N-乙酰-D-氨基葡萄糖抑制氧化应激和促进巨噬细胞M2极化减轻大鼠急性胰腺炎

目的本文研究N-乙酰-D-氨基葡萄糖(N-acetyl-D-glucosamine,GlcNAc)对大鼠急性胰腺炎的影响。方法将20只SPF级雄性SD大鼠随机分为对照组、AP组、低剂量GlcNAc+AP组、高剂量GlcNAc+AP组,每组5只。AP组、低剂量GlcNAc+AP组、高剂量GlcNAc+AP组分别予以腹腔注射2.5 g/kg的L-精氨酸致大鼠急性胰腺炎2次,每次间隔1 h,其中低剂量GlcNAc+AP组和高剂量GlcNAc+AP组第1次腹腔注射L-精氨酸前24 h分别予以50 mg/kg和200 mg/kg GlcNAc腹腔注射,对照组、AP组腹腔注射同等体积生理盐水。24 h后处死大鼠,采集血清和胰腺组织。HE染色观察胰腺组织形态,酶联免疫吸附实验检测大鼠血清中淀粉酶(AMY)、脂肪酶(LPS)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA);Western Blot检测胰腺组织核因子E2相关因子2(NRF2)、血红素氧合酶-1(HO-1)、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)的表达;免疫荧光检测胰腺组织白细胞分化抗原86(CD86)、白细胞分化抗原(CD206)、巨噬细胞标志物(F4/80)。免疫组化检测胰腺CD86、CD206的表达。结果(1)与对照组大鼠相比,AP组大鼠血清AMY、LPS、IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA水平、胰腺CD86免疫荧光定量明显升高(P<0.05);而SOD活性、NRF2、HO-1、PPAR-γ蛋白表达水平、胰腺CD206免疫荧光定量明显下降(P<0.05);(2)与AP组大鼠相比,低剂量GlcNAc+AP组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA、LPS、胰腺CD86免疫荧光定量水平明显降低(P<0.05);胰腺PPAR-γ蛋白水平明显升高(P<0.05);(3)与AP组大鼠相比,高剂量GlcNAc+AP组大鼠血清AMY、LPS、IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA、胰腺CD86免疫荧光定量水平明显降低(P<0.05),而血清SOD水平、NRF2、HO-1、PPAR-γ蛋白表达水平、胰腺CD206免疫荧光定量水平明显升高(P<0.05);(4)与低剂量GlcNAc+AP组相比,高剂量GlcNAc+AP组大鼠血清LPS、IL-1β、IL-6明显降低(P<0.05);胰腺HO-1、PPAR-γ蛋白的表达水平、胰腺CD206免疫荧光定量明显升高(P<0.05)。结论GlcNAc干预可以减轻AP大鼠急性胰腺炎损伤,可能是激活NRF2/HO-1信号通路抑制氧化应激和促进巨噬细胞M2极化来减轻AP大鼠胰腺损伤。