三维重建技术在穿支血管解剖中的应用

供养人体皮肤的每一条穿支血管均有一个明确的分布范围,即穿支皮瓣的解剖学供区,也称之为穿支体区[1]。每一条穿支体区借助周边的穿支血管吻合互相连接[2],紧邻解剖学供区的被称之为动力学供区,若再继续向远邻的供区延伸则称之为潜力供区[3]。因此,如欲切取“跨区穿支皮瓣”则必须了解其周边连接血管的特性[4]。对尸体标本或活体进行CT血管造影后,应用“后处理软件”可清晰显示全身各部位穿支血管的解剖学细节。

三七总皂苷抑制小鼠星形胶质细胞活化缓解完全弗氏佐剂所致炎性痛

目的探讨三七总皂苷(PNS)对完全弗氏佐剂(CFA)所致慢性炎性疼痛小鼠模型的镇痛作用及可能机制。方法48只C57BL/6J雄性小鼠随机分成生理盐水对照组(Ctrl)、CFA组(CFA)、CFA+PNS组、CFA+地塞米松(DEX)组(CFA+DEX)。采用Von Frey纤维丝检测小鼠机械疼痛;采用免疫组织化学法检测脊髓后角胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性星形胶质细胞数目和形态结构变化;采用Western blotting检测各组小鼠相应节段脊髓GFAP、核苷酸结合寡聚化结构域(NOD)样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、Caspase-1、白细胞介素(IL)-1β和IL-18的表达。结果与Ctrl组相比,CFA组小鼠机械痛阈值在第1、3、5、7、14天明显下降,小鼠脊髓NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β和IL-18的表达均显著增加。PNS干预可缓解模型小鼠机械痛觉,下调小鼠脊髓NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-1β和IL-18的表达,且与CFA+DEX组表达差异无显著性。免疫组织化学结果显示,与Ctrl组相比,CFA组小鼠脊髓后角GFAP阳性细胞数目显著增多;PNS干预后CFA+PNS组小鼠脊髓后角GFAP阳性细胞数目减少;DEX干预后对小鼠脊髓后角GFAP阳性细胞数目没有明显影响。Western blotting结果显示,与Ctrl组相比,CFA组小鼠脊髓GFAP表达明显增加;PNS干预后CFA+PNS组小鼠脊髓GFAP表达明显减少,DEX干预后对小鼠脊髓后角GFAP表达没有明显影响。结论PNS对炎性痛具有较好的缓解作用,其机制可能与抑制星形胶质细胞活化以及减少NLRP3炎性小体激活有关。

慢性束缚应激对小鼠海马星形胶质细胞表型转换及抑郁样行为的影响

目的探讨慢性束缚应激(CRS)对小鼠海马星形胶质细胞表型转换及抑郁样行为的影响。方法48只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组(control)、模型组(CRS)、氟西汀(FLX)药物干预组(CRS+FLX),每组各16只。慢性束缚应激3周建立抑郁小鼠模型,应激的第8天至第21天,CRS+FLX组于应激前30 min腹腔注射FLX(10 mg/kg),control组及CRS组注射等体积生理盐水。采用旷场实验以及糖水偏好实验检测各组小鼠行为变化;采用免疫组织化学法和Western blotting检测星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达;Real-time PCR检测海马A1和A2型星形胶质细胞标记物的表达。结果与control组相比,CRS组小鼠表现出明显的抑郁样行为,包括糖水偏好百分比显著降低(P<0.0001),体重明显较低(P<0.05),旷场实验在中央区域活动的距离明显降低(P<0.0001),FLX干预可逆转CRS所诱导的抑郁样行为表现(P<0.05);与control组相比,CRS组小鼠海马星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达明显上调(P<0.05),而FLX可下调小鼠海马GFAP的表达(P<0.05);与control组相比,CRS组小鼠海马区A1表型标记物[(H2D1、鸟苷酸结合蛋白2(GBP2)、Fk-506结合蛋白(FKBP5)、Amigo2)]mRNA表达水平上调(P<0.05),A2表型标志物mRNA水平无明显改变(P>0.05);FLX干预后可显著降低A1表型标志物mRNA表达水平(P<0.05),对A2表型标志物mRNA表达水平无显著影响(P>0.05);与control组相比,CRS组小鼠海马A1型标记物(C3、Fkbp5、GBP2)蛋白表达水平上调(P<0.05),A2型标记物CD14蛋白表达无明显改变(P=0.8361),FLX干预后可显著下调A1型标记物的蛋白水平(P<0.05),而对CD14的蛋白表达无明显影响(P=0.5881)。结论慢性束缚应激模型中小鼠的抑郁样行为可能与星形胶质细胞的表型改变相关,且主要是A1型标记物在星形胶质细胞的高表达。

右美托咪定上调海马脑源性神经营养因子-酪氨酸激酶受体B的表达及改善完全费氏佐剂所致小鼠焦虑样和抑郁样行为

目的探讨α2-肾上腺素受体激动剂右美托咪定(DEX)对完全弗氏佐剂(CFA)诱导疼痛模型小鼠焦虑样和抑郁样行为的影响及其可能的机制。方法36只ICR雌鼠随机分成生理盐水(NS)组、CFA组和DEX+CFA组,每组n=12。向小鼠右后肢足底皮下注射10μl CFA建立慢性炎性疼痛模型,DEX+CFA组小鼠在痛阈检测前30 min腹腔注射0.025 mg/kg DEX,1次/1 d,持续7 d。实验采用von-frey纤维丝评价3组小鼠机械性痛阈值;采用旷场实验检测小鼠焦虑样行为;采用糖水偏好、悬尾实验和强迫游泳检测3组小鼠抑郁样行为;采用Western blotting检测3组小鼠海马肾上腺素能受体β2(ADRB2)、脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸激酶B受体(TrkB)及突触相关蛋白谷氨酸受体1(GluR1)和GluR2的表达,每组n=8;采用免疫组织化学染色方法检测各组小鼠海马新生神经元标记物双肾上腺皮质激素(DCX)的表达情况,每组n=4。结果痛阈检测结果显示,与NS组相比,CFA注射后的第1天、3天、7天小鼠机械痛阈值均显著降低(P<0.05);与CFA组相比,DEX+CFA组小鼠机械疼痛阈值差异无显著性(P>0.05)。旷场结果显示,与NS组相比,CFA组小鼠进入中央格区域的时间(P<0.01)、次数(P<0.01)和中央格运动距离(P<0.01)均明显减少,而DEX+CFA组小鼠进入中央格区域的时间(P<0.01)、次数(P<0.05)和距离(P<0.05)明显多于CFA组。抑郁样行为检测结果显示,CFA组小鼠糖水偏好百分比(P<0.05)与NS组相比明显减少,悬尾不动时间(P<0.01)和强迫游泳不动时间(P<0.001)与NS组相比均显著增加;而DEX干预能明显增加小鼠糖水偏好百分比(P<0.05),降低小鼠悬尾不动时间(P<0.05)和强迫游泳不动时间(P<0.05)。Western blotting结果显示,与NS组相比,CFA组小鼠海马ADRB2(P<0.001)、BDNF(P<0.001)、TrkB(P<0.01)、GluR1(P<0.001)和GluR2(P<0.001)明显减少;DEX干预能明显增加ADRB2(P<0.05)、BDNF(P<0.001)、TrkB(P<0.001)、GluR1(P<0.001)和GluR2(P<0.001)的表达。免疫组织化学结果显示,与NS组相比,CFA组小鼠海马DCX平均吸光度显著降低(P<0.05);与CFA组相比,DEX+CFA组小鼠海马DCX平均吸光度显著升高(P<0.05)。结论右美托咪定可能通过上调BDNF-TrkB的表达促进海马神经发生,从而改善CFA所致小鼠焦虑样和抑郁样行为。

链脲佐菌素对糖尿病小鼠生精功能和睾丸m6A甲基化酶表达的影响

目的探讨链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)对糖尿病小鼠生精功能和睾丸m6A甲基化酶表达的影响。方法20只8周龄雄性ICR小鼠,随机分为溶媒对照组和模型组,腹腔注射STZ诱导糖尿病动物模型。注射后第2、4、6、8周检测血糖及体重;第8周采用精子计数法检测小鼠精子数量,HE染色检测精子存活率及睾丸形态,称量睾丸、附睾的重量;Real-time PCR和Western blotting检测各组小鼠睾丸中m6A甲基化酶mRNA及蛋白表达。结果与对照组相比,模型组小鼠空腹血糖显著增高,体重降低(P<0.01);睾丸及附睾重量显著下降(P<0.01)、精子数量显著下降(P<0.05);睾丸形态结构破坏,生精小管萎缩,管腔直径变小,各级生精细胞排列紊乱,管腔内精子数量减少;睾丸m6A甲基化酶METTL3、FTO、YTHDF3 mRNA表达降低(P<0.05);METTL3、FTO蛋白质表达显著降低(P<0.05)。结论STZ诱导的糖尿病小鼠出现生精障碍,其生精障碍可能与睾丸内m6A甲基化酶METTL3以及FTO的表达异常有关。

瞬时感受器电位香草素受体亚家族Ⅳ型抑制剂HC067047对脂多糖诱导的小鼠焦虑样行为的影响

目的探讨瞬时感受器电位香草素受体亚家族Ⅳ型(TRPV4)抑制剂HC067047对脂多糖(LPS)模型小鼠焦虑样行为的影响。方法48只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组(NS)、模型组(LPS)和药物干预组(HC+LPS)。腹腔注射0.83 mg/kg LPS建立焦虑样小鼠模型,HC+LPS组于LPS注射前30 min腹腔注射HC067047(10 mg/kg),NS组及LPS组注射等体积溶媒;旷场实验以及社会交往实验观察小鼠焦虑样行为;免疫组织化学及Western blotting检测海马TRPV4、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、神经型一氧化氮合酶(nNOS)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达情况。结果免疫组织化学和Western blotting实验发现,与NS组相比,LPS组小鼠海马中TRPV4表达显著上调(P<0.0001);旷场实验中,与NS组比较,发现LPS组小鼠活动的总距离(P<0.0001)、在中央区域活动的距离(P<0.01)以及在中央区域活动的时间均明显减少(P<0.01),HC067047干预可增加LPS模型小鼠的活动总距离(P<0.05)、在中央区域活动的距离(P<0.001)以及在中央区域的活动时间(P<0.01);社会交往实验中,与NS组相比,LPS组小鼠与陌生小鼠的交往时间显著降低(P<0.01),HC067047干预后能显著增加LPS模型小鼠与陌生小鼠的交往时间(P<0.01);Western blotting检测发现,LPS组小鼠海马中iNOS(P<0.05)、nNOS(P<0.001)和eNOS(P<0.001)的表达显著高于NS组,但HC067047干预后可使LPS模型小鼠海马中iNOS(P<0.05)、nNOS(P<0.01)、eNOS(P<0.01)的表达明显降低。结论抑制TRPV4的表达能够改善LPS所致小鼠焦虑样行为,该过程可能与抗氧化应激有关。

丰富环境通过抑制NOD样受体蛋白3炎性小体活化缓解脂多糖小鼠的认知障碍

目的探讨丰富环境(EE)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠认知功能障碍的影响及其可能机制。方法36只3周龄昆明小鼠进行8周的EE刺激或者标准环境(SE)饲养后分为以下3组:标准环境+生理盐水(SE+NS)组、标准环境+脂多糖(SE+LPS)组及丰富环境+脂多糖(EE+LPS)组。采用旷场实验检测小鼠的活动度;新旧事物识别实验检测小鼠认知功能;免疫组织化学方法检测小胶质细胞标记物离子钙接头蛋白分子1(IBA1)表达;Western blotting方法检测海马组织小胶质细胞激活标记物CD68及NOD样受体蛋白3(NOD-like receptor protein3,NLRP3)炎性小体相关蛋白的表达。结果旷场实验中,各组小鼠穿越的总格数无明显差异。在新旧事物识别实验中,与SE+NS组相比,SE+LPS组新事物辨别指数明显下降(P<0.05);与SE+NS组相比,小胶质细胞标记物IBA1表达上调(P<0.05);SE+LPS组海马CD68及NLRP3炎性小体相关蛋白的表达明显上调(P<0.05);而丰富环境可以逆转上述改变(P<0.05)。结论丰富环境可缓解脂多糖诱导的认知功能损伤,其机制可能与抑制海马小胶质细胞激活及NLRP3炎性小体的产生有关。

热量限制改善早期社会隔离诱导的小鼠认知功能障碍

目的探讨热量限制(CR)对早期社会隔离(SI)诱导的认知功能障碍的改善作用及其可能机制。方法3周龄昆明雄小鼠36只随机分成正常群居组(GH,n=12)、早期社会隔离组(SI,n=12)、热量限制干预组(SI+CR,n=12)。在相同条件下饲养GH组(6只/笼)和SI组(1只/笼),而SI+CR组(1只/笼)每隔1 d给予食物。采用旷场实验检测小鼠的活动度,新旧事物识别实验检测小鼠认知功能;免疫组织化学方法检测小鼠海马区小胶质细胞标记物离子钙结合接头分子1(IBA-1)的表达;Western blotting方法检测海马组织小胶质细胞激活标记物CD68及炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)的表达。结果在旷场实验中,3组小鼠的活动度无差异。在新旧事物识别实验中,与GH组相比,SI组新事物分辨率明显下降(P<0. 01),海马中IL-1β的表达显著上调(P<0. 01),此外,SI组在海马中表现出过度活化的小胶质细胞,表现为IBA-1阳性细胞数量增加,CD68高表达(P<0. 01);与SI组相比,SI+CR组新事物分辨率显著增加(P<0. 01),海马IL-1β的表达下调(P<0. 01),IBA-1阳性细胞的数量和CD68的表达显著减少(P<0. 01)。结论热量限制可缓解早期社会隔离诱导小鼠的认知功能损伤,其机制可能与抑制小胶质细胞的激活及炎症因子的释放有关。

小鼠视觉发育关键期外侧膝状体胰岛素样生长因子2的动态表达

目的探讨视觉发育关键期外侧膝状体(LGB)胰岛素样生长因子2(IGF2)的动态表达变化。方法选取3组不同年龄段的昆明小鼠进行试验,分别为3周龄组,5周龄组,7周龄组,每组12只。采用前爪触地反射实验检测各组小鼠的视觉功能是否正常;采用免疫组织化学技术检测小鼠出生后3、5和7周外侧膝状体IGF2蛋白及其受体的表达水平,分析IGF2蛋白在LGB各局部及其受体的表达变化模式。结果3~7周的发育过程中,在小鼠LGB背侧核IGF2蛋白表达5周时显著减少,7周时显著增加,腹侧核IGF2蛋白表达随时间逐渐增加。LGB背侧核及腹侧核IGF2受体蛋白表达5周时显著增加,7周时减少至3周时水平。结论视觉发育关键期小鼠外侧膝状体IGF2及其受体的表达存在随时间的动态改变,且各局部的表达模式不完全一致,IGF2及其受体可能与小鼠视觉发育可塑性有关。

海马sortilin在链脲佐菌素诱导的糖尿病认知损伤小鼠中的作用

目的探讨海马sortilin在链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病认知损伤小鼠中的作用。方法 24只成年雄性ICR小鼠,随机分为溶媒对照组(NS)和实验组(STZ)。STZ腹腔注射诱导糖尿病认知损伤动物模型,注射后用血糖仪检测血糖改变,注射后第8周采用新旧事物识别实验检测各组小鼠认知功能;免疫组织化学方法检测sortilin免疫阳性产物表达变化;Western blotting和Real-time PCR方法检测各组小鼠海马sortilin和脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白及mRNA表达变化。结果与NS组相比,STZ组小鼠空腹血糖显著增高(P<0. 01);在新旧事物识别实验中新事物辨别指数明显降低(P<0. 05);海马区sortilin的免疫阳性产物(P<0. 05)、蛋白(P<0. 01)以及mRNA(P<0. 05)表达均显著下调;海马区BDNF mRNA(P<0. 01)及蛋白(P<0. 05)表达均明显降低。结论 STZ诱导的糖尿病小鼠认知损伤可能与海马sortilin的表达下调有关。

海马小胶质细胞在小鼠慢性炎性痛所致负性情绪中的形态变化

目的探讨完全弗氏佐剂(CFA)所致慢性炎性痛小鼠模型情绪及海马小胶质细胞形态的改变。方法32只ICR雄性小鼠随机分成生理盐水对照组(NS)和完全弗氏佐剂组(CFA)。右后爪足底注射CFA建立小鼠慢性炎性痛模型。采用Von Frey纤维针测量小鼠右足底注射CFA后机械痛阈的变化;采用旷场实验检测小鼠活动度和焦虑样行为;采用糖水偏好和被迫游泳实验检测小鼠抑郁样行为;采用免疫组织化学法检测小鼠海马小胶质细胞标记物离子钙接头蛋白抗原(IBA-1)的表达;采用Sholl分析方法分析海马齿状回区小胶质细胞形态变化。结果小鼠痛阈评分结果显示,与NS组相比,CFA组小鼠机械痛阈明显下降(P<0.05)。行为学结果显示,与NS组相比,CFA组小鼠旷场中央格停留时间减少(P<0.01),糖水偏好百分比下降(P<0.01),被迫游泳实验不动时间增加(P<0.001)。免疫组织化学结果显示,与NS组相比,CFA组小鼠海马齿状回区小胶质细胞数目明显增多(P<0.001)。Sholl分析结果显示,与NS组相比,CFA组小鼠海马齿状回区小胶质细胞交点数目减少(P<0.05)。结论在CFA诱导的慢性炎性痛模型中,小鼠的负性情绪可能与海马小胶质细胞形态改变有关。

右美托咪定通过抑制脊髓星形胶质细胞活化改善甲醛诱导的急性炎性痛

目的探讨右美托咪定(DEX)在0.1%甲醛诱导的急性炎性痛中的作用。方法将30只ICR雌性小鼠随机分成生理盐水对照(NS)组、甲醛(F)组、右美托咪定+甲醛(DEX+F)组。向右后爪足底注射25μl 0.4%甲醛建立小鼠急性炎性痛模型,在甲醛注射前1 h,DEX+F组小鼠腹腔注射DEX,NS组和F组小鼠腹腔注射等体积生理盐水。以小鼠舔咬足累计时间评价自发痛行为。采用免疫组织化学法和Western blotting检测脊髓星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。结果自发痛评分结果显示,与NS组相比,F组小鼠出现典型的双相痛反应;与F组相比,DEX+F组小鼠的第Ⅰ时相痛(P<0.001)和第Ⅱ时相痛(P<0.001)累计时间明显减少。免疫组织化学结果显示,与NS组相比,F组小鼠脊髓后角GFAP阳性细胞数目明显增多(P<0.001);与F组相比,DEX+F组小鼠脊髓后角GFAP阳性细胞数目明显减少(P<0.001)。Western blotting结果显示,与NS组相比,F组小鼠脊髓GFAP表达明显增加(P<0.05);与F组相比,DEX+F组小鼠脊髓GFAP表达明显减少(P<0.05)。结论DEX可能是通过抑制小鼠脊髓星形胶质细胞的活化从而改善甲醛诱导的急性炎性痛。

溴结构域蛋白4抑制剂JQ1在甲醛诱导小鼠炎性痛中的作用及机制

目的 探讨溴结构域蛋白4(BRD4)抑制剂JQ1在甲醛诱导炎性痛模型小鼠脊髓中的表达变化及作用。方法 32只ICR小鼠随机分为生理盐水组、甲醛注射5 min、30 min和60 min组,每组8只,Western blotting(n=4/组)和Real-time PCR(n=4/组)检测各组小鼠脊髓BRD4的蛋白和mRNA的表达水平;66只小鼠随机分为甲醛注射组,溶媒(DMSO)加甲醛注射组,以及6.25、12.5、25和50 mg/kg JQ1注射加甲醛溶液组,每组11只,观察BRD4抑制剂JQ1对每组小鼠自发性疼痛的影响(n=11/组);免疫组织化学(n=3/组)、Real-time PCR(n=4/组)或Western blotting(n=4/组)的方法检测25 mg/kg JQ1对模型小鼠脊髓即早基因c-fos及谷氨酸受体2(GluR2)表达的影响。结果 甲醛注射后30 min和60 min,小鼠脊髓BRD4的蛋白(P<0.01)和mRNA水平明显升高(P<0.05);行为学结果显示,25 mg/kg和50 mg/kg JQ1处理组小鼠第Ⅱ相痛反应持续时间与溶媒(DMSO)组相比均明显缩短(P<0.05);免疫组织化学及Real-time PCR结果显示,25 mg/kg JQ1干预明显减少小鼠脊髓c-fos的阳性细胞数(P<0.05)和mRNA水平(P<0.05),Western blotting结果显示,25 mg/kg JQ1干预明显降低甲醛诱导的小鼠脊髓GluR2(P<0.001)的蛋白表达。结论 BRD4在炎性痛中枢敏化中起重要作用,JQ1可能是通过抑制疼痛中枢敏化的形成从而缓解炎性疼痛。

蓝白斑联合Sanger测序技术检测KRAS基因12位密码子突变

为研究蓝白斑联合Sanger测序检测KRAS基因12位密码子突变的可行性,将M12突变型质粒与WT野生型质粒按1∶30,1∶100,1∶300,1∶1000的比例混合以模拟游离DNA(cDNA),利用蓝白斑技术联合Sanger测序对KRAS基因稀有突变进行检测。结果显示,蓝白斑技术联合Sanger测序,可以检测出达到0.1%的KRAS基因稀有突变,无假阳性。通过改变阅读框架,使密码子能转变为终止密码子TAA,TGA,TAG的体细胞突变,可采用蓝白斑技术联合Sanger测序技术进行检测。

自主跑轮运动通过促进海马神经发生改善甲醛所致小鼠的负性情绪

目的探讨自主跑轮运动对甲醛疼痛模型小鼠负性情绪的影响。方法30只昆明雄鼠随机分成生理盐水对照组(NS)、甲醛组(F)、自主跑轮运动+甲醛组(R+F)。右后爪足底皮下注射0.4%甲醛建立疼痛模型,R+F组在模型建立之前置于小鼠跑轮运动装置3周。以实验小鼠舔足累计时间评价自发痛行为;采用旷场实验(OFT)和高架十字迷宫实验(EPM)检测小鼠焦虑样行为;采用被迫游泳实验(FST)检测小鼠抑郁样行为;采用免疫组织化学方法检测海马未成熟神经元标记物双皮层蛋白(DCX)的表达情况。结果自发痛评分结果显示,与NS组相比,F组小鼠出现典型的双相痛反应,与F组相比,R+F组小鼠的第Ⅱ相时段舔咬足累计时间明显缩短(P<0.01)。旷场实验结果显示,与NS组相比,F组小鼠在中央格探索时间显著减少(P<0.001),与F组相比,R+F组小鼠在中央格探索的时间增加(P<0.05)。高架十字迷宫实验结果显示,与NS组相比,F组小鼠进入开放臂的时间显著减少(P<0.001),与F组相比,R+F组小鼠进入开放臂的时间增加(P<0.05)。被迫游泳实验结果显示,与NS组相比,F组小鼠不动时间明显增加(P<0.01),与F组相比,R+F组小鼠不动时间缩短(P<0.05)。免疫组织化学结果显示,与NS组(250.90±16.22)相比,F组小鼠海马DCX阳性细胞面积(210.90±7.98)减少,与F组相比,R+F组小鼠海马DCX阳性细胞面积显著增多(284.00±9.84)。结论自主跑轮运动可能通过促进海马神经发生,从而改善甲醛所致小鼠的自发痛与焦虑、抑郁样行为。

MCC950下调即早基因的表达缓解甲醛所致小鼠炎性痛

目的探讨MCC950对甲醛模型小鼠疼痛的影响及可能机制。方法 72只ICR雄性小鼠随机分为生理盐水对照组(NS组),甲醛模型组(F组)、不同浓度梯度MCC950干预组(6.25 mg/kg MCC950+F、12.5 mg/kg MCC950+F、25 mg/kg MCC950+F、50 mg/kg MCC950+F)。以小鼠累计舔咬足时间评价自发痛行为;采用Real-time PCR方法检测小鼠脊髓即早基因,包括c-Fos、Arc、早期生长反应因子-1(Egr-1) mRNA的表达变化;采用免疫组织化学法检测脊髓背角内c-Fos的表达。结果自发痛评分显示,与NS组相比,F组小鼠出现典型双相痛;与F组相比,12.5 mg/kg、25 mg/kg及50 mg/kg MCC950预处理均可显著缓解甲醛所致小鼠疼痛。Real-time PCR结果显示,与NS组相比,F组小鼠脊髓早期基因(c-Fos、Arc、Egr-1)的mRNA表达均上调,50 mg/kg MCC950预处理后,上述指标的mRNA表达均显著下调。免疫组织化学结果显示,与NS组相比,F组小鼠脊髓背角c-Fos表达明显增加,而用50 mg/kg MCC950预处理后,小鼠脊髓背角c-Fos表达下降。结论 MCC950可有效缓解甲醛所致小鼠炎性痛,其机制可能与下调脊髓即早基因(c-Fos、Arc、Egr-1)的表达有关。

慢性束缚应激对小鼠睾丸生精功能及m6A甲基化酶表达的影响

目的探讨慢性束缚应激(CRS)对小鼠睾丸生精功能及m6A甲基化酶的影响。方法18只8周龄雄性C57 BL/6小鼠,随机分为空白对照组(Control)和慢性束缚应激组(CRS)(每天在圆筒内慢性束缚6 h,连续35 d)。小鼠睾丸和附睾尾称重,进行精子计数,精子活率、畸形率检测及对睾丸形态结构变化等进行H&E染色检测;使用qRT-PCR和Western blot检测各组小鼠睾丸组织中m6A甲基化酶mRNA及蛋白表达的变化。结果与Control组相比,CRS组小鼠睾丸以及附睾重量有下降的趋势,精子数量下降、精子畸形率增高及精子活率降低差异有统计学意义;与Control组相比,CRS组小鼠睾丸形态结构破坏,各级生精细胞排列紊乱,管腔内精子数量减少;qRT-PCR结果显示,与Control组相比,CRS组小鼠睾丸m6A甲基化转移酶WTAP mRNA表达降低,去甲基化酶ALKBH5及甲基识别酶YTHDC1、YTHDC2、YTHDF1、YTHDF3 mRNA表达增高,差异有统计学意义。Western blot结果显示,与Control组相比,CRS组小鼠睾丸m6A甲基化转移酶WTAP蛋白表达降低,去甲基化酶ALKBH5及甲基识别酶YTHDC1蛋白表达增高,差异有统计学意义。结论CRS导致小鼠出现生精功能障碍,其生精障碍可能与睾丸内m6A甲基化酶异常变化有关。

小胶质细胞在脓毒症相关性脑病中作用的研究进展

脓毒症相关性脑病(sepsis-associated encephalopathy,SAE)是指由脓毒症引起的弥漫性脑功能障碍,其临床主要特征为注意力下降,定向力障碍,易激惹,严重时患者会出现昏睡、昏迷等症状。SAE的发病机制主要包括神经炎症、血脑屏障破坏、脑血管功能障碍以及神经代谢改变,其中神经炎症是SAE的核心病理过程。小胶质细胞被视为中枢神经系统的重要免疫细胞,在神经炎症中具有重要作用。本文系统描述了小胶质细胞在SAE发生和发展中扮演的角色,并详细探讨了小胶质细胞的表型和相关信号通路,以期明确小胶质细胞在SAE中的作用,为临床治疗提供理论基础。