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题名日本血吸虫Sj16基因重组杆状病毒的构建和鉴定
被引量:3
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作者
胡少敏
王海
阮志燕
余新炳
吴忠道
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机构
中山大学基础医学院寄生虫学教研室
南华大学生命科学与技术学院生物技术实验中心
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出处
《热带医学杂志》
CAS
2005年第1期8-11,60,共5页
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基金
国家自然科学基金资助项目(No.30271165)
广东省自然科学基金资助项目(No.031727)。
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文摘
目的利用杆状病毒-昆虫细胞系统构建日本血吸虫(Schistosomajaponicum,Sj)Sj16基因重组杆状病毒。方法从日本血吸虫尾蚴提取总RNA,通过RT-PCR扩增出Sj16基因全编码区序列,将其克隆到载体pET30a(+)中,通过PCR将Sj16基因连同pET30a(+)多克隆位点下游的6×His·Tag一起扩增出来,插入donor载体pFastBacHTa中,构建重组杆状病毒donor载体pFastBacHTa-Sj16-His,转化大肠杆菌DH10Bac-GFP进行转座,提取重组Bacmid,用Lipofectin法转染昆虫细胞Sf9使其包装成有感染性的重组杆状病毒。结果构建了含日本血吸虫Sj16基因的重组Bacmid-GFP-Sj16-His,转染Sf9细胞后,获得了有感染力的重组杆状病毒。结论成功构建了日本血吸虫Sj16基因重组杆状病毒,为下一步重组Sj16蛋白表达和Sj16基因功能研究打下了基础。
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关键词
日本血吸虫
Sj16
杆状病毒
Bac—to-Bac杆状病毒表达载体系统
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Keywords
Schistosoma japonicum
Sj16
baculovirus
Bac to Bac Baculovirus Expression Vector System
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分类号
R383.24
[医药卫生—医学寄生虫学]
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