m^(6)A修饰的circ_100367通过调控miR-885-5p轴介导甲状腺乳头状癌免疫逃逸

目的:探讨m^(6)A修饰的circ_100367对甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)免疫逃逸的影响,并阐述其可能的机制。方法:采用qRT-PCR法检测PTC患者癌组织及其癌细胞株中circ_100367和miR-885-5p的表达水平。将circ_100367干扰质粒(si-circ_100367)及其阴性对照干扰质粒(si-NC)、circ_100367过表达质粒(oe-circ_100367)及其阴性对照质粒(oe-NC)和miR-885-5p mimics及其阴性对照NC mimics分别转染至TPC1细胞中,分为Blank组、si-circ_100367组、si-NC组、oe-circ_100367组、oe-NC组、miR-885-5p mimics组和NC mimics组。采用qRT-PCR法检测各组TPC1细胞中circ_100367和miR-885-5p的表达水平;采用双荧光素酶报告系统验证circ_100367可靶向调控miR-885-5p;MeRIP-qPCR法检测circ_100367的m^(6)A甲基化水平;Transwell法检测细胞侵袭能力;细胞划痕实验检测细胞迁移能力;Western blot检测细胞FASL、IDO1、PD-L2和PD-L1表达水平。结果:circ_100367在PTC患者癌组织及其癌细胞株K1、TPC1和IHH4中表达水平明显升高(P<0.05),而miR-885-5p表达水平明显降低(P<0.05)。双荧光素酶报告系统结果说明:circ_100367靶向负调控miR-885-5p。MeRIP试验结果显示:circ_100367含有丰富的m^(6)A甲基化,且与NC mimics比较,miR-885-5p mimics细胞中circ_100367的m^(6)A甲基化水平明显降低(P<0.05)。此外,与Blank或si-NC比较,si-circ_100367细胞侵袭数量、细胞划痕愈合率和FASL、PD-L1、PD-L2、IDO1蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与Blank或oe-NC比较,oe-circ_100367细胞侵袭数量、细胞划痕愈合率和FASL、PD-L1、PD-L2、IDO1蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与Blank或NC mimics比较,miR-885-5p mimics细胞侵袭数量、细胞划痕愈合率和FASL、PD-L1、PD-L2、IDO1蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:m^(6)A甲基化修饰的circ_100367能诱导PTC细胞侵袭,影响PD-L1的表达进而促进免疫逃逸,其可能与m^(6)A甲基化修饰的circ_100367和miR-885-5p竞争性结合有关。

前哨淋巴结活检联合保乳手术治疗老年乳腺癌的疗效及其对生活质量的影响

目的:探讨前哨淋巴结活检联合保乳手术治疗老年乳腺癌的疗效及其对生活质量的影响。方法:选取2021年11月—2022年1月南华大学衡阳医学院附属第二医院收治的80例老年乳腺癌患者作为研究对象,采用抽签方式随机进行分组,分为改良根治术治疗的对照组和前哨淋巴结活检联合保乳手术治疗的实验组,每组各40例。比较两组老年患者的手术相关指标、生活质量评分、乳房美观度、肩关节功能评分及并发症的发生率。结果:实验组患者的手术时间更短,出血量少,能够更早拔除胸壁引流管,组间比较差异有统计学意义(t=9.7493、13.2685、36.3859,P<0.05);实验组患者的生活质量评分为(50.63±4.58)分,与对照组(26.69±4.99)分比较,差异有统计学意义(t=22.3542,P<0.05);实验组患者的肩关节功能评分高于对照组,差异有统计学意义(t=38.9852、9.5106、8.1857,P<0.05);实验组患者的乳腺美观患者多于对照组,差异有统计学意义(χ^(2)=14.5278,P<0.05);实验组患者术后出现上肢水肿、皮下组织坏死等并发症的例数少,差异有统计学意义(χ^(2)=14.0502,P<0.05)。结论:对老年乳腺癌患者实施前哨淋巴结活检联合保乳手术治疗能够有效提高患者的生活质量,改善肩关节功能,降低手术时间及出血量,更多保留女性乳腺的美观度,术后减少并发症的发生。

干扰MAD2L1基因表达对乳腺癌细胞凋亡的影响及机制

目的探讨干扰有丝分裂阻滞缺陷2样蛋白1(MAD2L1)基因表达对乳腺癌(BC)细胞凋亡的影响及其机制。方法采用qRT-PCR检测正常乳腺上皮细胞系MCF-10A和4种BC细胞系(MDA-MB-231、MCF-7、SK-BR-3和BT-20)中MAD2L1 mRNA表达水平。将MAD2L1 siRNA转染至MDA-MB-231细胞中,qRT-PCR和Western blotting检测细胞中MAD2L1 mRNA和蛋白表达水平;MTT检测细胞增殖能力;流式细胞术法检测细胞凋亡率;Western blotting检测细胞中Bax、Bcl-2、cleaved-caspase-3、p-p38MAPK(Thr180/Thr182)和p38MAPK等蛋白表达水平。采用p38MAPK抑制剂SB203580联合处理上述细胞,Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡率的变化;Western blotting检测Bax、Bcl-2、cleaved-caspase-3、p-p38MAPK和p38MAPK表达水平的变化。结果BC细胞系中MAD2L1 mRNA表达水平高于MCF-10A细胞,其中MDA-MB-231细胞最为显著。干扰MAD2L1基因可降低MDA-MB-231细胞中MAD2L1 mRNA和蛋白表达水平(t_(mRNA)=10.51,P_(mRNA)<0.001;t_(蛋白)=18.30,P_(蛋白)<0.001),同时抑制细胞增殖(F_(组别)=243.36、F_(时间)=44.00、F_(组别×时间)=9.881,P均<0.001),促进细胞凋亡(t=9.10,P<0.001),并上调Bax、cleaved-caspase-3和p-p38MAPK蛋白表达水平(t_(Bax)=15.05,P_(Bax)<0.001;t_(cleaved-caspase-3)=5.26,P_(cleaved-caspase-3)=0.006;t_(p-p38MAPK)=28.46,P_(p-p38MAPK)<0.001),下调Bcl-2蛋白表达水平(t_(Bcl-2)=14.23,P<0.001)。然而,SB203580处理可抑制MAD2L1基因干扰对MDA-MB-231细胞凋亡的诱导作用(P=0.002)。结论干扰MAD2L1基因表达可抑制MDA-MB-231细胞增殖,并诱导其凋亡,其作用机制可能与激活p38MAPK信号通路有关。