甲基莲心碱对长春新碱抗肿瘤作用的影响

【目的】观察甲基莲心碱 (Neferine ,Nef)在体外对长春新碱 (Vincristine,VCR)抗人胃癌细胞(SGC790 1)作用的影响以探讨其化疗增敏作用。【方法】MTT法检测药物的细胞毒性 ,PI染色流式细胞术检测细胞凋亡。【结果】2 .5、5、10 μmol/LNef对SGC790 1细胞无明显细胞毒性 ,但可使VCR对SGC790 1的IC50 从 0 .0 5 9μg/ml下降至 0 .0 36、0 .0 30、0 .0 14 μg/ml。流式细胞术显示SGC790 1细胞的自然凋亡率为3.1% ,10 μmol/LNef与SGC790 1细胞作用 2 4h后 ,细胞凋亡率为 3.2 % ,说明Nef并不显著诱导SGC790 1细胞凋亡。 0 .5、2、4 μg/mlVCR与SGC790 1细胞作用 2 4h后 ,细胞凋亡率分别为 5 .80 %、6 .5 9%、16 .4 % ,VCR可一定程度的诱导SGC790 1细胞凋亡 ;当与 10 μmol/LNef合用时 ,其凋亡率明显增加 ,分别为18.5 %、2 3.7%、35 .4 %。【结论】Nef能增强VCR的体外抗肿瘤作用 ,可能是一种化疗增敏剂。

胃癌中ER表达及病理临床意义

目的 研究雌激素受体 (ER)在胃癌中的表达 ,探讨其与组织学分类、Borrmann分型及转移的关系。方法 运用链酶菌亲生物素 -过氧化酶连结法检测 2 0例正常粘膜、2 0例不典型增生与 91例胃癌中ER表达。结果 ER表达阳性率 ,正常胃粘膜与不典型增生全部阴性 ,胃癌为 38% (35 /91) (P <0 .0 5 )。其中 ,高分化腺癌 10 % (3/30 )分别低于低分化腺癌 43% (13/30 )、未分化癌 5 3% (8/15 )、粘液癌 6 3% (5 /8)及印戒细胞癌 75 % (6 /8) ,皆具有显著性差异 (P<0 .0 5 ) ;Borrmann分类 ,Ⅲ +Ⅳ型 5 6 % (2 4/4 3)明显高于Ⅰ型 2 2 % (4 /18)和Ⅱ型 2 3% (7/30 ) (P <0 .0 5 ) ;淋巴结转移5 5 % (2 8/5 1)与未转移 2 3% (9/4 0 )的差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;而与性别、年龄无关。结论 ER表达阳性是胃癌生物学标志之一 ,且与其分化程度、Borrmann分类、浸润转移有关 ,提示ER阳性胃癌预后差 ,但可采取内分泌治疗。

重组人内皮抑素在大肠杆菌中表达及其生物学活性鉴定

目的 利用大肠杆菌原核表达系统表达重组人内皮抑素Endostatin ,并对其进行生物学活性鉴定。方法 采用RT PCR方法从人胚肝中钓取人内皮抑素cDNA ,将其克隆入pGEM TEasy克隆载体中 ;经全自动序列分析仪测序确证后 ,将人内皮抑素cDNA亚克隆入原核表达载体pWR450 1 ,构建含人内皮抑素cDNA的重组质粒 ;将该重组质粒转化入大肠杆菌TG1 中进行诱导表达 ,表达产物经SDS PAGE鉴定 ;表达产物初步纯化复性后以鸡胚尿囊膜血管生成抑制实验和小鼠伤口愈合实验对其进行生物学活性鉴定。结果 成功获得 549bp人endostastin基因 ,测序证实序列正确。经IPTG诱导的重组原核表达质粒表达出重组人内皮抑素的融合蛋白 ,此蛋白在SDS PAGE凝胶上显示出一条约 75KD的阳性条带。重组人内皮抑素融合蛋白的初纯物在体外能抑制鸡胚尿囊膜血管生成及延长小鼠伤口愈合时间。结论 人内皮抑素融合蛋白在大肠杆菌原核表达系统中高水平表达 ,并具有抗血管生成活性 。