16kHz、32kHz短纯音刺激的反应阈值均有提高,在短声和16kHz、32kHz频率,其差异具有统计学意义(P<0.05)。小鼠耳蜗骨壁增厚,骨质过度增长,有大量骨质矿化不完全区域;耳蜗底转部位螺旋神经节出现明显退化,神经元数目大量减少;耳蜗顶转到底转内、外毛细胞静纤毛散在性缺失,静纤毛形态异常。结论Phex基因点突变引起的基因功能缺失导致了Pug小鼠的听觉功能减退和耳蜗形态异常。

Ras/Raf/MAPK信号通路与先天性心脏病发生学的研究进展

Ras/Raf/MAPK信号通路参与调控一系列重要的细胞活动,在细胞生长、发育、增殖、分化以及细胞间功能同步及细胞恶性转化等多种生理、病理过程中起重要作用。该通路成员的体细胞突变将会引起肿瘤的发生;生殖细胞突变将会影响胚胎发育过程,从而引起一系列先天性心脏病的发生,例如努南综合征等。