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弓形虫微线体蛋白1部分基因原核表达重组质粒pWR450-1-MIC1的构建、鉴定及测序
被引量:
1
1
作者
杨慧龄
肖建华
+2 位作者
梁瑜
张愉快
刘传爱
《南华大学学报(医学版)》
2002年第2期111-114,共4页
目的 构建弓形虫ZS2分离株pWR45 0 - 1 -MIC1原核表达重组质粒 ,为进一步表达及免疫做准备。方法 用PCGENE软件分析MIC1基因可能的TB抗原表位 ,自行设计引物 ,用聚合酶链反应(PCR)技术从弓形虫ZS2分离株的基因组DNA中扩增编码微线体蛋...
目的 构建弓形虫ZS2分离株pWR45 0 - 1 -MIC1原核表达重组质粒 ,为进一步表达及免疫做准备。方法 用PCGENE软件分析MIC1基因可能的TB抗原表位 ,自行设计引物 ,用聚合酶链反应(PCR)技术从弓形虫ZS2分离株的基因组DNA中扩增编码微线体蛋白 1 (MIC1 )的基因片段 ,经酶切、连接、重组入pWR45 0 - 1原核表达载体 ,再经含氨苄培养基筛选、酶切、PCR鉴定和测序。结果 从ZS2分离株基因组DNA中扩增出特异的MIC1基因片段 ,克隆成功pWR45 0 - 1 -MIC1重组质粒。测序表明MIC1这部分基因与RH株相应碱基序列完全一致 ,高度保守。为下一步表达及免疫奠定基础。
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关键词
弓形虫
微线体蛋白1
部分基因原核表达
重组质粒
pWR450-1-MIC1
构建
鉴定
测序
克隆
下载PDF
职称材料
弓形虫微线体蛋白1部分基因的克隆、测序及表达
被引量:
6
2
作者
杨慧龄
肖建华
+2 位作者
梁瑜
张愉快
刘传爱
《中华预防医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第1期29-32,共4页
目的 构建弓形虫ZS2株pWR450 1 微线体蛋白 1 (MIC1 )原核表达重组质粒 ,对MIC1基因进行序列测定 ,并在不同大肠杆菌中表达。方法 用PCR技术从弓形虫ZS2株的基因组DNA中扩增编码MIC1的基因片段 ,酶切 ,连接 ,重组入pWR450 1表达载...
目的 构建弓形虫ZS2株pWR450 1 微线体蛋白 1 (MIC1 )原核表达重组质粒 ,对MIC1基因进行序列测定 ,并在不同大肠杆菌中表达。方法 用PCR技术从弓形虫ZS2株的基因组DNA中扩增编码MIC1的基因片段 ,酶切 ,连接 ,重组入pWR450 1表达载体 ,再经含氨苄培养基筛选、酶切、PCR鉴定 ,进行序列测序后转化大肠杆菌TG 1、JM1 0 9(DE3)和DH5α。在不同菌体浓度及不同剂量异丙基 β D 硫代半乳糖诱导下 ,用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定MIC1融合蛋白的表达。 结果 从ZS2株基因组DNA中扩增出特异的MIC1基因片段 ,克隆后获得pWR450 1 /MIC1重组质粒 ,测序结果表明 ,MIC1这部分基因与弓形虫RH株相应基因序列完全一致 ,高度保守。该基因可在不同大肠杆菌中表达相对分子质量约 70 0 0 0的融合蛋白。结论 构建了弓形虫ZS2株pWR450 1 MIC1重组质粒 。
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关键词
弓形虫属
克隆
微线体蛋白1
MIC1
基因
测序
表达
原文传递
弓形虫GRA8基因真核表达重组质粒的构建、鉴定及测序
被引量:
4
3
作者
杨慧龄
肖建华
+3 位作者
刘彦
杨秋林
张愉快
刘传爱
《中华传染病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第5期324-326,共3页
目的 构建弓形虫RH株 pcDNA3 .1( + ) GRA8真核表达重组质粒 ,为进一步DNA免疫做准备。方法 用聚合酶链反应 (PCR)从弓形虫RH株的基因组DNA中扩增编码致密颗粒蛋白(GRA8)的基因片段 ,纯化后重组入 pUC 19克隆载体 ,再经含IPTG ,XGal...
目的 构建弓形虫RH株 pcDNA3 .1( + ) GRA8真核表达重组质粒 ,为进一步DNA免疫做准备。方法 用聚合酶链反应 (PCR)从弓形虫RH株的基因组DNA中扩增编码致密颗粒蛋白(GRA8)的基因片段 ,纯化后重组入 pUC 19克隆载体 ,再经含IPTG ,XGal氨苄培养基蓝白筛选 ,挑选白色克隆酶切 ,低溶点琼脂糖纯化 ,回收目的基因亚克隆入pcDNA3 .1( + ) ,经氨苄培养基过夜培养挑选 6个克隆提纯酶切 ,PCR鉴定和测序。结果 从RH株基因组DNA中扩增出特异的GRA 8基因片段 ,克隆成功pcDNA3 .1( + ) GRA 8重组质粒。测序表明GRA8这部分基因与GENEBANK相应基因序列完全一致。
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关键词
弓形虫
GRA8基因
真核表达重组质粒
构建
鉴定
测序
原文传递
题名
弓形虫微线体蛋白1部分基因原核表达重组质粒pWR450-1-MIC1的构建、鉴定及测序
被引量:
1
1
作者
杨慧龄
肖建华
梁瑜
张愉快
刘传爱
机构
南华大学病原学研究中心
出处
《南华大学学报(医学版)》
2002年第2期111-114,共4页
文摘
目的 构建弓形虫ZS2分离株pWR45 0 - 1 -MIC1原核表达重组质粒 ,为进一步表达及免疫做准备。方法 用PCGENE软件分析MIC1基因可能的TB抗原表位 ,自行设计引物 ,用聚合酶链反应(PCR)技术从弓形虫ZS2分离株的基因组DNA中扩增编码微线体蛋白 1 (MIC1 )的基因片段 ,经酶切、连接、重组入pWR45 0 - 1原核表达载体 ,再经含氨苄培养基筛选、酶切、PCR鉴定和测序。结果 从ZS2分离株基因组DNA中扩增出特异的MIC1基因片段 ,克隆成功pWR45 0 - 1 -MIC1重组质粒。测序表明MIC1这部分基因与RH株相应碱基序列完全一致 ,高度保守。为下一步表达及免疫奠定基础。
关键词
弓形虫
微线体蛋白1
部分基因原核表达
重组质粒
pWR450-1-MIC1
构建
鉴定
测序
克隆
Keywords
toxoplasma gondii
microneme 1(MIC1)protein
cloning
pWR450-1 recombinant plasmid
分类号
R382.5 [医药卫生—医学寄生虫学]
Q782 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
弓形虫微线体蛋白1部分基因的克隆、测序及表达
被引量:
6
2
作者
杨慧龄
肖建华
梁瑜
张愉快
刘传爱
机构
南华大学病原学研究中心
出处
《中华预防医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第1期29-32,共4页
基金
湖南省教育厅资助 ( 0 0 1C188)
文摘
目的 构建弓形虫ZS2株pWR450 1 微线体蛋白 1 (MIC1 )原核表达重组质粒 ,对MIC1基因进行序列测定 ,并在不同大肠杆菌中表达。方法 用PCR技术从弓形虫ZS2株的基因组DNA中扩增编码MIC1的基因片段 ,酶切 ,连接 ,重组入pWR450 1表达载体 ,再经含氨苄培养基筛选、酶切、PCR鉴定 ,进行序列测序后转化大肠杆菌TG 1、JM1 0 9(DE3)和DH5α。在不同菌体浓度及不同剂量异丙基 β D 硫代半乳糖诱导下 ,用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定MIC1融合蛋白的表达。 结果 从ZS2株基因组DNA中扩增出特异的MIC1基因片段 ,克隆后获得pWR450 1 /MIC1重组质粒 ,测序结果表明 ,MIC1这部分基因与弓形虫RH株相应基因序列完全一致 ,高度保守。该基因可在不同大肠杆菌中表达相对分子质量约 70 0 0 0的融合蛋白。结论 构建了弓形虫ZS2株pWR450 1 MIC1重组质粒 。
关键词
弓形虫属
克隆
微线体蛋白1
MIC1
基因
测序
表达
Keywords
Toxoplasma
Cell adhesion molecules
Cloning, molecular
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
原文传递
题名
弓形虫GRA8基因真核表达重组质粒的构建、鉴定及测序
被引量:
4
3
作者
杨慧龄
肖建华
刘彦
杨秋林
张愉快
刘传爱
机构
南华大学病原学研究中心
出处
《中华传染病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第5期324-326,共3页
基金
湖南省教育厅资助项目 ( 0 1C1 88)
文摘
目的 构建弓形虫RH株 pcDNA3 .1( + ) GRA8真核表达重组质粒 ,为进一步DNA免疫做准备。方法 用聚合酶链反应 (PCR)从弓形虫RH株的基因组DNA中扩增编码致密颗粒蛋白(GRA8)的基因片段 ,纯化后重组入 pUC 19克隆载体 ,再经含IPTG ,XGal氨苄培养基蓝白筛选 ,挑选白色克隆酶切 ,低溶点琼脂糖纯化 ,回收目的基因亚克隆入pcDNA3 .1( + ) ,经氨苄培养基过夜培养挑选 6个克隆提纯酶切 ,PCR鉴定和测序。结果 从RH株基因组DNA中扩增出特异的GRA 8基因片段 ,克隆成功pcDNA3 .1( + ) GRA 8重组质粒。测序表明GRA8这部分基因与GENEBANK相应基因序列完全一致。
关键词
弓形虫
GRA8基因
真核表达重组质粒
构建
鉴定
测序
Keywords
Toxoplasma
Protozoan proteins
Cloning, molecular
Plasmids
Sequence analy sis
Gene expression
Recombination, genetic
分类号
R346 [医药卫生—基础医学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
弓形虫微线体蛋白1部分基因原核表达重组质粒pWR450-1-MIC1的构建、鉴定及测序
杨慧龄
肖建华
梁瑜
张愉快
刘传爱
《南华大学学报(医学版)》
2002
1
下载PDF
职称材料
2
弓形虫微线体蛋白1部分基因的克隆、测序及表达
杨慧龄
肖建华
梁瑜
张愉快
刘传爱
《中华预防医学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003
6
原文传递
3
弓形虫GRA8基因真核表达重组质粒的构建、鉴定及测序
杨慧龄
肖建华
刘彦
杨秋林
张愉快
刘传爱
《中华传染病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2003
4
原文传递
已选择
0
条
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引证文献
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