巯基丙酮酸硫基转移酶介导PI3K/AKT信号对急性胰腺炎细胞模型凋亡和自噬的影响

目的:研究巯基丙酮酸硫基转移酶(MPST)介导PI3K/AKT信号对急性胰腺炎(AP)细胞模型凋亡和自噬的影响。方法:构建AP体外细胞模型,分组为CON组、AP组、AP+siMPST组和AP+oeMPST组。采用CCK-8法检测细胞活力;采用ELISA法检测细胞上清炎症因子TNF-α、IL-1和IL-6水平;采用流式细胞仪检测细胞凋亡水平;采用Western blotting检测腺泡细胞LC3Ⅱ/Ⅰ、beclin1、ATG5、MPST、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT的表达水平。结果:AP组、AP+siMPST组和AP+oeMPST组的细胞存活率均低于CON组(P<0.01),而细胞凋亡率则均高于CON组(P<0.01);AP+siMPST组细胞存活率、AP+oeMPST组细胞凋亡率均高于AP组(P<0.01),而AP+siMPST组细胞凋亡率、AP+oeMPST组细胞存活率均低于AP组(P<0.01)。AP组、AP+oeMPST组的腺泡细胞TNF-α、IL-1和IL-6、LC3Ⅱ/Ⅰ、beclin1、ATG5、MPST、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT水平明显高于CON组(P<0.01);上述指标水平AP+siMPST组均低于AP组(P<0.01),而AP+oeMPST组则均高于AP组(P<0.01)。结论:MPST可通过PI3K/AKT信号诱导胰腺腺泡细胞凋亡、自噬和炎症反应;抑制MPST可能对AP具有治疗意义。

巯基丙酮酸硫基转移酶调控核因子κB信号介导自噬对重症急性胰腺炎大鼠的影响及机制

目的研究巯基丙酮酸硫基转移酶(MPST)调控核因子κB(NF-κB)信号介导自噬对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠的影响。方法将50只SD大鼠随机分为Sham组、SAP组(重症急性胰腺炎造模)、SAP+AAV-NC组(AAV对照病毒注射+SAP造模)、SAP+AAV-MPST OE组(AAV MPST过表达病毒注射+SAP造模)和SAP+AAV-MPST shRNA组(AAV MPST敲除病毒注射+SAP造模)。分别采用HE染色和胰腺组织损伤评分评价胰腺炎病情严重程度;电镜观察胰腺组织自噬泡;比色法检测血清淀粉酶和脂肪酶的活性;ELISA法检测胰腺组织IL-6表达水平;Western blot检测胰腺组织MPST、LC3Ⅱ/I、beclin1、ATG5、p-NF-κB、NF-κB、β-actin蛋白表达水平。结果与SAP组相比,SAP+AAV-MPST OE组大鼠胰腺损伤评分、自噬泡数量、血清淀粉酶和脂肪酶活性水平、IL-6水平、MPST、LC3Ⅱ/I、beclin1、ATG5和p-NF-κB/NF-κB水平显著升高,而SAP+AAV-MPST shRNA组大鼠这些指标均显著降低(P<0.01)。结论MPST可通过NF-κB信号诱导胰腺组织自噬和炎症反应,进而促进SAP病情;抑制MPST对SAP的治疗具有重要意义。