血管形成抑制剂Canstatin在鼻咽癌中表达鉴定及基因克隆

目的检测Canstatin基因在鼻咽癌发病过程中的表达变化及克隆其编码序列。方法利用半定量RT-PCR方法检测Canstatin在鼻咽癌组织、鼻咽癌细胞和正常鼻咽组织中的表达,比较它们之间的表达差异。设计含酶切位点的PCR引物,利用RT-PCR方法从相对正常鼻咽组织中获取Can-statin蛋白编码序列,T/A克隆入pMD18载体中。利用PCR和酶切鉴定获得阳性重组子。重组子最后经测序证实。结果与相对正常鼻咽组织相比,Canstatin在鼻咽癌组织和细胞中表达下调或缺失。RT-PCR法成功获得Canstatin基因编码区全长cDNA序列。重组克隆质粒插入片段经DNA测序后与Gen-Bank中Canstatin基因相应序列比较,100%同源。结论Canstatin在鼻咽癌组织和细胞中表达下调或缺失。采用T/A技术成功克隆鼻咽组织中Canstatin基因,为Canstatin亚克隆入真核表达载体pEGFP-N1,探索其在鼻咽癌生长和转移中的作用奠定了基础。

原发性高血压患者年龄与血浆甲状腺激素水平的相关性

目的:探讨原发性高血压患者甲状腺激素水平的变化以及其与年龄的相关性。方法:205例高血压患者在空腹状态下抽取血样本,采用放射免疫测定法检测其血浆甲状腺激素水平,采用t检验、单因素方差分析、相关和逐步多元线性回归法对数据进行分析。结果:老年人和非老年人两组中,三碘甲状腺原氨酸(triiodothyronine,T3)、促甲状腺激素(thyroid-stimulatinghormone,TSH)差异有显著性意义(P=0.007,0.037)。Pearson相关分析显示年龄与T3存在显著负相关(r=-0.182,P=0.009),年龄与TSH之间存在显著性正相关(r=0.146,P=0.037)。均衡性别、收缩压、舒张压、脉压后,T3与年龄显著负相关(r=-0.1887,P=0.007),TSH与年龄显著正相关(r=0.1435,P=0.042)。在多元线性逐步回归中,甲状腺素(thyroxine,T4)和年龄均进入T3的回归方程,而仅年龄进入TSH的回归方程。结论:在原发性高血压患者中,甲状腺激素(T3,TSH)水平与年龄密切相关,年龄是其独立影响因素。

人类醛糖还原酶类似蛋白1 siRNA慢病毒载体的构建及功能鉴定

目的构建人类醛糖还原酶类似蛋白1(ARL-1)siRNA慢病毒载体。方法设计针对于ARL-1 Mrna的siRNA,将siRNA连接于pENTRTM/U6载体,经测序确认后,通过免疫印迹和ARL-1酶活性鉴定验证ARL-1 siRNA慢病毒载体的功能。结果ARL-1 siRNA慢病毒载体能有效地沉默HCT8细胞内ARL-1的表达,降低HCT8细胞内ARL-1的酶活性。结论获得了能有效抑制细胞内ARL-1蛋白表达的ARL-1 siR-NA慢病毒。