氯马斯汀对慢性疼痛模型小鼠抑郁样行为改善作用及神经机制研究

目的:探讨氯马斯汀(clemastine,CLE)对完全弗氏佐剂(complete Freund's adjuvant,CFA)诱导的慢性疼痛模型小鼠抑郁样行为的影响和可能的机制。方法:30只雄性C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为生理盐水对照组(NS组)、疼痛模型组(CFA组)、疼痛模型+CLE干预组(CFA-CLE组),每组10只。CFA组、CFA-CLE组小鼠在右后足足底中部皮下注射10μL CFA建立慢性炎性疼痛模型,CFA-CLE组小鼠在CFA注射第7天腹腔注射CLE(10 mg/kg),1次/d,持续14 d,CFA组和NS组小鼠注射等体积0.9%氯化钠溶液。采用von Frey纤维丝检测3组小鼠机械缩足阈值(paw withdrawal mechanical threshold,PWMT);采用旷场实验检测小鼠的活动度,采用糖水偏爱实验、悬尾实验、强迫游泳实验检测小鼠抑郁样行为;采用免疫组织化学染色方法检测小鼠海马区少突胶质细胞标志物髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)、新生神经元标志物双皮质素(doublecortin,DCX)和成熟神经元标志物微管相关蛋白2(microtubule-associated protein 2,MAP2)的表达情况。采用GraphPad Prism 8.0软件进行统计分析,3组间比较采用单因素方差分析,PWMT结果采用重复测量方差分析。结果:痛阈检测结果显示,时间和组别对PWMT影响的交互效应是显著的(F=4.390,P<0.001),并且时间主效应(F=13.44,P<0.001)与组别主效应(F=25.38,P<0.001)均有显著性。在1 d、7 d、14 d、21 d,CFA组小鼠的PWMT均低于NS组(均P<0.001);CFA组与CFA-CLE组小鼠在1 d、7 d、14 d、21 d的PWMT均显著低于0 d(均P<0.001);而在不同时间点CFA-CLE组小鼠的PWMT与CFA组相比均差异无统计学意义(均P>0.05)。3组小鼠旷场实验中的运动总距离差异无统计学意义(F=1.15,P>0.05)。3组小鼠的糖水偏爱率、悬尾不动时间和强迫游泳不动时间均差异有统计学意义(F=5.46,13.44,14.29,均P<0.05);CFA组小鼠的糖水偏爱率[(65.78±11.61)%]低于NS组[(80.55±6.41)%],悬尾不动时间和强迫游泳不动时间[(124.60±18.16)s,(82.63±13.40)s]均高于NS组[(88.11±12.83)s,(48.09±9.78)s](均P<0.05);CFA-CLE组小鼠的糖水偏爱率[(78.04±9.10)%]高于CFA组,悬尾不动时间和强迫游泳不动时间[(89.96±11.93)s,(56.37±12.82)s]均低于CFA组(均P<0.05)。3组小鼠海马区MBP、DCX和MAP2阳性细胞的吸光度均差异有统计学意义(F=11.92,6.55,9.31,均P<0.01);CFA组小鼠海马MBP、DCX和MAP2阳性细胞的吸光度均低于NS组(均P<0.01);而CFA-CLE组小鼠海马MBP、DCX和MAP2阳性细胞的吸光度均高于CFA组(均P<0.05)。结论:CLE可能通过促进海马少突胶质细胞再髓鞘化和提高神经元可塑性改善CFA慢性疼痛模型小鼠的抑郁样行为。