类泛素化修饰蛋白SUMO1的表达纯化及抗体制备

SUMO是近年发现的类泛素化修饰蛋白,可通过异肽键共价连接到靶蛋白上,影响靶蛋白的细胞内定位、稳定性及与其它蛋白质的相互作用.为研究蛋白质的SUMO化修饰,本文表达并纯化了重组的人SUMO1,制备了兔抗hSUMO1的多克隆抗体.经ELISA和免疫印迹检测,该抗体灵敏度高、特异性好,且能识别内源性SUMO1及其修饰蛋白,可用于SUMO化修饰靶蛋白的鉴定及SUMO化修饰的生物学功能研究.

用多克隆抗体检测干扰素调节因子7的表达(英文)

干扰素调节因子7(IRF-7)是调节Ⅰ型干扰素依赖型先天免疫反应的关键因子,在真核细胞防御反应中发挥重要作用。本文在大肠杆菌中表达了重组IRF-7,利用亲和层析的方法进行了纯化,并制备了鼠抗IRF-7的多克隆抗体。所得到的抗血清能够在稀释27 000倍后成功用于免疫印迹检测。该抗血清不但能识别来源于大肠杆菌的抗原,还能检测真核细胞内转染后表达的IRF-7。使用该抗体证实,转染293T细胞后表达的IRF-7主要分布在细胞质内。所制备的抗血清可用于IRF-7的表达和功能研究。