氯化三丁基锡对小鼠肢芽细胞遗传毒性的实验研究

目的了解环境污染物氯化三丁基锡(TBTCl)对小鼠胚胎肢芽细胞的遗传毒性。方法将孕12 d昆明种小鼠颈椎脱臼处死,分离胚胎,切取肢牙,剪碎,0.125%胰酶消化,用无血清的Ham’s F12基础培养基将其制成单细胞悬液。加入不同浓度的TBTCl,使其终浓度分别为:0、0.1、0.2、0.4、0.8 mg/L。37.5℃恒温孵育2 h,取细胞悬液做彗星实验。结果TBTCl染毒组随染毒剂量的浓度的增高,肢芽细胞彗星拖尾率和尾长分别从对照组的4.0%和(9.7±4.3)μm上升到0.8 mg/L TBTCl组的61.7%和(26.9±12.5)μm,呈明显的剂量-反应(效应)关系。结论TBTCl能损伤昆明种小鼠胚胎肢芽细胞DNA,具有遗传毒性。

氯化三丁基锡对斑马鱼胚胎发育的影响

目的观察氯化三丁基锡(Tributyltin chloride,TBTCl)对斑马鱼胚胎发育和幼鱼死亡的影响。方法成年健康斑马鱼雌雄按1∶1的比例交配产卵,分别用不同质量浓度的TBTCl对受精后4 h(Four-hour post-fertilization,4 hpf)斑马鱼进行染毒实验,统计斑马鱼胚胎受精后48 h的心率,72 h的孵出率,24、48、72、96、120 h的死亡率和畸形率。结果与对照组相比较,随着TBTCl染毒质量浓度的增加,斑马鱼胚胎的孵化率降低、心跳减缓、畸形率和死亡率增加。当TBTCl达到80μg/L时,斑马鱼的48 hpf的心率由对照组的(182.5±3.6)次/min下降到(130.3±3.2)次/min,72 hpf的孵出率由对照组的97.46%下降到23.08%,并且120 hpf的死亡率为65.00%、畸形率为69.17%。结论TBTCl能影响斑马鱼胚胎发育,导致斑马鱼胚胎和幼鱼的畸形与死亡。

氯化三丁基锡致巨噬细胞凋亡作用

目的探讨氯化三丁基锡(tributyltin chloride,TBTCl)致巨噬细胞株RAW264.7细胞的凋亡作用。方法当RAW264.7细胞处于代数生长期时,分别加入不同浓度(0.0,0.025,0.05,0.10,0.20,0.40mg/L)的TBTCl处理48h,分别用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性,观察TBTCl对RAW264.7细胞增殖影响;吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色法观察凋亡细胞的形态,流式细胞仪检测TBTCl对RAW264.7细胞的凋亡率。结果TBTCl能抑制RAW264.7细胞的增殖,其半数抑制浓度(IC50)=0.179mg/L;TBTCl也能诱导细胞的凋亡,当TBTC1达到0.40mg/L时,细胞凋亡率达到19.5%。结论TBTC1可诱导细胞凋亡。

PFOS对斑马鱼胚胎发育及SOD、MDA和GSH含量的影响

目的观察全氟辛烷磺酸盐(perfluorooctane sulphonate,PFOS)对斑马鱼胚胎发育的影响及其可能的毒作用机制。方法成年健康斑马鱼雌雄按1:1的比例交配产卵,分别用不同浓度的PFOS(0.1,0.5,1.0,2.0和5.0 mg/L),对受精后4 h(four-hour post-fertilization,4hpf)斑马鱼胚胎进行染毒,统计斑马鱼胚胎受精后48 h的心跳、72 h的孵出率、24h、48 h、72 h、96 h、120 h的死亡率和畸形率,检测120 hpf斑马鱼幼鱼的MDA、SOD和GSH的含量。结果与对照组相比较,随着PFOS染毒浓度的增加,斑马鱼胚胎的孵化率降低、心跳减缓、畸形率和死亡率增加,120 hpf幼鱼组织SOD和GSH含量下降,MDA含量增加。当PFOS达到5.0 mg/L时,斑马鱼的48 hpf的心率由对照组的(180.5±4.6)次/min下降到(109.3±5.2)次/min、72 hpf的孵出率由对照组的98.31%下降到21.53%,并且120 hpf的死亡率为60.8%、120 hpf的畸形率为59.17%。120 hpf幼鱼组织SOD和GSH的含量分别由对照组的(12.5±2.13)U/g protein、(7.32±0.79)nmol/mg protein下降到(8.21±2.18)U/g protein和(4.53±0.85)nmol/mg protein,而MDA的含量由对照组的(0.61±0.12)nmol/mg protein上升到(1.82±0.16)nmol/mg protein。结论 PFOS导致斑马鱼胚胎体内的氧化应激可能是其发育毒性的机制之一。