NKX6.3对食管癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响及作用机制

目的探讨NKX6.3对食管癌细胞增殖、凋亡及侵袭的影响及可能的作用机制。方法人食管癌EC9706细胞分别转染NKX6.3(NKX6.3组)和空白质粒(miR-NC组),设空白对照组(Control组)。CCK-8法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞内活性氧、线粒体膜电位及细胞凋亡情况,Transwell法检测细胞侵袭能力,Western blot检测增殖相关蛋白Ki67、侵袭相关蛋白(Vimentin、E-cadherin及N-cadherin),凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax及Caspase-3)的表达。结果 Control组、miR-NC组和NKX6.3组食管癌EC9706细胞中NKX6.3表达、细胞增殖能力、细胞内活性氧、线粒体膜电位、细胞凋亡及侵袭能力,以及Ki67、Vimentin、E-cadherin、N-cadherin、Bcl-2、Bax及Caspase-3蛋白表达差异均有统计学意义(P<0.01)。其中,NKX6.3组NKX6.3表达量、细胞内活性氧,细胞凋亡率,Vimentin、E-cadherin、Bax及Caspase-3蛋白表达水平较miR-NC组升高;而线粒体膜电位、细胞增殖率、细胞侵袭数目、N-cadherin及Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.01)。结论NKX6.3可抑制食管癌细胞增殖和侵袭,促进细胞凋亡,该作用可能通过调控食管癌细胞中的增殖凋亡相关蛋白表达及活性氧水平实现。

幽门螺杆菌感染与自身免疫性甲状腺疾病的关系

目的分析幽门螺杆菌(Hp)感染与自身免疫性甲状腺疾病(AITDs)的关系。方法选取2019年1月-2021年3月在川北医学院附属医院确诊的240例AITDs患者为研究对象,根据是否合并Hp感染分成Hp感染组132例和非Hp感染组108例。化学发光免疫法检测血清甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺素受体抗体(TRAb)、游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺激素(FT4)水平;酶联免疫吸附法测定血清促甲状腺激素(TSH)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、白细胞介素(IL)-8、IL-6、干扰素-γ(IFN-γ)、C-反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IgA(Hp-IgA)及IgG(Hp-IgG)抗体水平;蛋白质印迹法检测Wnt通路相关蛋白。结果两组患者FT3、FT4和TSH水平比较,无统计学差异。Hp感染组患者TPOAb、TGAb、TRAb、IL-6、IL-8、CRP、TNF-α、MMP-9、TIMP-1、Hp-IgG、Hp-IgA水平高于非Hp感染组,IFN-γ水平低于非Hp感染组(P<0.05)。Hp感染组患者血管内皮生成因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(b-FGF)、细胞周期蛋白-D1(Cyclin D1)和β-连环蛋白(β-catenin)蛋白水平高于非Hp感染组(P<0.05)。结论Hp感染促进ATIDs患者炎症反应,降低免疫能力,可能是通过调节Wnt/β-catenin信号通路实现的。

ERK、VEGF和MMP-9在4NQO诱导的小鼠食管癌细胞中的表达

目的探讨细胞外信号调节激酶(ERK)、血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在4-硝基喹啉1-氧化物(4NQO)诱导的小鼠食管癌细胞中的表达。方法选取雌性BABL/c小鼠200只,分为正常组(50只)和模型组(150只),模型组应用4NQO构建食管癌模型,分为模型10周组、模型15周组和模型20周组,各50只。期间监测体重变化,20周以后均麻醉处死。模型组取食管癌细胞,正常组取正常食管细胞。应用MTT法检测细胞活力,应用RT-PCR及Western blot法检测ERK、VEGF、MMP-9 mRNA和蛋白表达量。结果在造模第2天、第10周、第15周、第20周,正常组小鼠体重比较无统计学差异(P>0. 05),各模型组小鼠体重随造模时间延长显著下降(P<0. 01)。MTT结果显示,在饲养20周后,模型10周组、15周组、20周组食管癌细胞增殖率高于正常食管细胞(P<0. 01);随着造模时间的延长(10周→15周→20周),各模型组食管癌细胞增殖率显著增高,差异有统计学意义(P<0. 01)。RT-PCR法结果显示,随着造模时间延长(10周→15周→20周),模型各组癌细胞内的ERK、VEGF和MMP-9 mRNA相对表达量逐渐增加,且均高于对照组(P<0. 01);Western blot结果显示,随着造模时间延长(10周→15周→20周),模型各组癌细胞内的ERK、VEGF和MMP-9蛋白相对表达量逐渐增加,且均高于对照组(P<0. 01)。结论 ERK、VEGF和MMP-9与食管癌细胞增殖和预后转归直接相关。