TP53在胃癌组织中的表达及临床意义

目的:选取课题组前期鉴定的胃癌相关蛋白质TP53,了解该蛋白在胃腺癌组织中的表达情况,并分析其临床意义。方法:采用胃癌组织芯片结合免疫组织化学染色分析TP53蛋白在胃癌组织中的表达。依据免疫组织化学染色检测胃癌组织中的表达结果,结合患者的临床资料,分析TP53蛋白表达与临床资料两者间的意义。结果:1、TP53蛋白主要表达于细胞核,其在不同组织中的表达率分别为正常胃粘膜2.82%、癌旁组织18.43%、胃癌62.39%、淋巴结转移癌组织80.23%。胃癌组织中的阳性表达率分别为高分化腺癌54.22%、中分化腺癌62.5%、低分化腺癌79.49%。2、胃腺癌与淋巴结转移癌组织中TP53蛋白呈现高表达,且明显较正常胃粘膜及癌旁组织中表达高(P<0.01)。癌旁与正常胃粘膜组织中TP53蛋白呈现低表达,但癌旁组织中表达较正常胃粘膜组织高(P<0.01)。3、胃腺癌组织分化程度的降低,TP53蛋白阳性表达率逐渐增加(P<0.01)。TP53蛋白在胃腺癌组织中的表达与组织分化程度呈负相关,而与TNM分期及淋巴结转移呈正相关(P<0.01)。结论:胃癌组织中TP53蛋白高表达与组织分化程度及肿瘤进展相关。

PD-L1蛋白在鼻咽癌中的表达及其临床意义

目的探讨PD-L1在鼻咽癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学技术对收集的162例鼻咽癌组织进行PD-L1蛋白的表达检测,并结合患者临床病理参数及预后信息,探讨其临床价值。结果PD-L1蛋白表达水平与性别、年龄、PS评分、临床分期、吸烟情况等临床病理参数之间无显著差异(P> 0. 05)。PDL1阳性组与阴性组3年总生存率分别为92. 3%与80. 0%,差异具有统计学意义(P=0. 026)。结论 PD-L1蛋白阳性鼻咽癌患者预后较好,有望成为鼻咽癌患者预后评估的生物标志物。

Calreticulin通过诱导细胞EMT促进鼻咽癌迁移和侵袭

目的:观察钙网蛋白(calreticulin,CRT)在鼻咽癌组织中的表达并分析其临床病理学意义,揭示其对鼻咽癌CNE2细胞上皮-间充质转化(EMT)的影响。方法:S-P免疫组化法检测CRT在52例鼻咽癌组织和57例鼻咽部良性病变组织中的表达情况,并分析其临床病理学意义;构建特异性干扰CRT基因的小干扰RNA干扰载体,瞬时转染鼻咽癌CNE2细胞,观察CRT低表达对CNE2细胞形态的影响;Transwell迁移和侵袭实验检测CRT低表达对CNE2细胞迁移和侵袭能力的影响;Western blot检测CRT低表达对上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、转化生长因子-β(TGF-β)及基质金属蛋白酶9(MMP-9)等EMT相关蛋白表达的影响。结果:CRT在鼻咽癌组织中的阳性表达率为82.69%(43/52),在鼻咽部良性病变组织的阳性表达率为19.29%(11/57),CRT在鼻咽癌组织中表达显著增高(P<0.05);CRT的阳性表达率与鼻咽癌分期及淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。敲降CRT呈低表达后,CNE2细胞由梭形演变为扁平和鹅卵石样,且细胞排列紧密,细胞的迁移侵袭能力减弱(P<0.05)。敲降CRT呈低表达后,E-cadherin表达显著增高,vimentin、TGF-β以及MMP-9蛋白的表达降低(P<0.05)。结论:Calreticulin在鼻咽癌组织中表达显著增高,且与鼻咽癌临床分期及淋巴结转移呈正相关。Calreticulin可诱导鼻咽癌CNE2细胞发生EMT,进而促进鼻咽癌的迁移和侵袭。

LMP1羧基端活化区3对鼻咽癌干细胞SP18迁移与侵袭的影响

为了观察潜伏性膜蛋白1(LMP1)羧基端活性区3(CTAR3)对鼻咽癌干细胞SP18迁移与侵袭的影响,本研究通过建立稳定表达LMP1及CTAR3突变型LMP1(LMP1△252-351)的SP18细胞系(即SP18-LMP1和SP18-LMP1△252-351),观察LMP1-CTAR3缺失突变后对SP18细胞增殖、迁移与侵袭的影响.采用基因芯片分析SP18-LMP1和SP18-LMP1△252-351间的差异表达基因,并验证基因的表达,用生物信息学分析差异表达基因间的相互关系.结果显示:a.SP-LMP1△252-351细胞生长速度较SP-LMP1细胞明显变缓,克隆形成和迁移与侵袭能力降低(n=3,P<0.05);b.鉴定出LMP1羧基端CTAR3影响SP18细胞迁移与侵袭的18个基因(其中表达上调基因13个,下调基因5个),经荧光定量PCR验证与基因芯片检测结果基本一致.c.13个差异基因间相互联系,网络节点联系最多的基因是FN1、MMP14、THBS1、ITGA2、IL1B和IL6基因.结果提示,LMP1羧基端CTAR3可能通过调节FN1、MMP14、THBS1、ITGA2、IL1B和IL6基因的表达,发挥其促鼻咽癌干细胞SP18细胞迁移与侵袭的功能.

PKCα-AnnexinA2-S100A10在胃癌组织中的表达及意义

目的:观察蛋白激酶Cα(protein kinase Cα,PKCα)、Annexin A2和S100A10蛋白在胃癌组织中的表达及意义,为获取胃癌诊断相关的蛋白分子提供实验依据.方法:Western blot分析PKCα、Annexin A2和S100A10蛋白在正常胃黏膜与胃癌组织中的表达情况;免疫组织化学染色观察组织芯片中三者的表达情况,并分析其临床病理学意义.结果:(1)Western blot检测结果显示,PKCα、Annexin A2和S100A10蛋白在胃癌组织中表达较正常胃黏膜组织中高(P<0.01);(2)免疫组织化学染色结果显示,PKCα蛋白在正常胃黏膜及胃癌组织中的阳性表达率分别为8.82%(3/34)和76.54%(62/81);Annexin A2蛋白在正常胃黏膜及胃癌组织中的阳性表达率分别为5.88%(2/34)和79.01%(64/81);S100A10蛋白在正常胃黏膜及胃癌组织中的阳性表达率分别为2.94%(1/34)、59.26%(48/81);(3)PKCα、Annexin A2和S100A10蛋白在胃癌组织中的阳性表达率较正常胃黏膜组织高(P<0.01).结论:PKCα、Annexin A2和S100A10蛋白在胃癌组织中表达较正常胃黏膜组织中表达高,其表达与胃癌的发生及分化程度有关.

LMP1-CTAR3调节CK19和vimentin蛋白在鼻咽上皮与鼻咽癌中的表达

目的观察LMP1-CTAR3调节的CK19和vimentin蛋白在鼻咽上皮和鼻咽癌中的表达,揭示蛋白质之间的相互作用规律。方法采用SP免疫组化染色检测LMP1、CTAR3、CK19和vimentin在30例鼻咽上皮组织和60例鼻咽低分化鳞状细胞癌中的表达。结果①LMP1在鼻咽上皮组织与鼻咽低分化鳞状细胞癌中的阳性表达率分别为73.3%和90%;②与LMP1(-)组织比较,CK19蛋白在LMP1(+)的鼻咽上皮组织与鼻咽低分化鳞状细胞癌中的表达降低(P<0.05);③与LMP1(-)组织比较,vimentin蛋白在LMP1(+)的鼻咽上皮组织与鼻咽低分化鳞状细胞癌的表达升高(P<0.05)。结论 LMP1-CTAR3在鼻咽上皮组织与鼻咽低分化鳞状细胞癌中下调CK19蛋白和上调vimentin蛋白的表达。

对实习医生写作主诉和现病史的调查研究

目的提高实习医生的写作主诉和现病史的能力。方法通过与实习医生亲切生动的讨论对答形式。结果使实习医生更易接受掌握医学知识，气氛更加融洽。结论本调查研究有助于高校与教学医院的沟通，培养出合格的毕业生。

胃粘膜非典型增生中微环境蛋白质的相互作用

微环境在胃癌发病过程中发挥重要作用。了解胃粘膜早期癌变的分子机制,对防治胃癌具有十分重要的意义。为了解胃粘膜非典型增生过程中,微环境中蛋白质的相互作用及调节机制,采用激光捕获显微切割(laser capture microdissection,LCM)技术,纯化正常胃粘膜组织(normal gastric mucosa tissue,NGM)和胃粘膜非典型增生(gastric mucosal atypical hyperplasia,GMAH)间质,通过同位素标记定量蛋白质组学技术分析,鉴定NGM和GMAH间质的差异表达蛋白质。利用生物信息学软件,分析NGM和GMAH间质差异表达蛋白质的相互作用及其联系。共鉴定出165个GMAH间质差异表达蛋白质,其中GMAH组织中表达上调者99个,下调者66个。它们涉及一些与肿瘤相关的信号通路,如p53信号通路、MAPK信号通路、细胞周期与凋亡等信号通路,且与细胞生长、增殖、凋亡和体液免疫应答等生物学过程有关。这些差异表达蛋白质,在STRING网络中呈现相互作用,两两间相互联系。本文的研究提示,胃粘膜非典型增生微环境中存在S100A6和SOD3等蛋白质间的相互作用,它们通过影响p53信号通路、MAPK信号通路、细胞周期与凋亡等信号通路,在胃癌发病过程中发挥作用。

硫化氢与生物脂代谢

硫化氢(H2S)作为人类发现的第三种气体信号分子已引起学术界的广泛关注。关于H2S的报道研究很多,大部分集中在H2S与心血管系统的体内平衡的相关研究。然而,有关于H2S与生物脂代谢的关系的研究尚不多见。本文将从H2S的理化性质开始,介绍H2S在机体中脂代谢的作用及其在机体脂代谢相关疾病中的作用。以H2S为基础的药物将为治疗这些疾病带来新的希望。

肠道菌群-FXR轴在代谢性疾病中的作用

肠道菌群是指在肠道定植的包括细菌、真菌、病毒、古细菌和原生动物在内的微生物群,其种类超过1 000种,数量接近人体自身细胞的10倍,编码基因数量超过人体自身基因100倍。肠道菌群按系统发育地位可分为厚壁菌门、拟杆菌门、变形菌门、放线菌门、疣微菌门和梭杆菌门。正常人类肠道菌群主要由厚壁菌门和拟杆菌门组成[1]。近年来科学界对肠道微生物群产生了浓厚的兴趣,肠道菌群与大量疾病如炎症性肠病、肠易激惹综合征、过敏性疾病和代谢性疾病有关。

感染依赖性抗原Tp0470的鉴定及在梅毒诊断中的应用

为筛选新型梅毒诊断抗原,以改进梅毒早期诊断及预后判断血清学诊断方法,本研究在鉴定Tp0470蛋白为感染依赖性抗原的基础上,建立基于Tp0470的ELISA方法,检测468份临床血清标本,并与TPPA、LZ-ELISA及RPR结果比较,初步评价该蛋白的诊断价值;同时对Tp0470-ELISAA450值与RPR滴度进行相关性分析。结果显示:Tp0470-ELISA的灵敏度和特异度分别为95.32%和95.66%,ROC分析其AUC值为0.907。与TPPA、LZ-ELISA及RPR结果相比,Tp0470-ELISA的符合率分别为95.51%(kappa=0.907)、94.87%(kappa=0.897)、88.67%(kappa=0.771)。Tp0470-ELISA的A450值与RPR滴度的相关系数为0.38,P=0.96。以上结果表明基于Tp0470蛋白的ELISA在梅毒血清学诊断中具有较高的潜在应用价值。

高级别脑胶质瘤综合治疗后生存分析

目的:分析高级别脑胶质瘤患者综合治疗的疗效及影响预后的因素。方法:对湖南省肿瘤医院从2008年7月至2016年5月期间经术后病理证实为高级别脑胶质瘤(WHO III^IV级),且具有完整回访资料的64例患者进行回顾性分析。结果:随访3~111(中位数29.5)个月,中位总生存时间(median overall survival time,MOST)为36.00(95%CI:22.85~49.16)个月,中位无进展生存时间(median progression-free survival time,MPFS)为21.00(95%CI:9.72~32.28)个月,1,2,3,5年生存率分别为87.50%,56.25%,40.63%,17.19%。Log-Rank单因素分析、Cox回归模型分析均提示与高级别脑胶质瘤患者预后相关的因素有病理级别、切除程度、同步放化疗(P<0.05)。结论:高级别脑胶质瘤患者综合治疗后的总体生存时间、无进展生存时间及5年生存率有所提高,而与患者预后相关的因素有肿瘤病理级别、切除程度、同步放化疗,说明接受肿瘤全切及同步放化疗的WHO III级的胶质瘤患者的临床效果较好。

结直肠手术快速康复的关键节点和主要措施

结直肠手术是普外科最常见的手术之一,按照手术分级通常属于三级或四级手术,常需全身麻醉,且手术范围较大、手术时间较长,对病人的创伤打击较大,导致术后恢复缓慢,住院时间延长。加速康复外科(enhanced recovery after surgery,ERAS)是21世纪外科学发展的三大新理念之一,为结直肠手术病人的快速康复提供了一种更为安全有效的治疗理念。

主动脉夹层发病机制研究的新进展

主动脉夹层是一种大血管疾病,其突出特点为起病急、进程快、死亡率高。主动脉夹层的发病机制十分复杂,包括免疫炎症、遗传因素、高血压、氧化应激等多个方面。该病的致死原因主要有主动脉夹层动脉瘤破裂至胸、腹腔或者心包腔,进行性纵隔、腹膜后出血以及导致急性心力衰竭或者肾衰竭。现就主动脉夹层多方面的发病机制进行简要综述。

西安市2007-2016年流行性腮腺炎流行病学分析及发病趋势预测

目的分析西安市2007—2016年流行性腮腺炎的流行病学特征,为预防控制腮腺炎提供科学依据。方法从中国疾病预防控制信息系统中导出2007—2016年西安市流行性腮腺炎报告病例,应用Excel 2016与SPSS22.0对数据进行描述性统计分析。结果西安市2007—2016年共报告病例数为41 945例,年平均发病率为56.96/10万。2007—2011年流行性腮腺炎发病率逐年递增,而2011—2016年发病率呈下降趋势,年平均发病率为130.43/10万。发病季节呈双峰特征,分别是4月至7月、11月至翌年1月。西安市15个区县均有发病,雁塔区、长安区、碑林区和莲湖区为高发区。发病以0~15岁为主,且5~10岁年龄组发病最高,共报告19 234例,占总报告病例数的45.86%,男女性别比为1.47∶1。职业以学生、幼托儿童和散居儿童为主,占总病例数的88.96%。时间序列模型预测适配为指数平滑法。结论西安市2016年流行性腮腺炎发病率高于2015年,开始出现上升趋势。要控制流行性腮腺炎,首先要保证重点人群较高的疫苗接种率,其次,应加强学校晨午检制度,进行监测预警,并做好疫情上报工作,防治疫情扩大化。

患者参与模式下提高病史采集效率

住院患者的病史采集花费临床医生大量的工作时间,如何在患者参与模式下提高临床医生的病史采集效率、节约时间值得探讨。同时探讨在该模式下解决医生因接诊时间不够而导致的患者信息采集不全及医生与说方言患者的沟通困难等问题,并确立"以病人为中心"的服务宗旨,达到改善医患关系目的。

BCRP与ki67在乳腺癌组织的表达及病理特征分析

目的研究乳腺癌耐药蛋白(BCRP)与细胞核相关抗原(ki67)在乳腺癌组织的表达及其与临床病理特征的关系.方法以2008年3月~2013年3月海南省妇幼保健院收治的乳腺癌患者60例为观察对象,分别采集所有患者乳腺癌组织与癌旁正常组织.以免疫组化法分别检测不同组织中BCRP与ki67的表达情况,并分析乳腺癌组织中BCRP、ki67表达情况与患者临床病理特征的关系.所有患者均进行为期5年的随访,将患者是否复发分为复发组与未复发组,比较两组BCRP与ki67表达情况.结果乳腺癌组织中BCRP、ki67阳性率分别为43.33%、75.00%,高于癌旁正常组织的16.67%、28.33%,差异均有统计学意义(P<0.05).TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期乳腺癌患者组织中BCRP阳性率高于TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期患者、有淋巴结转移乳腺癌患者组织中BCRP阳性率高于无淋巴结转移患者,差异均有统计学意义(P<0.05).TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期乳腺癌患者组织中ki67阳性率高于TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期患者、有淋巴结转移乳腺癌患者组织中ki67阳性率高于无淋巴结转移患者,差异有统计学意义(P<0.05).乳腺癌5年复发组患者BCRP、ki67阳性率分别为62.07%、93.10%,高于未复发组的25.81%、58.06%,差异均有统计学意义(P<0.05).结论乳腺癌患者BCRP与ki67均存在明显高表达,且两者均与乳腺癌临床分期、淋巴结转移密切相关,对BCRP与ki67表达进行检测有助于乳腺癌的早期诊断、病情判断及预后评估.

二烯丙基二硫对CD44^(+)人胃癌AGS细胞生长的影响

目的分析二烯丙基二硫(DADS)对CD44^(+)胃癌AGS细胞增殖与周期分布的作用,为DADS抑制胃癌作用机制研究提供进一步实验依据。方法经免疫磁珠技术富集人胃癌细胞株AGS中的CD44^(+)细胞,流式细胞术检测CD44^(+)细胞比率。肿瘤球形成、Transwell迁移及侵袭实验验证CD44^(+)细胞的干样特性。MTT、软琼脂集落形成及流式细胞术分析DADS对干样细胞的生长、细胞周期分布的作用。结果免疫磁珠术富集了99.9%CD44^(+)细胞。相较于未分选的AGS组,CD44^(+)AGS组细胞生长2周后成球状态良好,且表现出更强迁移、侵袭能力(P<0.05)。不同质量浓度DADS处理可明显抑制CD44^(+)细胞增殖,且其抑制作用呈质量浓度依赖性(P<0.05);30 mg/L和60 mg/L DADS可抑制CD44^(+)细胞集落形成能力(P<0.05),且可导致细胞周期呈现G_(2)/M期阻滞(P<0.05)。结论DADS可明显削弱CD44^(+)细胞的生长能力,与阻断细胞周期于G_(2)/M期有关。

shRNA沉默CBS基因的慢病毒载体构建及稳定转染PC12细胞系的建立

目的:硫化氢是一种重要的气体信号分子,作为一种神经调质在神经系统中起重要作用。胱硫醚-β-合成酶(CBS)是脑内硫化氢合成的主要酶。构建针对大鼠CBS基因的shRNA干扰载体,稳定转染PC12细胞,观察该载体对PC12细胞CBS基因的沉默效应。方法:构建三条针对大鼠CBS基因的shRNA,经前期实验筛序一条最有效靶点与载体GV248(h U6-MCS-Ubiquitin-EGFP-IRES-puromycin)连接,经转化及PCR阳性克隆筛选及测序鉴定。将LV-CBS-ShRNA慢病毒载体连同包装载体经脂质体2 000共转染到293T细胞,慢病毒包装后用荧光法进行滴度测定。将包装好的慢病毒转染到PC12细胞,用嘌呤霉素进行筛选,得到稳定转染LV-CBS ShRNA的PC12细胞。实时荧光定量PCR检测CBSmRNA的表达,Western-blot检测CBS蛋白的表达。结果:PCR扩增和测序结果证明,成功构建大鼠LV-CBS ShRNA慢病毒载体,经包装产生的慢病毒滴度为1×109TU/m L。与转染阴性对照慢病毒(LV-NC-ShRNA)的细胞比较,LV-CBS ShRNA慢病毒转染可使PC12的CBSmRNA和CBS蛋白表达分别下降51.2%和48%。成功构建CBS基因ShRNA干扰的PC12细胞株,为后续研究CBS在神经系统中的作用奠定基础。

非编码RNA在胃癌糖酵解中作用的研究进展

正常分化的细胞主要依靠线粒体的氧化磷酸化为细胞供能,而大多数肿瘤细胞则依赖有氧糖酵解。各种非编码RNA(ncRNA),如微小RNA(miRNA)、长链非编码RNA(lncRNA)和环状RNA(circRNA),已被证明在胃癌糖代谢中发挥潜在作用。本文总结了ncRNA在胃癌糖代谢中的作用及机制,以及在胃癌预后及治疗等方面的临床应用前景。