结核分枝杆菌耐药基因突变位点对异烟肼体外最小抑菌浓度的影响

目的探讨结核分枝杆菌(Mtb)耐药基因突变位点对异烟肼(INH)体外最小抑菌浓度(MIC)的影响。方法利用基因芯片法筛选耐INH人型Mtb菌株,得到inh A-15(C-T)突变株20株、Kat G315(G-C)突变株46株,另筛出非突变株32株。采用罗氏培养法对菌株进行复苏,并进行梯度浓度INH敏感性试验,了解INH对不同菌株的MIC。结果 INH对inhA-15(C-T)突变菌株的MIC为(0.375±0.079)μg/ml,对Kat G315(G-C)突变菌株的MIC为(5.757±4.060)μg/ml,对无突变菌株的MIC为(0.061±0.050)μg/ml,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。3株无突变菌株表现为低度耐药,inhA-15(C-T)突变组中有1株表现为敏感,其余表现为耐药,Kat G315(G-C)突变菌株均表现为耐药。结论基因芯片筛选的Mtbinh A-15(C-T)和KatG315(G-C)突变株均对INH存在不同程度的耐药,临床可根据不同突变位点菌株的耐药结果初步判断Mtb对INH的耐药性。

刃天青法检测青蒿琥酯对耐药结核分枝杆菌药物敏感性初步研究

目的了解青蒿琥酯(artesunate,ASN)单独或联合利福平(rifampicin,RFP)、异烟肼(isoniazid,INH)、链霉素(streptomycin,SM)、氧氟沙星(ofloxacin,OFLX)等抗结核药物对耐药结核分枝杆菌的抑制作用,为耐药结核的治疗寻找新的有效药物提供依据。方法采用刃天青法检测ASN对耐药结核分枝杆菌的抑制作用,并采用ASN联合RFP、INH、OFLX、SM对耐药结核分枝杆菌抗结核药物MIC研究。结果本研究测试的14株耐药菌株中,7株MIC值为256μg/m L,6株MIC值为128μg/m L,1株MIC为512μg/m L,MIC50为256μg/m L,MIC90为256μg/m L。16株敏感株中,MIC50为128μg/m L,MIC90为256μg/m L。两者差异无统计学意义(P>0.05)。此外,当ASN终浓度为32~128μg/m L时,能明显改善耐药MTB对RFP、INH、OFLX、SM等抗结核药物的敏感性。结论 ASN对抗耐药结核分枝杆菌作用可能甚微,但其能协同或逆转抗结核药物改善耐药MTB的药物敏感性,可能成为耐多药结核治疗备选新药。

青蒿琥酯通过诱导HO-1产生对结核分枝杆菌诱导的THP-1细胞TNF-α分泌的影响

目的探讨青蒿琥酯(ASN)诱导HO-1产生对结核分枝杆菌(Mtb)诱导的THP-1细胞分泌细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响并探讨其可能的作用机制。方法体外培养THP-1细胞,将细胞分为对照组、ASN组、Mtb组、ASN预处理组及Zn PP预处理组。ASN预处理组为浓度0～20μg/ml ASN预处理THP-1细胞4 h,随后加入Mtb(感染复数MOI=10)刺激24 h。锌原卟啉(Zn PP)预处理组为10μmol/L Zn PP抑制剂与THP-1预处理4 h,随后加入Mtb(MOI=10)刺激24 h。MTT法检测ASN对细胞的活性影响。RT-q PCR检测细胞因子TNF-α、核因子E2相关因子2(Nrf2)及血红素氧合酶1(HO-1) mRNA表达; ELISA检测TNF-α蛋白分泌。结果 MTT法检测ASN浓度在0～20μg/ml范围内对细胞无毒性;与对照组相比,Mtb显著增加TNF-αmRNA及蛋白表达,而5～20μg/ml ASN组呈浓度依赖性抑制TNF-αmRNA及蛋白表达(P <0. 05)。此外,ASN能上调Nrf2及HO-1mRNA表达,HO-1竞争性抑制剂Zn PP能增加TNF-α蛋白分泌。结论 ASN通过诱导HO-1产生抑制Mtb诱导的炎症反应。

Hsa-miR-340对膀胱癌T24细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨和研究hsa-miR-340表达上调对人膀胱癌T24细胞增殖、凋亡能力的影响。方法化学合成hsa-miR-340模拟物,瞬时转染膀胱癌T24细胞,以实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测hsamiR-340在膀胱癌T24细胞中相对表达量,确定能够转染成功并有较高的转染率后,分别通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和流式细胞计数仪,分析转染hsa-miR-340模拟物前后对膀胱癌T24细胞的增殖及凋亡能力的影响。结果①hsa-miR-340模拟物可在膀胱癌T24细胞中表达,并以RT-PCR验证相对含量较高,差异有统计学意义(P<0.05)。②增殖实验中分别在48h和72h时把实验组与阴性对照组和空白对照组相对比,膀胱癌T24细胞生长增殖明显受抑制且差异有统计学意义(P<0.05),说明hsa-miR-340过表达后,能使T24细胞增殖能力受到有效抑制。③hsa-miR-340模拟物转染T24细胞48h后,以流式细胞仪检测T24细胞凋亡率,分别为实验组(11.37±0.41)%、阴性对照组(6.72±0.32)%、空白对照组(6.62±0.23)%,比较后差异有统计学意义(P<0.05),说明hsa-miR-340过表达使T24细胞的凋亡显著增加。结论 hsa-miR-340可能参与膀胱癌的进展。

基质金属蛋白酶及其抑制物在慢性阻塞性肺疾病中的相关研究

目前大多数学者认为蛋白酶与抗蛋白酶之间的不平衡是慢性阻塞性肺疾病（COPD）形成中的一个重要环节。由于基质金属蛋白酶（MMP）具有降解细胞外基质（ECM）的功能．MMP增多将导致蛋白酶过度水解，细胞外基质形成肺泡腔的扩大，使肺组织失去弹力。同时气道的慢性炎症导致大量黏液分泌．纤维素的渗出，引起气道狭窄。金属蛋白酶组织抑制剂（TIMP）具有抑制MMP活性的功能。MMP的增多及MMP与TIMP之间的不平衡促进了炎症应答对肺组织的损伤，进一步导致COPD的形成。

一种显微图像处理与识别系统

用DSP技术对显微图像进行处理和分析 ,能有效地协助诊断诸如各种癌和肿瘤等多种病症 .本文介绍了癌细胞显微图像的四种识别方案 ,即形态学识别、模糊模式识别、色度学识别、体视学方法 ,并进行了相关的实验 ,得到了较好的效果 。

rpoB基因不同突变位点结核分枝杆菌利福平体外最小抑菌浓度的变化

目的探讨rpoB基因不同突变位点结核分枝杆菌利福平体外最小抑菌浓度(MIC)的变化。方法收集人型的结核分枝杆菌菌株103株,利用基因芯片法筛选rpoB耐药突变基因菌株。采用绝对浓度法对所有菌株进行不同浓度的利福平药敏试验,观察不同菌株对利福平的MIC。结果基因芯片共分离出55株rpoB突变株,48株非突变株。突变株MIC值为(459.6±205.8)μg/ml,高于非突变株的(5.0±4.5)μg/ml(P<0.05)。55株rpoB突变株中突变位点分别为531(C→T)、526(C→G/T)和516(A→G/T),531(C→T)位点突变株的MIC值为(576.0±29.3)μg/ml,均高于516(A→G/T)的(432.9±38.2)μg/ml和526(C→G/T)的(355.5±59.5)μg/ml(P<0.05),但526(C→G/T)、516(A→G/T)位点突变株的MIC比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论基因芯片检测结核分枝杆菌rpoB基因突变株与其耐药表型相关性较高。不同突变位点的结核杆分枝菌菌株对利福平的耐药程度有差异,可为临床合理用药提供参考。

肝癌干细胞的分选和治疗进展

肿瘤干细胞学说是目前的研究热点,多项研究表明在人类实体瘤中存在肿瘤干细胞,而干细胞数量在肿瘤细胞中含量极少,目前没有特异性肿瘤表面标志物能对肿瘤干细胞进行分选,所以如何有效分离肿瘤干细胞及干预其生长是目前值得研究的课题,本文就肝癌干细胞的表面标志物、分选方法、治疗及存在的问题做一综述。

组织蛋白酶L及高敏C反应蛋白在冠心病中的研究进展

随人民生活水平的提高,心血管疾病的发病呈逐年增高的态势。近年来的研究表明,组织蛋白酶L及hs-CRP可能与冠心病的发生、发展密切相关,并影响粥样硬化病变的进展及斑块的稳定性。本研究对CatL及hs-CRP在急性冠脉综合症中的研究进展作一综述。

自体血小板分离技术对深低温停循环主动脉手术患者血液保护作用的Meta分析

目的系统评价自体血小板分离技术(APP)对深低温停循环(DHCA)主动脉手术患者的血液保护作用。方法检索PubMed、Embase、Cochrane Library、中国生物医学文献数据库、中国知网、万方数据库和维普数据库,时间均从建库至2019年7月,收集APP应用于DHCA主动脉手术患者的随机对照试验(RCT)。采用RevMan5.3软件进行Meta分析。结果共纳入6篇RCT,共计464例患者。Meta分析结果显示,与对照组相比,APP组术中异体红细胞(RBC)(MD=-1.02,95%CI-2.69~0.64,P=0.23)、血小板(PLT)(MD=-3.74,95%CI-7.77-0.29,P=0.07)输注量减少,比较差异无统计学意义;术中新鲜冰冻血浆(FFP)(MD=-320.53,95%CI-588.74^-52.31,P=0.02)、冷沉淀(CP)(MD=-3.50,95%CI-4.33^-2.67,P<0.00001)输注量明显减少,差异有统计学意义;术后异体RBC(MD=-1.74,95%CI-2.50^-0.99,P<0.00001)、FFP(MD=-182.51,95%CI-204.91^-160.11,P<0.00001)、CP(MD=-1.92,95%CI-2.57^-1.27,P<0.00001)、PLT(MD=-3.06,95%CI-5.81^-0.32,P=0.03)输注量明显减少,差异有统计学意义;术中出血、术后24h引流量、机械通气时间、ICU住院时间及总住院时间明显减少(P<0.05);住院期间病死率、术后急性肺损伤、术后急性肾损伤和术后血液滤过率比较差异无统计学意义。结论APP可以显著减少DHCA主动脉手术患者围术期异体输血量,是一项有效的血液保护措施,但上述结论仍需更多高质量的研究予以证明。

基质金属蛋白酶-9在冠心病中的作用研究进展

冠心病（coronaryheandisease，CHD）是一种临床常见的慢性进展性疾病，由多因素综合所致，病理基础是动脉粥样硬化（atherosclerotic，AS）。而冠状动脉粥样斑块的稳定性能很好地反映急性冠状动脉事件的可能性。研究不稳定斑块特点、寻找反映易损斑块的早期指标成为近年心血管疾病的讨论热点。基质金属蛋白酶（matrixmetalloproteinases，MMPs）是一种可以降解细胞外基质（ECM）的蛋白水解酶，多在斑块肩部降解ECM，引起斑块破裂出血，引发急性冠状动脉综合征（acutecoronarysyndrome，ACS），

抗病毒治疗慢性乙型肝炎合并非酒精性脂肪性肝病的效果观察

目的分析合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)对慢性乙型肝炎(CHB)抗病毒疗效的影响,为此类患者的临床治疗提供参考。方法选取2011年1月—2017年12月在深圳市第三人民医院就诊的患者187例,分为CHB组(43例)、NAFLD组(41例)、CHB合并NAFLD组(103例)。所有患者在入组和随访的不同时间点行身高、体质量、ALT、AST、血脂四项、肝纤维化四项、APRI、HBsAg、HBeAg、抗-HBe、HBV DNA定量检查,比较进行抗病毒治疗的CHB患者和CHB合并NAFLD患者在使用抗病毒药物12、24、48、72、96周的治疗效果。符合非正态分布的计量资料多组间比较采用Kruskal-Wallis H检验,两组间比较采用Wilcoxon秩和检验;计数资料组间比较采用χ2检验。结果基线时CHB组和CHB合并NAFLD组的PLT、ALT、GGT、ALP水平和右叶斜径均显著低于NAFLD组(P值均<0.05),CHB合并NAFLD组的BMI、TC、TG水平显著高于CHB组(P值均<0.05),其脾脏厚度显著低于CHB组(P<0.05),两组中的其他指标水平在基线期差异均无统计学意义(P值均>0.05)。抗病毒治疗12周时,CHB组和CHB合并NAFLD组患者的肝纤维化指标及炎症指标差异均无统计学意义(P值均>0.05),24、48周时CHB组的ALT(Z值分别为-2.128、-3.055,P值均<0.05)、GGT(Z值分别为-2.025、-1.631,P值均<0.05)水平下降更明显,48周时CHB组(Z=-6.445,P<0.001)和CHB合并NAFLD组(Z=-4.415,P<0.001)的HBV DNA水平均较治疗前显著降低,但CHB组的降低水平更明显。CHB合并NAFLD组在抗病毒治疗的不同时间点,HBV DNA转阴率均显著低于CHB组(χ2值分别为14.237、13.961、15.226、10.462、13.030,P值均<0.05)。抗病毒治疗48周时,CHB合并NAFLD组的HBeAg转阴率显著低于CHB组(χ2=5.309,P=0.021),但96周时两组间的转阴率差异无统计学意义(χ2=0.117,P=0.732)。抗病毒治疗24、48、72、96周,CHB合并NAFLD组的ALT复常率均显著低于CHB组(χ2值分别为12.049、5.287、11.407、11.375,P值均<0.05)。结论合并NAFLD降低了CHB患者的抗病毒治疗效果,使抗病毒治疗时间延长。

青蒿琥酯对结核分枝杆菌ESAT-6和CFP-10诱导的HO-1表达影响

目的研究青蒿琥酯(ASN)对结核分枝杆菌早期分泌抗原靶-6(ESAT-6)和培养滤液蛋白10(CFP-10)诱导的HO-1表达影响,并探讨其可能的作用机制。方法体外培养THP-1细胞,依据实验设计,四唑盐(MTT)法检测ESAT-6和CFP-10对细胞活性影响; ASN预处理4 h后,ESAT-6和CFP-10作用24 h,RT-qPCR检测血红素氧合酶-1(HO-1) mRNA表达水平,Western blot检测Toll样受体2(TLR2)表达水平。结果 MTT法检测ESAT-6和CFP-10在浓度0～5μg/ml范围内对细胞无毒性;与对照组相比,5μg/ml ESAT-6和5μg/ml CFP-10均能明显上调HO-1 mRNA表达水平(P <0. 05);此外,20μg/ml ASN能明显增强ESAT-6和CFP-10诱导的HO-1 mRNA表达水平(P <0. 05),并能抑制ESAT-6和CFP-10诱导的TLR2受体表达。结论 ASN联合ESAT-6或CFP-10,对病原相关炎症性疾病的治疗可能具有潜在应用价值。

氨甲环酸用于创伤外科的研究进展

随着社会的发展、交通工具的日益增多，创伤已成为全球性的社会突出问题，每年全世界死于创伤的人数达到数百万，是导致5-45岁人群死亡的第二大死因[1]。据2015年6月发表在《Lancet》杂志上关于188个国家的301种急慢性疾病的荟萃分析中，创伤占所有发病率中的15．42％，其中交通伤占创伤的27．67％，并且呈逐年增长趋势[2]。

γ干扰素释放试验结合生化指标在诊断结核性胸腔积液中的作用

目的探讨胸腔积液γ-干扰素释放试验(Interferon-γrelease assays,IGRAs)结合其他生化指标在结核性胸腔积液诊断中的作用,为结核性胸腔积液诊断提供新的方法。方法收集2010年1月-2016年12月份在深圳市第三人民医院住院的201例患者的胸腔积液,并分为结核性胸腔积液(Tuberculous pleural effusion,TPE)和恶性胸腔积液(Malignant pleural effusion,MPE)。检测胸腔积液腺苷脱氨酶(Adenosine deaminase,ADA)、癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen,CEA)水平,并分离出胸腔积液单个核细胞(Pleural fluid mononuclear cells, PFMCs)进行IGRAs。采用Graphpad软件作图并绘制ROC曲线分析,采用SPSS 17.0软件进行数据的统计分析。结果结核分枝杆菌特异性重组蛋白抗原ESAT-6刺激PFMCs后,TPE和MPE患者特异性斑点形成细胞数(Spots-forming cells,SFCs)分别为276.1±12.08和65.26±11.65,两组差异有统计学意义(P<0.01),ROC分析显示其相应的曲线下面积(Area under curve,AUC)为0.89;ADA和CEA可有效地用于区分TPE和MPE患者,ADA在TPE患者中的含量较高(65.56±1.99) U/L,其AUC为0.95,CEA在MPE患者中的含量较高(94.6±8.86)U/L,其AUC为0.97;当IGRA未联合ADA或CEA时,其灵敏度和特异度分别为96.38%和29.31%或99.22%和30.19%,当IGRA联合ADA或CEA时可以提高TPE诊断效能,其灵敏度和特异度分别为81.88%和98.28%或86.72%和100.00%。结论胸腔积液γ-干扰素释放试验联合ADA或CEA可以提高TPE患者诊断效能。

头颈肿瘤切除术后缺损修复与重建中组织瓣研究进展

头颈部因其结构和功能的特殊性,肿瘤切除术后所造成缺损经常不能直接拉拢缝合,而需要组织瓣来进行修复.本文回顾了近40年来外科技术的进步,针对头颈肿瘤术后缺损的带蒂组织瓣与游离组织瓣等修复方法的特点,就其历史沿革、解剖基础、适应证及优缺点等进行综述.