自噬对人肺腺癌细胞放疗敏感性的影响

目的探讨自噬对人肺腺癌细胞放疗敏感性的影响。方法采用透射电镜和荧光显微镜检测亲本人肺腺癌细胞SPC-A1和耐药细胞SPC-A1/DTX放疗前后的自噬活性。应用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)预处理经射线照射后的细胞,应用Western blotting检测自噬相关蛋白标志物LC3、p62和Beclin-1蛋白表达的变化,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布变化。四甲基偶氮唑盐和克隆形成实验分别检测抑制自噬后细胞生存和增殖能力的改变情况。结果化疗耐药的人肺腺癌耐多西他赛细胞SPC-A1/DTX比亲本细胞更耐受放疗,接受相同放疗剂量后增殖能力更强;前者较后者自噬小体较多、带绿色荧光蛋白标签的LC3荧光密度明显增多,自噬相关蛋白标志物表达更加明显(P<0.05)。放射线同时可引起两种细胞株自噬水平的增高。自噬抑制剂3-MA预先处理耐药细胞并接受放疗后,可显著抑制自噬标志物LC3和Beclin-1,上调p62表达(P<0.05),并降低SPC-A1/DTX细胞的生存和增殖能力,放射敏感的G2/M期细胞比例和凋亡率增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论自噬为SPC-A1/DTX细胞耐受放射治疗提供了一个自我保护的机制。自噬能够增强人肺腺癌耐多西他赛细胞的放疗抵抗,而抑制自噬有可能是逆转人肺腺癌细胞放、化疗耐受的一个策略。