细菌在肿瘤靶向与免疫治疗中应用的研究进展

细菌用于肿瘤治疗虽然是一个传统的研究领域,但在合成生物学理论与技术日趋完善的背景下,以细菌为载体设计新的抗肿瘤靶向与免疫治疗模式,已经形成一个独特的研究方向。特定细菌可以克服物理障碍特异性地靶向和积聚于肿瘤组织中,并可根据临床需要将外源基因导入细菌,实现基因修饰以产生活性蛋白或因子在肿瘤组织中发挥靶向和抗肿瘤免疫效应,从而提高肿瘤治疗的有效性和安全性。同时,细菌疗法不仅可以作为肿瘤治疗的单一疗法,也可与化疗、放疗和免疫治疗联合使用以获得更好的临床疗效。但是,由于肿瘤微环境的多变性与复杂性,需要进一步充分了解相关细菌和肿瘤微环境的免疫特征,进行有针对性的研究,开发出基于细菌的抗肿瘤免疫精准治疗策略,使细菌疗法在临床肿瘤治疗中得到更广泛的应用。

双功能融合膜纳米粒子水凝胶的制备及其抗肿瘤疗效评价

目的制备双功能融合膜纳米粒子海藻酸盐水凝胶(fusion membrane nanoparticles/alginate,FM-NPs/ALG),在H22小鼠肝癌皮下瘤术后复发模型中评价其预防肿瘤复发的疗效并初步探究其免疫机制。方法分别提取H22肿瘤细胞膜(tumor cell membrane,TM)和草分枝杆菌细菌膜(Mycobacterium phlei membrane,MM),在脂质体挤出器上制备成粒径约为100 nm的融合膜,并将其负载于海藻酸盐(alginate,ALG)水凝胶中构成FM-NPs/ALG,在H22小鼠肝癌皮下瘤术后复发模型中以生理盐水作为对照组,观察FM-NPs/ALG延缓肿瘤复发的疗效,并使用流式细胞术等探究可能的抗肿瘤免疫机制。结果成功制备了TM和MM的融合膜纳米粒子(fusion membrane nanoparticles,FM-NPs),平均粒径为87.4 nm。体外实验表明,与对照组相比,FM-NPs使树突状细胞(dendritic cells,DCs)活化的比例提高了约3.4倍。动物实验证实FM-NPs/ALG治疗能显著延缓肿瘤复发,在30 d内小鼠的平均肿瘤体积仅为对照组的17.3%;流式细胞术显示,FM-NPs/ALG能显著促进肿瘤引流淋巴结中DCs的活化,从而提高肿瘤浸润性T淋巴细胞(tumor-infiltrating T lymphocytes,TILs)的比例。治疗期间,小鼠的体重、重要器官脏器和肝肾功能等各项指标均在正常范围内。结论FM-NPs/ALG可以有效促进TILs的比例,延缓H22肝癌皮下瘤切除术后的复发并延长荷瘤小鼠的生存期,且该治疗方式具有良好的安全性。

“放-靶-免”组合在微卫星稳定型晚期结直肠癌三线治疗中的价值初步探索

目的:探讨“放-靶-免”联合治疗模式在微卫星稳定型(MSS)晚期结直肠癌患者三线治疗中的临床价值及毒副反应评估。方法:回顾性分析我院肿瘤中心接受上述联合治疗模式的MSS亚型晚期结直肠癌患者,对其治疗疗效及毒副反应进行评估。结果:5例接受“放-靶-免”联合治疗模式的MSS亚型晚期结直肠癌患者中最佳疗效评价为部分缓解的1例,疾病稳定的2例,疾病进展的2例,疾病控制率(DCR)为60.0%(3/5)。而在毒副反应方面,5例患者均未出现III-IV级毒副反应。结论:“放-靶-免”组合模式有望为难治性的MSS亚型的晚期结直肠癌三线治疗提供新的策略,当然该结论仍需要更大的样本量进行验证。

骨与软组织肉瘤抗血管生成靶向治疗联合化疗所致不良反应的分析

当前在骨与软组织肉瘤的治疗方案中,抗血管生成靶向治疗与化疗的联合是一种新的治疗模式。靶向药物与化疗药物联合具有协同效应,可提高治疗效果,但联合治疗所引起的毒副作用往往比单独靶向治疗或单独化疗更为明显,特别是严重毒副作用的发生不容忽视。因此,在临床工作中应当熟悉联合治疗中可能会出现的不良事件,给予患者及时有效的治疗。本综述总结了晚期骨与软组织肉瘤患者在联合治疗中出现的常见不良事件,综合分析临床已发表的数据,对比靶向单药治疗与联合化疗不良事件的发生率,以期帮助临床医师提高对联合治疗常见不良事件的认识,更好地把握联合用药的安全性,从而使患者得到更加安全、有效的治疗,以改善生活质量。

Th1/Th2漂移与肿瘤免疫治疗

Th1/Th2细胞是免疫应答调节中的关键环节,Th1/Th2漂移与多种疾病的发生发展密切相关。进展期肿瘤病人外周血中往往呈Th2优势状态,在抗肿瘤免疫中起重要作用的Th1免疫却受到抑制,因而设法逆转Th1/Th2漂移方向,增强Th1免疫,将成为肿瘤免疫治疗的新手段。

腺泡状软组织肉瘤的免疫治疗进展

腺泡状软组织肉瘤(ASPS)是一种极罕见的、预后差的恶性肿瘤,发病率占所有软组织肉瘤<1%。其标准治疗手段主要是手术切除,化疗敏感性差。近年来免疫治疗为局部晚期或转移性ASPS的治疗提供了新的治疗方案,尤其是免疫检查点抑制剂为治疗ASPS最有效的免疫治疗药物,也是非常有前景的新领域。该文回顾性分析了免疫检查点抑制剂及与靶向、放疗等联合模式免疫治疗ASPS的临床疗效,就ASPS免疫治疗的现状与进展进行综述。其中伴有远处转移的ASPS患者接受免疫治疗可获得较好的临床疗效,尤其是阿昔替尼联合帕博利珠单抗,在免疫治疗过程中,需选择合适的生物标志物,关注免疫微环境对疗效的影响及根据程序性死亡受体-1/配体-1(PD-1/PD-L1)的表达模式来指导个体化治疗。

肿瘤靶向穿透肽修饰在肿瘤腹膜转移中的应用

肿瘤腹膜转移常见于癌症晚期患者,由于腹腔内血供及其他脉管系统丰富,肿瘤病灶可广泛存在于腹膜腔区域,临床预后较差。近年来研究者提出多种诊疗策略以延缓肿瘤进展,但由于腹腔内直接注射药物的滞留时间短、无肿瘤靶向性等原因,抑瘤效果不佳。肿瘤靶向穿透肽是一类多功能短肽,不仅对肿瘤组织有特异性亲和力,还兼有向其深部渗入的特性,可修饰于抗肿瘤药物、纳米载体、免疫细胞及显像探针等,促进药物特异性富集于肿瘤深部,增强抗肿瘤作用。以肿瘤靶向穿透肽修饰介导的腹膜转移靶向治疗显示出良好应用前景,本文总结了靶向穿透肽在肿瘤腹膜转移中的应用进展。

重楼复方与氟尿嘧啶对胃癌细胞的体外协同作用研究

目的:探讨重楼复方(Chong Lou Fu Fang,CLFF)与5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)对胃癌细胞有无体外协同作用及CLFF对胸苷酸合成酶(thymidylate synthase,TS)基因表达和细胞凋亡的影响。方法:MTT法检测细胞增殖能力;基于中位效应原则的联合指数法评估CLFF与5-FU对胃癌细胞系SGC-7901和BGC-823的相互作用;Annexin-Ⅴ-FITC和PI双染色法检测细胞凋亡率;荧光定量RT-PCR法测定TS和β-actinmRNA表达。结果:CLFF在两株细胞中与5-FU均产生较好的协同细胞毒性,两药合用亦以协同方式诱导肿瘤细胞凋亡;CLFF作用24h后,SGC-7901和BGC-823细胞中TSmRNA表达水平分别为对照组的(0.30±0.03)倍和(0.46±0.03)倍,用药前后两株细胞中TSmRNA表达水平具有统计学差异。结论:CLFF与5-FU有较好的协同抗肿瘤作用,可能与二者协同诱导肿瘤细胞凋亡以及CLFF可下调胸苷酸合成酶基因表达有关。

重楼抗瘤方与奥沙利铂或多西紫杉醇对胃癌细胞的体外交互作用研究

目的:探讨重楼抗瘤方与奥沙利铂或多西紫杉醇对胃癌细胞的体外交互作用及其对化疗相关基因表达和细胞凋亡的影响。方法:MTT法检测细胞增殖能力;基于中位效应原则的联合指数法评估重楼抗瘤方与各化疗药物对胃癌细胞系SGC-7901和BGC-823的交互作用;Annexin-Ⅴ-FITC和PI双染色法检测细胞凋亡率;荧光定量RT-PCR法测定化疗相关基因表达水平。结果:重楼抗瘤方与各化疗药联合使用对胃癌细胞的增殖抑制作用优于各单药组。低浓度范围内,联合用药组产生较好的协同抗肿瘤作用,联合指数<1。凋亡分析显示联合用药组细胞凋亡率显著高于各单药组。重楼抗瘤方作用24h后,SGC-7901和BGC-823细胞中化疗药物相关基因ERCC1(Excision repair cross-complementation1)、β-tublinⅢ和Tau mRNA表达水平均显著下调。结论:重楼抗瘤方与奥沙利铂或多西紫杉醇在低浓度范围内有较好的体外协同抗肿瘤作用,可能与该复方与两化疗药协同诱导肿瘤细胞凋亡以及下调化疗相关基因表达水平有关。

紫杉醇脂质体相关性溶血性尿毒症性综合征1例附文献复习

目的:紫杉醇是新一代化疗药物,已经被用于非小细胞肺癌的一线治疗。其主要副反应是过敏性休克,而溶血性尿毒症性综合征(HUS)很少见诸报道。我们诊治了1例经过紫杉醇脂质体和顺铂联合化疗后出现HUS的患者,并获得成功。方法:一位54岁女性肺癌术后患者,紫杉醇脂质体和顺铂联合化疗后出现一系列临床症状、体征并经实验室检查。结果:诊断明确后经过血浆置换等治疗,患者痊愈出院。结论:紫杉醇脂质体相关性溶血性尿毒症性综合征是一种临床少见的并发症,临床医生对于该病应该保持高度的警惕,及时鉴别诊断和正确治疗。

夹层胶原"三明治"法短期体外培养肝细胞

目的研究胶原、表皮生长因子对新鲜分离SD大鼠肝细胞活率、形态和功能的影响。方法采用胶原酶二步原位循环肝脏灌注法分离SD大鼠肝细胞,测定不同条件培养后各组肝细胞的活性及功能。结果双层胶原及双层胶原+表皮生长因子组培养后细胞活性、细胞DNA含量及细胞功能均优于普通培养组(P<0.05)。结论双层胶原体外培养体系提供了稳定的三维立体生长环境,有利于细胞在体外长期保存。

Smac对胰腺癌细胞凋亡的作用及研究进展

胰腺癌是消化系统恶性程度最高、预后最差的肿瘤之一,目前的治疗手段并未取得令人满意的疗效。Smac是一种新型的线粒体源性促凋亡蛋白,参与细胞凋亡的线粒体通路和死亡受体通路反应,主要通过拮抗X-相关凋亡抑制蛋白(XIAP)对caspase的抑制作用促进细胞凋亡。研究表明Smac与肿瘤的发生发展、放化疗疗效具有相关性,但关于Smac在胰腺癌中的作用的研究甚少,本文就Smac在胰腺癌中表达、发生发展及治疗等方面研究进展作一论述。

多发性骨髓瘤细胞遗传学核型分析与治疗预后的相关性

目的初步探讨多发性骨髓瘤(MM)的细胞遗传学特征及其与临床治疗预后的关系。方法收集58例临床病例并将患者的骨髓细胞进行了24 h短期培养,用常规方法制备染色体和G显带技术进行核型分析。结果58例治疗前的总异常检出率为63.8%(37/58),治疗后好转病例的异常检出率为20.0%(4/20),恶化病例的异常检出率为86.8%(33/38)。恶化病例的异常核型检出率明显高于治疗好转病例,且以复杂畸变(15/33例)、高度复杂畸变(11/33例)为主,两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论多发性骨髓瘤的细胞遗传学核型分析多为复杂畸变,涉及多条染色体的数目和结构异常,并与治疗预后密切相关,可作为评估预后的一项指标。

痰液细胞DNA定量分析在原发性肺癌中的诊断价值

目的:探讨痰液细胞DNA定量分析技术(DNA-ICM)在原发性肺癌诊断中的临床意义。方法:分别采用细胞DNA-ICM和液基细胞学技术(LBC)对300例可疑肺癌患者痰液进行检查,并将结果进行比较分析。结果:细胞DNA-ICM在痰液中的阳性检出率为37.3%(112/300), LBC在痰液中的阳性检出率为21.0%(63/300),差异有统计学意义(P<0.01)。两种方法联合检查的痰检阳性率为38.7%(116/300),高于LBC,差异有统计学意义(P<0.01);也高于DNA-ICM,但差异无统计学意义(P>0.05)。细胞DNA-ICM的敏感度为42.6%(112/263),特异度为100%(37/37);LBC敏感度为23.2%(61/263),特异度为94.6%(35/37),细胞DNA-ICM的敏感度高于LBC,差异有统计学意义(P<0.01)。在病理组织分型不同的肺癌患者中,DNA-ICM在鳞癌中的敏感度高于腺癌(P<0.01)。DNA-ICM在早期肺癌及晚期肺癌检查结果中无统计学差异(P>0.05)。结论:细胞DNA-ICM技术是一种敏感而特异的肺癌筛查技术,在肺癌早期诊断方面具有一定优势,可与LBC联合应用于肺癌的筛查。

炎性肌纤维母细胞瘤临床病理及二代测序结果分析

目的探讨炎性肌纤维母细胞瘤(IMT)的临床病理学特点、二代测序(NGS)结果及诊治进展。方法收集2020年6月至10月南京鼓楼医院诊治的3例IMT患者的临床资料,回顾性分析其临床病理学特征、NGS结果及治疗效果等,并结合相关文献进行分析。结果3例IMT患者中女2例,男1例;原发于子宫1例,小肠2例。3例患者均因腹痛起病,肿瘤眼观均为灰白色组织,镜下肿瘤主要由增生的纤维母细胞样细胞构成,肿瘤浸润淋巴细胞(TILs)比例分别为<5%、5%~10%、20%。免疫表型:1例ALK D5F3阳性,2例ALK D5F3阴性;2例PD-L1阳性,1例PD-L1阴性。二代测序结果显示,3例患者肿瘤突变负荷(TMB)均较低,1例患者存在新型TNC-ALK、ALK-DTNB基因重排。除1例患者死亡外,余2例患者均接受综合治疗,一般情况良好。结论IMT具有炎性特征,虽然TMB较低,但其间质内常伴淋巴细胞浸润,PD-L1阳性率较高,免疫治疗可能颇具潜力。

异时原发乳腺癌和皮肤Merkel细胞癌1例及文献复习

目的:探讨皮肤Merkel细胞癌的诊断及鉴别诊断、治疗及预后。方法:对1例异时原发乳腺癌和皮肤Merkel细胞癌患者的临床病史、肿瘤组织的病理免疫组化表达及治疗过程进行回顾性分析。结果:本例Merkel细胞癌患者表现为乳腺癌术后3年出现皮肤肿块,无乳腺癌复发和转移证据;免疫组化表达神经内分泌标志物和细胞角蛋白20(CK20)。于术后6月复发,术后4年死亡。结论:Merkel细胞癌罕见且进展快,即使综合治疗后仍有局部复发和远处转移的倾向,预后差。诊断主要依靠病理,免疫组化染色有助于鉴别诊断。临床上需结合病史与第一原发癌的转移相鉴别。

血清ALP、PINP、PTHrP对肺癌骨转移诊断的价值

目的:探讨骨代谢生化标志物与骨转移癌进展程度的相关性,旨在早期判断肺癌骨转移的发生。方法:选取2010年9月至2011年9月在南京鼓楼医院就诊的88例肺癌患者。所有患者均经组织病理证实为肺癌,骨转移的发生经患者临床表现、ECT及CT证实。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清Ⅰ型前胶原氨基端前肽(PINP)及甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)的表达水平,化学发光方法检测碱性磷酸酶(ALP)、血清肿瘤标志物CEA、CA125、CYFRA21-1及NSE表达水平。比较ECT全身骨显像诊断为骨转移和非骨转移两组患者中ALP、PINP、PTHrP、CEA、CA125、CYFRA21-1及NSE的血清水平。结果:血清ALP的受试者工作特征曲线下面积为0.646,敏感度及特异度分别为51.2%及82.6%。PINP的曲线下面积为0.844,敏感度及特异度分别为73.2%及87%。PTHrP的曲线下面积为0.791,敏感度及特异度分别为78%及67.4%。PINP对于肺癌骨转移的预测具有较高的诊断价值。ALP、PINP及PTHrP的联合应用诊断肺癌骨转移的曲线下面积为0.903,诊断敏感度及特异度分别为85.4%及89.1%,具有更高的诊断效率。此外血清肿瘤标志物中CEA、CA125及CYFRA21-1的联合诊断曲线下面积为0.702,诊断价值弱于ALP、PINP及PTHrP的联合应用。结论:通过检测ALP、PINP、PTHrP有助于早期诊断肺癌骨转移的发生,指标联合诊断的效能更高。

83例结直肠癌体外药物敏感性及临床病理参数相关性

目的:通过结直肠癌体外药物敏感性实验,分析临床病理因素与7种化疗药物体外药敏结果相关性,从而为临床选择化疗药物提供理论依据。方法:收集100例新鲜人结直肠癌标本,均经病理证实为癌。采用三维微组织块培养法(HDRA)比较7种化疗药物的体外敏感性。成功完成83例,同时评价体外药敏结果与临床病理参数之间的相关性。结果:7种化疗药物的体外敏感性结果依次为:5-FU 43.93%、奥沙利铂52.00%、伊立替康25.39%、培美曲塞33.13%、雷替曲塞32.01%、多西紫杉醇16.73%、吉西他滨23.14%。体外药敏结果与患者年龄、性别、部位、淋巴结转移、分期没有明显相关性,而与分化程度呈负相关。结论:体外药敏实验对临床用药具有一定指导意义,结直肠癌分化水平与化疗药物体外药敏结果具有一定相关性。