淫羊藿甙对OVX大鼠成骨细胞Smad4 mRNA的作用

目的:探讨淫羊藿甙(icariin)抑制骨质疏松的细胞内信号机制。方法:36只雌性Wistar大鼠随机分成3组:OVX(双侧卵巢切除);OVX-I(OVX并注射icariin);OVX-E(OVX并注射雌二醇)。术后4,6,8周时检测血清碱性磷酸酶(ALP)的含量,并于术后8周时测体质量,取股骨干分离培养成骨细胞,用RT-PCR检测各组成骨细胞Smad4的mRNA含量。结果:(1)Icariin可以控制OVX大鼠体质量增加。(2)术后4,6周OVX-I和OVX-E组血清ALP值升高差异无统计学意义;OVX组ALP升高值与其他2组间差异有统计学意义(P<0.01);术后8周OVX、OVX-I和OVX-E组血清ALP值依次降低,差异有统计学意义(P<0.01)。(3)术后8周,RT-PCR显示OVX、OVX-I和OVX-E组Smad4的mRNA含量依次增高,以OVX-E组最多。结论:淫羊霍甙可抑制OVX大鼠血清ALP水平的升高,且可能通过提高Smad4mRNA抑制OVX大鼠体质量的增加。

淫羊藿甙对成骨细胞Smad4 mRNA作用的实验研究

目的检测淫羊藿甙对体外培养的成骨细胞MC3T3-E1中Smad4mRNA的影响。方法用0、10、20、40ng/ml的淫羊藿甙刺激MC3T3-E1细胞。用倒置相差显微镜观察细胞生长情况。通过四甲基噻唑蓝(MTT)法测绘细胞生长曲线和计算细胞群体倍增时间;描述刺激MC3T3-E1细胞的增殖能力。用速率分光光度法测定ALP的含量,免疫组织化学法观察Ⅰ型胶原的产生,用以判断细胞的分化情况。用RT-PCR测定Smad4mRNA的数量。结果10、20ng/ml浓度淫羊藿甙可使MC3T3-E1细胞的生长曲线明显上移(P<0.01);0、10、20和40ng/ml组群体倍增时间分别为(39.37±2.35)h、(26.76±1.78)h、(29.30±2.12)h和(36.35±2.34)h,各组间比较差异有统计学意义(P<0.01);0、10ng/ml可使MC3T3-E1细胞产生ALP和Ⅰ型胶原量增加,刺激ALP作用呈现时间和剂量的依赖性(P<0.01);RT-PCR显示10、20ng/ml浓度淫羊藿甙可以刺激MC3T3-E1细胞Smad4mRNA的数量增加。上述作用以10ng/ml浓度最强(P<0.01)。结论淫羊藿甙刺激成骨细胞MC3T3-E1增殖与分化,可能是通过提高MC3T3-E1细胞Smad4mRNA的量而产生作用。