多媒体显微实验教学互动系统实践管理初探

多媒体网络教学系统是一种专用电脑网络硬件平台，在材料分析、生物、医学等学科的教学中，广泛使用显微镜观测微观结构进行科学实验，引进了多媒体显微实验教学互动系统，此系统具有高度互动性，信息传输的多通道性，能提高学生的理解和综合能力，增强学生与教师在亚微结构水平上的广范交流，加强显微镜视野下的师生问对话。具有如此优良性能的系统，必须有规范化的管理、现代化的管理。

显微数码互动系统进行组织学实验教学的体会

结合教研室自身特点,引进显微数码互动系统结合原有的多媒体闭路电视进行组织学实验教学,能提高学生实验课的学习效率,降低教师的工作强度,促使教学水平和教学质量的提高。

硝普钠和L-硝基-精氨酸甲酯对大鼠生精功能的影响

目的 :观察硝普钠 (SNP)与L 硝基 精氨酸甲酯 (L NAME)对大鼠睾丸生精细胞DNA及倍体细胞群的影响 ,探讨一氧化氮 (NO)对睾丸生精功能的作用。 方法 :4 0只雄性SD大鼠均分为 4组 ,分别于腹腔内注射SNP、L NAME、SNP +L NAME与生理盐水 (NS) ,1次 /d ,共 12d。于最后 1次给药后 2h颈动脉放血处死动物。收集血清于- 70℃冻存 ,放射免疫法测定血清内睾酮含量 ;Greiss法测定血清NOx-(硝酸盐 /亚硝酸盐 )含量 ;流式细胞术(FCM)测定睾丸内各级生精细胞DNA含量 ,计算 1c、2c、4c期细胞的百分比。 结果 :SNP组血清内NOx-含量高于NS组 (P <0 .0 1) ,睾酮含量低于NS组 (P <0 .0 1) ,1c细胞减少 (P <0 .0 1) ;L NAME组血清内NOx-含量低于NS组(P <0 .0 1) ,睾酮含量高于NS组 (P <0 .0 1) ,1c细胞增加 (P <0 .0 1)。SNP和L NAME混合注射时 ,血清内NOx-、睾酮的含量及 1c细胞与NS组无显著性变化 (P >0 .0 5 )。 结论 :增加外源性NO可抑制精子的产生 ,而抑制NO生成途径则可促进精子的生成。

硝普钠和L-硝基-精氨酸甲酯对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响

目的 观察硝普钠 (SNP)和L 硝基 精氨酸甲酯 (L NAME)对大鼠睾丸生精细胞凋亡的影响。 方法雄性SD大鼠分为 4组 :分别于腹腔内注射SNP、L NAME、SNP +L NAME与生理盐水 ,每天 1次 ,共 12d。颈动脉放血处死动物。流式细胞术 (FCM)结合TUNEL法检测睾丸生精细胞的凋亡。 结果 FCM结合TUNEL法检测发现SNP组亚单倍体峰 (AP峰 )及凋亡指数 (AI)较生理盐水组明显增高 ,L NAME组AP峰及AI显著低于生理盐水组 (P<0 0 1)。SNP和L NAME混合注射时 ,AP峰及AI与生理盐水组无显著性差异 (P >0 0 5 )。 结论 SNP促进生精细胞的凋亡 ,L NAME抑制生精细胞的凋亡 ,其对生精细胞凋亡的调节可能是由一氧化氮 (NO)介导的。

N-硝基-L-精氨酸甲酯对大鼠实验性隐睾生精细胞凋亡及Bax表达的影响

目的研究N-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)对大鼠实验性隐睾生精细胞凋亡及凋亡相关基因Bax表达的影响。方法手术建立大鼠单侧隐睾模型,实验分为隐睾组、隐睾+L-NAME组[术后腹腔注射溶于生理盐水的L-NAME 50 mg/(kg.d)]、隐睾+生理盐水组、假手术组,7 d后采用化学比色法检测睾丸组织NOS活性,流式细胞术(FCM)和原位缺口末端标记法(TUNEL)检测生精细胞凋亡,RT-PCR和免疫组织化学法检测Bax基因表达变化。结果隐睾组和隐睾+生理盐水组之间检测指标无明显差异;隐睾+L-NAME组隐睾凋亡细胞百分比和生精细胞凋亡指数均低于隐睾组及隐睾+生理盐水组,高于假手术组(P<0.05);Bax mRNA和蛋白表达水平隐睾组及隐睾+生理盐水组最高,假手术组次之,隐睾+L-NAME组最低。结论隐睾生精细胞Bax表达增加,L-NAME可通过下调Bax的表达抑制隐睾生精细胞凋亡。

p-p38MAPK在SD大鼠隐睾中的表达

目的 :探讨丝裂原活化蛋白激酶 (p - p38MAPK)在隐睾所致生精障碍过程中的可能作用。方法 :SD雄性大鼠 4 0日龄时复制单侧隐睾模型 ,免疫组化SP法检测大鼠睾丸中p - p38MAPK的表达。结果 :术后第 7天 ,与正常侧睾丸相比 ,隐睾侧睾丸重量明显减少 ,生精小管内生精细胞排列紊乱 ,生精细胞与精子的数量减少 ,可见较多多核巨细胞 ;p - p38MAPK只见于隐睾侧睾丸内生精上皮及间质细胞 ,在正常侧睾丸内未见表达。结论 :隐睾可导致p38MAPK活化 ,而

硝普钠和N^ω-单硝基-L-精氨酸甲酯对去垂体大鼠生精能力的影响

目的:阐明NO对大鼠生精能力的影响及其作用机制。方法:大鼠去垂体,观察硝普钠(SNP)与N-ω单硝基L-精氨酸甲酯(L-NAME)对大鼠生精功能的直接作用。用放射免疫法测定血清内卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)及睾酮含量;Greiss法测定血清NO-x含量;流式细胞术测定各生精细胞DNA含量,计算1c、2c及4c期细胞的百分比。结果:各组血清LH、FSH和睾酮浓度显著下降或逐渐下降。SNP组血清内NO-x含量显著升高,L-NAME组血清内NO-x含量显著降低;对照组、L-NAME组和SNP+LNAME混合注射组的细胞分布均以1c为主;而SNP组的细胞以2c为主。结论:体内高浓度的糖皮质激素可屏蔽LH和FSH的分泌,进一步抑制睾酮的分泌;SNP与LNAME可通过NO直接影响生精细胞的凋亡。

大鼠睾丸内一氧化氮合酶的表达

目的 :阐明一氧化氮合酶 (NOS)在睾丸内的表达 ,探讨一氧化氮 (NO)在睾丸生殖功能中的作用。 方法 :取雄性SD大鼠睾丸于 4 %多聚甲醛中固定 ,常规石蜡切片。用免疫组化ABC法检测成年大鼠睾丸NOS的表达和定位。 结果 :内皮型NOS(eNOS)、神经型NOS(nNOS)、诱导型NOS(iNOS)在睾丸间质细胞内均有表达 ,精曲小管周围肌样细胞、血管内皮细胞和平滑肌细胞内仅为eNOS免疫反应阳性 ,而血管外膜纤维内仅有nNOS表达。免疫反应物质主要定位于细胞质 ,胞核为阴性。在生精细胞内 3种NOS免疫反应均为阴性。 结论 :3种NOS在睾丸内均有表达 。

隐睾下降固定术后生殖细胞的凋亡及eNOS和iNOS的表达

目的:探讨隐睾下降固定术后生精细胞的凋亡及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)在隐睾下降固定后生精细胞中的表达。方法:将雄性SD大鼠(22日龄)随机分为隐睾组和假手术组,建立右侧隐睾模型。术后12天将隐睾组大鼠随机分为隐睾对照组和隐睾固定组,建立隐睾下降固定模型。术后第24天脱颈椎处死大鼠,取血清测定NO含量及一氧化氮合酶(NOS)活性,常规组织学切片观察各组大鼠右侧睾丸生精上皮形态,原位末端标记法(TUNEL)结合流式细胞术(FCM)检测各组睾丸生精细胞凋亡情况,Western blot和免疫组化分别检测各组大鼠右侧睾丸组织eNOS、iNOS蛋白表达的变化。结果:隐睾对照组血清中NO浓度、NOS活性以及生精细胞凋亡率最高,隐睾固定组则高于假手术组。Western blot检测发现隐睾固定组中eNOS和iNOS含量均高于假手术组,免疫组化结果显示在假手术组睾丸生精上皮中仅有eNOS和iNOS的弱表达,而隐睾固定组生精上皮中两者均有较强表达。结论:隐睾下降固定术后睾丸生精功能的改善与生精细胞凋亡减少有关。NO是隐睾下降及固定后生精细胞仍过度凋亡的重要生物活性因子。

SB203580对大鼠隐睾生精细胞凋亡的影响

目的:探讨SB203580对大鼠隐睾所致生精细胞凋亡过程中的作用。方法:雄性SD大鼠随机分为隐睾组、隐睾+SB203580(p38MAPK抑制剂)组、隐睾+溶媒组、假手术组。复制单侧隐睾模型,术后分别腹腔内注射溶媒或SB203580。7 d后快速断颈椎处死,TUNEL原位末端标记法结合流式细胞术(FCM)检测各组右侧睾丸生精细胞凋亡,免疫组化观察各组右侧睾丸磷酸化p38MAPK蛋白表达的变化。结果:FCM及TUNEL法均显示隐睾+ SB203580组生精细胞凋亡指数低于隐睾组和隐睾+溶媒组,同时磷酸化p38MAPK蛋白表达减少。结论:SB203580能降低p-p38MAPK蛋白表达并抑制热压诱导的生精细胞凋亡。

尸体解剖在病理实验教学改革中的应用

病理学是连接基础医学和临床医学的一门桥梁学科。为改革病理实验教学，加强基础与临床病理教学联系，我们利用尸体解剖同步转播系统，开展尸体解剖实验项目，提高教学资源的使用效率，增强形态学各学科间的系统性和连贯性，实现病理实验教学的互动化、扩展病理实验教学的深度和广度，使病理实验教学水平更上一个台阶。

枯草溶菌素转换酶9在大鼠心肌缺血再灌注损伤中的表达变化

目的:研究枯草溶菌素转换酶9(proproteinconvertase subtilisin/kexin type 9,PCSK9)在大鼠心肌缺血再灌注损伤中的表达变化。方法:采用大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,大鼠分4组:对照组(n=5)、实验组分别为缺血45 min再灌注6 h、12 h及24 h组(各组n=5)。实验终点时,收集血液及缺血区心肌组织,全自动生化分析仪测定心肌酶谱(CK、CK-MB和LDH),HE染色观察心肌组织病理学改变,分别采用实时定量PCR及Western blot方法检测心肌PCSK9 mRNA及蛋白水平表达的改变。结果:与对照组相比,实验组CK、CK-MB和LDH在6 h和12 h组均明显升高有统计学意义,24 h组恢复正常;HE染色发现心肌组织病理损伤随着再灌注时间延长而加重;实验各组心肌PCSK9 mRNA及蛋白水平表达均显著高于对照组,并且随着再灌注时间的延长表达水平逐渐增高。结论:PCSK9可能参与心肌缺血再灌注损伤的病理生理过程。

NARC-1蛋白在新西兰兔动脉粥样硬化病变中的表达

目的探讨NARC-1在新西兰兔动脉粥样硬化病变血管壁中的表达。方法健康纯种雄性新西兰白兔16只,适应性喂养1周后,随机分为对照组和高胆固醇组,每组8只;对照组给予普通颗粒饲料喂养,高胆固醇组给予高胆固醇饲料(2%胆固醇)喂养;两组动物于8周末安乐处死。全自动生化分析仪测定兔血浆中甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇含量,计算动脉粥样硬化指数、高密度脂蛋白胆固醇/低密度脂蛋白胆固醇比值。苏丹Ⅳ染色测量兔主动脉粥样硬化病变面积。油红O染色及HE染色观察兔主动脉病理组织学改变,并进行病理形态学定量分析。免疫组织化学法与免疫印迹法检测兔主动脉组织NARC-1蛋白的分布及表达水平。结果8周末,高胆固醇组兔血浆总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和、动脉粥样硬化指数水平明显升高,而高密度脂蛋白胆固醇/低密度脂蛋白胆固醇比值明显降低。高胆固醇组出现了明显的动脉粥样硬化病变,主动脉内膜面粥样硬化病变面积为27.41%±2.12%,与对照组(0.51%±0.20%)相比差异显著(P<0.05)。病理组织学显示高胆固醇组兔主动脉内膜明显增厚,内膜/中膜厚度比明显增大;油红O染色光镜下显示,高胆固醇组兔主动脉内皮下斑块内泡沫细胞呈橘红色,对照组主动脉内膜未见明显着色;HE染色光镜下显示,高胆固醇组主动脉内膜显著增生,形成明显斑块,斑块中纤维组织增生,可见大量泡沫细胞,胞核较小,胞浆内含有大量脂质空泡,对照组内膜薄且结构完整。免疫组织化学检测发现高胆固醇组兔主动脉NARC-1蛋白表达明显,染色呈强阳性,且群集于内膜斑块处;在高倍镜下,NARC-1蛋白主要分布在泡沫细胞的胞浆和胞膜,而在对照组兔血管壁组织中未见表达。免疫印迹检测发现高胆固醇组兔主动脉NARC-1蛋白呈高表达,而对照组兔血管壁组织未见表达。结论新西兰兔的主动脉粥样硬化病变处NARC-1蛋白表达明显,其主要分布在泡沫细胞的胞浆和胞膜中,正常对照组兔主动脉血管壁组织未检测到NARC-1蛋白。提示NARC-1/PCSK9是影响动脉粥样硬化病变形成与发展的重要因素。

大鼠实验性隐睾复位固定术后雌激素受体α表达的变化

目的：研究实验性大鼠隐睾复位固定术对生精细胞凋亡及雌激素受体α（ERn）表达的影响。方法：建立大鼠左侧隐睾模型，模型建立7d后实施左侧隐睾复位固定术，采用TUNEL法检测睾丸生精细胞凋亡，免疫组织化学和RT-PCR检测各组睾丸ERα表达的变化。结果：隐睾内生精细胞凋亡增加，ERa表达降低；复位固定术能降低生精细胞凋亡，增强睾丸内ERα表达。复位固定术后24d生精细胞凋亡指数明显低于复位固定术前的隐睾组；复位固定术后48d生精上皮组织结构已基本恢复，其凋亡指数及ERα表达与假手术组比较，差异无统计学意义。结论：ERα与隐睾内生精细胞凋亡密切相关，隐睾复位固定术能通过恢复睾丸内ERα的表达，抑制生精细胞凋亡。

引进数码系统,改革教学方法,提高病理学实验教学质量

在病理学实验教学中,采用多媒体课件、多媒体数码互动系统、尸体解剖同步转播系统、病理切片及大体标本观察等手段,应用立体式、多层次教学方法提高教学资源的使用效率,增强形态学的系统性和连贯性,实现病理学的互动化,扩展病理学实验的深度和广度,提高实验教学质量,以及学生的动手能力和全面地、连续地、动态地分析解决问题的能力将得到加强。

奥曲肽联合透明质酸钠预防兔术后腹膜粘连的疗效评价

目的观察奥曲肽联合透明质酸钠预防兔术后腹膜粘连的效果。方法建立兔术后腹膜粘连模型,然后分为4组(1)术中不用药物处理设为模型对照组;(2)关腹前局部涂抹透明质酸钠设为透明质酸钠组;(3)关腹前腹腔内注射奥曲肽设为奥曲肽组;(4)关腹前局部涂抹透明质酸钠同时腹腔内注射奥曲肽设为联合组。术后14d剖腹观察,判定腹膜粘连程度等级。结果4组粘连发生率比较无统计学意义(χ2=3.51,P>0.05);联合组重度粘连发生率(8.3%)显著低于其它3组(分别为66.7%,33.3%,25.0%)(均P<0.01)。奥曲肽组和透明质酸钠组两组的粘连级别近似(P>0.05)。结论奥曲肽和透明质酸钠均可减轻实验性腹膜粘连的程度和重度腹膜粘连发生率,两者合用其作用更明显,表明两药合用具有降低粘连的协同作用。

RORα miRNA真核表达载体构建及对人胃癌细胞增殖的影响

目的构建RORα(Retinoid acid receptor related orphan receptorα,维甲酸相关孤核受体α)miRNA真核表达载体,分析其对人胃癌MGC803细胞RORα蛋白表达及细胞增殖的影响。方法构建针对设计RORαmiRNA表达的3对miRNA干扰序列,克隆入pcDNATM6.2-GW/EmGFP miRNA真核表达载体,在测序鉴定无误后将含RORαmiRNA转染人胃癌MGC803细胞,用Western blo检测MGC803细胞转染前后RORα蛋白的表达水平变化。MTT法检测对转染MGC803细胞增殖的影响。结果 Western blot结果证实,MGC803细胞转染RORαmiRNA后24h RORα蛋白表达水平明显低于转染阴性组(P<0.05)。MTT结果显示,转染RORαmiRNA后细胞增殖率(光吸收值)高于转染阴性组(P<0.05)。结论 miRNA靶向抑制RORα表达后,可促进人胃癌MGC803细胞增殖,提示RORα是一个潜在的胃癌基因及药物治疗的靶点。

一氧化氮合酶在大鼠附睾内的表达及其可能的作用

目的 为了阐明一氧化氮合酶 (NOS)在附睾内的表达 ,同时探讨NO在男性生殖功能中的作用。方法 本研究采用正常大鼠附睾组织 ,用免疫组织化学ABC法研究两种NOS(iNOS、eNOS)的表达。结果 在附睾上皮细胞内eNOS及iNOS均为免疫反应阳性 ,其中eNOS表达强 ,iNOS表达较强 ,血管内皮及平滑肌细胞内仅为eNOS免疫反应阳性 ,附睾间质中仅iNOS为免疫反应阳性。结论 两种NOS在附睾内均有不同程度的表达 ,各有特定的分布区域 。

热应激对大鼠睾丸Bcl-2和Bax表达的影响

目的研究热应激对大鼠睾丸B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)和Bcl-2相关X(Bcl-2 associated X,Bax)表达的影响。方法42天龄24只雄性SD大鼠建立单侧隐睾作为热应激处理的模型,随机选取16只大鼠建立左侧隐睾作为热应激处理的模型,其余8只将左侧睾丸还纳入阴囊后关腹作为假手术组。术后第3天和第7天分别采用RT-PCR和免疫组织化学SABC方法检测热应激处理后睾丸Bcl-2、Baxm RNA和蛋白表达的变化。结果与假手术组睾丸相比,热应激后第7天睾丸生精上皮和睾丸间质细胞内Bax mRNA和蛋白表达增高,而Bcl-2 mRNA蛋白在热应激后第3天表达明显降低,差异有显著性(P<0.05)。结论热应激能导致睾丸内Bax表达增高,Bcl-2表达降低,从而促进生精细胞凋亡增加。