高黏液型肺炎克雷伯菌毒力基因及临床特征分析

目的探讨高黏液型与非高黏肺炎克雷伯菌的毒力基因及临床特征的差异性。方法选择2018年7月至2022年5月南京鼓楼医院集团仪征医院门诊和住院患者临床分离的154株肺炎克雷伯菌为研究对象。检测154株肺炎克雷伯菌对常用抗菌药物的敏感性;采用拉丝试验检测肺炎克雷伯菌的黏性,比较高黏液型和非高黏液型肺炎克雷伯菌感染者急性期白细胞计数、中性粒细胞百分比、超敏C反应蛋白、体温、感染部位和科室分布差异;用PCR检测菌株毒力基因rmpA、rmpA2、magA、aerobactin的携带情况。结果除氨苄西林及妥布霉素外,高黏液型菌株对常用抗菌药物的耐药率均明显低于非高黏液型(P<0.05);高黏液型菌株和非高黏液型菌株之间产超广谱β-内酰胺酶菌株检出率差异无统计学意义(P>0.05),高黏液型菌株碳青霉烯耐药肠杆菌科细菌(CRE)检出率明显低于非高黏液型(P<0.05)。高黏液型菌株和非高黏液型菌株感染者性别、年龄、白细胞计数、超敏C反应蛋白和科室分布情况比较,差异均无统计学意义(P>0.05),但高黏液型菌株感染者中体温>37.2℃和中性粒细胞百分比>70%的比例高于非高黏液型菌株(P<0.05),高黏液型菌株在呼吸道感染患者的检出构成比高于非高黏液型菌株(P<0.05),高黏液型菌株在泌尿系统感染患者的检出构成比却低于非高黏液型菌株(P<0.05)。高黏液型菌株毒力基因rmpA、rmpA2、aerobactin的携带率均明显高于非高黏液型菌株(P<0.05),而两种菌株的magA基因携带率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论高黏液型肺炎克雷伯菌的耐药率总体低于非高黏液型,但并非所有菌株均表达毒力基因且使患者具有感染指征,临床在判断肺炎克雷伯菌株毒力时应结合临床特征和毒力基因。

外排泵在肺炎克雷伯菌对左氧氟沙星耐药中的作用

目的探讨肺炎克雷伯菌(KP)中外排泵OqxAB、AcrAB和QepA介导的左氧氟沙星(LVX)耐药机制。方法选择分离自南京鼓楼医院集团仪征医院2018年7月至2020年12月的门诊和住院患者的106株KP(剔除同一患者相同部位的重复分离株),采用微量肉汤稀释法检测KP对常用抗菌药物的敏感性,根据药物敏感试验结果随机选择24株对LVX耐药的KP作为试验组,27株LVX非耐药的KP作为对照组。采用羰基氰氯苯腙泵抑制法检测KP的外排泵表型,采用实时定量反转录PCR检测外排泵OqxAB、AcrAB和QepA相应表达基因OqxA、acrB和QepA的表达水平,采用常规PCR及测序检测acrR基因突变。分析两组KP外排泵基因表达水平的差异,LVX最低抑菌浓度(MIC)与外排泵基因表达水平间的关联性,以及两组KP外排泵表型的差异。结果试验组与对照组KP外排泵表型试验结果差异无统计学意义(P>0.05)。两组KP外排泵基因OqxA、QepA表达水平差异无统计学意义(P>0.05),而acrB表达水平差异有统计学意义(P<0.05),且试验组acrB表达水平与LVX的log 2MIC呈正相关(r=0.544,P<0.05)。试验组调控因子acrR突变率为58.3%(14株),携带突变型acrR基因的KP(14株)与携带野生型acrR基因的KP(10株)之间acrB表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论外排泵是介导KP对LVX耐药的机制之一,AcrAB在外排泵介导KP对LVX耐药中具有明显作用;OqxAB和QepA虽广泛分布于KP中,但并不是介导KP对LVX耐药的主要机制。