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HMGA23'-UTR双荧光素酶报告载体构建及与miR-33b-5p的靶向验证
1
作者
胡海红
吴怡雯
+5 位作者
李擎
张以宁
彭晶
谢志忠
雷小勇
杨晓燕(指导)
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第24期3025-3029,共5页
目的:构建野生型及突变型HMGA2基因3’-非编码区(3’-UTR)的双荧光素酶报告基因载体,验证miR-33b-5p与HMGA2之间的靶向关系。方法:生物信息学相关软件预测miR-33b-5p与HMGA2之间的靶向关系;PCR扩增HMGA2的基因片段,构建HMGA2野生型和突...
目的:构建野生型及突变型HMGA2基因3’-非编码区(3’-UTR)的双荧光素酶报告基因载体,验证miR-33b-5p与HMGA2之间的靶向关系。方法:生物信息学相关软件预测miR-33b-5p与HMGA2之间的靶向关系;PCR扩增HMGA2的基因片段,构建HMGA2野生型和突变型双荧光素酶报告载体;将miR-33b-5p和阴性对照物分别与野生型GV272-HMGA2-wt-3’-UTR或突变型GV272-HMGA2-mut-3’-UTR双荧光素酶报告载体共转染293T细胞,然后检测荧光素酶的活性。结果:成功构建野生型及突变型HMGA2基因3’-非编码区(3’-UTR)的双荧光素酶报告基因载体,双荧光素酶报告系统的结果显示,加入miR-33b-5p可使野生型GV272-HMGA2-wt-3’-UTR的荧光素酶活性降低,但突变型GV272-HMGA2-mut-3’-UTR的荧光素酶活性与对照组相比则未发生显著变化。结论:野生型及突变型HMGA23’-UTR双荧光素酶报告载体构建成功;miR-33b-5p与HMGA2之间存在靶向关系。
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关键词
HMGA2
3’-非编码区
双荧光素酶报告载体
miR-33b-5p
下载PDF
职称材料
题名
HMGA23'-UTR双荧光素酶报告载体构建及与miR-33b-5p的靶向验证
1
作者
胡海红
吴怡雯
李擎
张以宁
彭晶
谢志忠
雷小勇
杨晓燕(指导)
机构
南华大学
衡阳医学院
南华大学肿瘤微环境响应药物研究湖南省重点实验室
出处
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第24期3025-3029,共5页
基金
湖南省自然科学基金项目(2019JJ50500)。
文摘
目的:构建野生型及突变型HMGA2基因3’-非编码区(3’-UTR)的双荧光素酶报告基因载体,验证miR-33b-5p与HMGA2之间的靶向关系。方法:生物信息学相关软件预测miR-33b-5p与HMGA2之间的靶向关系;PCR扩增HMGA2的基因片段,构建HMGA2野生型和突变型双荧光素酶报告载体;将miR-33b-5p和阴性对照物分别与野生型GV272-HMGA2-wt-3’-UTR或突变型GV272-HMGA2-mut-3’-UTR双荧光素酶报告载体共转染293T细胞,然后检测荧光素酶的活性。结果:成功构建野生型及突变型HMGA2基因3’-非编码区(3’-UTR)的双荧光素酶报告基因载体,双荧光素酶报告系统的结果显示,加入miR-33b-5p可使野生型GV272-HMGA2-wt-3’-UTR的荧光素酶活性降低,但突变型GV272-HMGA2-mut-3’-UTR的荧光素酶活性与对照组相比则未发生显著变化。结论:野生型及突变型HMGA23’-UTR双荧光素酶报告载体构建成功;miR-33b-5p与HMGA2之间存在靶向关系。
关键词
HMGA2
3’-非编码区
双荧光素酶报告载体
miR-33b-5p
Keywords
HMGA2
3’-UTR
Dual luciferase reporter vector
miR-33b-5p
分类号
R735.2 [医药卫生—肿瘤]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
HMGA23'-UTR双荧光素酶报告载体构建及与miR-33b-5p的靶向验证
胡海红
吴怡雯
李擎
张以宁
彭晶
谢志忠
雷小勇
杨晓燕(指导)
《中国免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2022
0
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