微生物合成ε-聚赖氨酸的研究进展

介绍了国内外ε-聚赖氨酸的研究和生产状况,介绍了ε-聚赖氨酸合成机理。特别是对于ε-聚赖氨酸合成酶结构以及决定ε-聚赖氨酸聚合度大小的催化合成模型进行了综述。另外,作者结合自己的研究展望了ε-聚赖氨酸研究的发展趋势。

蔬菜根际微生物分析

不同作物的根际有其特定的微生物群落，这一点已有论述。研究不同作物的根际微生物群落特点及其规律，对于探讨作物连作障碍的微生物机理，以及用微生态控制方法来克服连作障碍有着重要的意义。本文对７种蔬菜根际微生物的组成和变化进行了分析，并着重对黄瓜、大蒜根际优势菌进行了分析比较。

高分子聚合物的微生物合成与降解

完成了门多萨假单胞菌和解淀粉芽胞杆菌的全基因组测序,正在采用合成生物学技术构建优势小基因组菌株;另外,基于ISO14852的检测方法提出了环境降解参数(EdK)的概念并建立了相应的检测方法。

微生物采油技术的研究

本文简要介绍了微生物提高石油采收率的机理、菌种的筛选和评价方法、室内模拟和矿场试验结果。

白腐真菌的广谱生物降解性研究进展

白腐真菌由于能够降解木质素而在地球的碳循环中发挥着不可或缺的作用。由胞外的过氧化物酶类和其他次级代谢产物组成的木质素降解系统除了能够降解木质素外,对众多的异生物质也具有广谱的生物降解性,赋予了白腐真菌巨大的环境工业应用潜力。对白腐真菌的木质素降解系统和其广谱的生物降解性进行了介绍与展望。

剩余活性污泥完全资源化利用微生物集成技术

剩余活性污泥完全资源化利用微生物集成技术包括:使用土著PHA合成菌回注法驯化并发酵活性污泥,生产生物降解材料聚羟基脂肪酸酯(PHA);采用土著嗜酸性氧化亚铁硫杆菌和氧化硫硫杆菌进行生物淋滤,去除重金属;以解磷菌和解钾菌为菌种,进行固态发酵,生产生物菌肥。结果表明,500 L中试PHA占挥发性悬浮固体的20%以上;重金属含量达到国家排放要求;生物菌肥中活菌数大于1×108个/g以上。实现了剩余活性污泥的近零排放。

雅致枝霉Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因的克隆及在酿酒酵母中的表达

根据真菌Δ6-脂肪酸脱氢酶基因保守的组氨酸Ⅱ区和Ⅲ区附近保守序列设计兼并引物进行RT-PCR,得到雅致枝霉(Thamnidium elegans)As3.2806Δ6-脂肪酸脱氢酶基因459bp部分cDNA序列,然后通过快速扩增cDNA末端技术(RACE)向两端延伸得到1504bp的Δ6-脂肪酸脱氢酶基因全长cDNA序列。序列分析表明有一个1377bp、编码459个氨基酸的开放阅读框TED6。推测的氨基酸序列与已知其他真菌的Δ6-脂肪酸脱氢酶基因的氨基酸序列比对,具有3个组氨酸保守区、2个疏水区及N末端细胞色素b5融合区。将此编码区序列亚克隆到酿酒酵母缺陷型菌株INVSc1的表达载体pYES2.0中,构建表达载体pYTED6,并在酿酒酵母INVSc1中异源表达。通过气相色谱(GC)和气相色谱/质谱(GC-MS)分析表明,该序列在酿酒酵母中获得表达,产生γ-亚麻酸(GLA)的含量占酵母总脂肪酸的7.5%。证明此序列编码的蛋白能将外加的亚油酸转化为γ-亚麻酸,是一个新的有功能的Δ6-脂肪酸脱氢酶基因(GenBank,AY941161)。

铜绿假单胞菌pcr2基因功能的研究

Ⅲ型分泌系统(type Ⅲ secretion system,TTSS)是铜绿假单胞菌的重要致病因子,pcr2基因位于TTSS基因簇中popN操纵子的第三位,有关该基因的具体功能研究还是空白。首先,本研究采用定点诱变方法构建pcr2-突变体,发现TTSS表达和分泌ExoS和ExoT蛋白的能力显著下降,在HeLa细胞感染实验中,ExoS和ExoT蛋白注入细胞的数量明显低于野生型菌株。其次,我们采用细菌双杂交系统研究了Pcr2蛋白与其它蛋白结合的可能性,发现Pcr2蛋白与PscB蛋白一起能够结合PopN蛋白,同时Western blot实验发现Pcr2蛋白能够调控PopN蛋白的分泌。最后,实验发现Pcr2蛋白本身也能够分泌到细胞外,可能与TTSS分泌器的早期形成过程有关。

苏芸金芽孢杆菌与蜡状芽孢杆菌基因组DNA同源性及多态性的研究

用ＲＡＰＤ－ＰＣＲ扩增到６１个标准株、生产用菌株及２４个蜡状芽孢杆菌参比菌株的全ＤＮＡ指纹图，通过计算多态性扩增片段的大小，利用ＮＴＳＹＳ软件进行聚类分析，蜡状芽孢杆菌菌株并未形成独立于苏芸金芽孢杆菌的聚群，这是此近缘种ＤＮＡ分子水平高度同源的新证据．６１个苏芸金芽孢杆菌的聚类结果表明：其ＤＮＡ指纹图与Ｈ－血清型有一定相关性．与引物０９５５－０３相比，引物０９４０－１２对苏芸金芽孢杆菌不同亚种及蜡状芽孢杆菌菌株具有更高的鉴别价值，大多数特异株ＤＮＡ全指纹图有菌株特异性。

真菌分类技术的进展

真菌分类技术的进展刘钢，周与良（南开大学微生物系，天津３０００７１）真菌的亲缘关系或系统性的研究是建立生物资源预期价值信息存取系统不可缺少的内容。真菌分类学也是进行真菌遗传学、种群学以及流行病学研究的基础。两个世纪以来，真菌分类一直是以形态学为主。但...

植物病原真菌拮抗菌Bs—98发酵特性及理化性质的研究

ＢａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓＢｓ─９８为本室分离，它对苹果轮纹病菌（ＰｈｙｓａｌｏｓｐｏｒａＰｉｒｉｃｏｌａ）小麦赤霉病菌（Ｆｕｓａｒｉｕｍｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍ）等多种植物病原真菌有很强的抑制作用．经正交试验确定了该菌的最佳发酵条件，并验证该菌的拮抗物耐酸、耐碱且对热稳定．

RNA沉默抑制子p19调控细胞周期相关蛋白表达(英文)

番茄丛矮病毒的P19蛋白不仅是一个重要的病毒致病因子,而且还可作为RNA干扰(RNAi)的抑制子.这种作用是通过限制细胞内的小RNA,比如小干扰RNA(siRNAs)和微RNA(miRNAs)来实现.但是目前对P19蛋白在哺乳动物细胞上的作用还未见报道.构建了一株p19稳定表达的293细胞系,即293-p19.流式细胞仪分析发现在293细胞中过量表达P19蛋白可显著引发细胞周期的G2/M阻滞.细胞增殖实验显示,293-p19细胞的DNA复制及细胞生长均受到显著的抑制.此外,研究还发现p19可使人胚肾293细胞内的细胞周期调控子的表达谱发生改变.其中包括上调cyclinA1,CDK2,CDK4,CDK6,p18,cyclinD2,p19INK4d和E2F1,及下调p15,cyclinA,cyclinB1和cyclinE1的表达.上述研究结果提示,p19有可能靶向多个G2/M调控蛋白从而引发细胞的G2/M阻滞.

高浓度难降解工业废水菌种筛选及其降解特性

使用富集、稀释涂平板的方法从制药、染料、化工及精细化工、食品等多家工厂的混合高浓度难降解化工废水中筛选到8株细菌,经16S rDNA鉴定为Bacillus aquimaris、Enterobacter、Pseudomonas putida、Microbacterium、Agrobacterium、Alpha proteobacterium、Planococcus rifietoensis,其中两株细菌为Bacillus aquimaris。对各单一菌种生长条件的研究表明,各菌种生长的最适pH为7,最适接种量为15%(v/v),最适生长温度为37℃,其中Pseudomonas putida的最适生长温度为30℃。在最适生长条件下,研究了各单一菌种及不同组合的混合菌种对废水的降解效果,结果表明在单一菌种中Pseudomonas putida对废水的降解效果最优,混合菌的降解效果优于单一菌种的降解效果,混合菌可将废水COD由1 249 mg/L降至97 mg/L,比普通活性污泥对废水的去除率提高了14.7%。

深红酵母的化学数值分类学研究

对29株深红酵母（Rhodotorularubra）的裂解气相色谱（PyGC）数据分别采用三种数值分析方法进行化学数值分类学研究。结果显示，不管是聚类分析、主分量分析还是Q型因子分析，均能得到极为相似的分类结果，其中Q型因子分析效果最佳。通过数值分类学研究，29株深红酵母被划分成不同的四群，其中NKR111不能与上述四群聚类，作者建议将该菌株从Rhrubra中分出，仍保留Rh.pilimanae种名。

牛泡沫病毒转录激活因子Borf1影响细胞周期相关基因的表达

Borf1蛋白是牛泡沫病毒编码的转录激活因子,可影响其自身及病毒结构基因的表达。但目前对Borf1在宿主细胞周期上的作用还未见研究报道。通过建立人胚肾293稳定表达Borf1的细胞系来研究其对宿主细胞的影响表明,在细胞内稳定表达Borf1可显著引发细胞在G1/G0的阻滞,并且降低S期细胞的比例。用半定量RT-PCR分析发现,Borf1可在mRNA水平下调周期蛋白cyclin A2,cyclin B1和cyclin E的表达。蛋白水平检测进一步核实这一结果。因此,Borf1通过影响周期相关蛋白表达,在G2-M及G1-S限制位点上发挥作用,进而引发细胞G1期阻抑。

关于进化真菌学教学内容的讨论

核酸序列的比较研究使进化真菌学的面貌发生了革命性的变化,分子系统发育揭示的关系反映出真菌进化的复杂性和多样性,真菌系统学反映真菌进化关系的自然系统还有很大的距离,有赖于新物种的不断发现和分子系统发育证据的不断丰富。

利用紫外线诱变原生质体筛选四环素高产菌株的研究

以金色链霉菌为出发菌株，经溶菌酶作用制备原生质体，然后以紫外线对原生质体进行诱变处理，在再生培养基上再生培养，获得再生突变株，将其中的单菌落以琼脂挖块法进行初筛获得第２０号菌株，其相对效价为１．２８４。

以荧光素酶为报告基因定量检测原型泡沫病毒的指示细胞系的建立

原型泡沫病毒(prototypic foamy virus,PFV)属于反转录病毒科泡沫病毒亚科.为了在细胞水平定量检测PFV的感染,建立了以萤火虫荧光素酶为报告基因的指示细胞系.在幼小仓鼠肾细胞BHK-21中转染含有PFV LTR启动子及其控制下的荧光素酶报告基因的质粒,经过G418筛选得到稳定整合的细胞系.当PFV感染指示细胞系时,其反式激活因子Tas激活LTR启动子,诱导下游报告基因的表达,通过检测荧光素酶的活性即可对PFV的感染进行定量检测.结果表明,该细胞系可特异指示PFV的感染,相比于传统观察细胞病变的方法,该指示细胞系更为灵敏,是PFV相关研究的有力工具,具有潜在的应用价值.