脓毒症大鼠肝组织基因表达的研究

目的筛选脓毒症大鼠肝组织中与正常组织差异表达的基因并进行初步功能分析。方法雄性Wistar大鼠30只，随机分为模型组和空白对照组，每组15只。参照盲肠结扎穿孔术（CLP）制备大鼠脓毒症模型，采用含有4096个大鼠基因cDNA克隆的表达谱基因芯片，检测并分析脓毒症大鼠肝组织在CLP后24h的基因表达变化，并以计算机软件筛选出差异表达的基因。结果CLP后24h共筛选出522条与空白对照组相比出现差异的基因，占基因芯片总点数的12．7％，其中244条基因表达下调，278条基因表达上调。结论脓毒症导致的多器官功能障碍综合征（MODS），涉及到一系列与细胞周期、调控、细胞凋亡、免疫相关基因、各种基本生物化学物质代谢酶类基因和能量代谢相关基因、血液相关基因、癌基因相关基因、生长因子类基因、应激反应类基因、细胞信号转导相关基因、DNA结合转录和转录调节因子相关基因、DNA复制与修复相关基因、蛋白质翻译与修饰、加工、降解相关基因等相关的基因表达异常；采用基因芯片检测技术有利于全面揭示脓毒症中的基因表达模式，快速高效地发现新的研究目标和基因治疗途径。

血必净注射液对脓毒症大鼠基因调控的影响

目的:在基因水平探讨血必净注射液对脓毒症大鼠肝脏保护作用的机制。方法:采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症模型。选择140只Wistar大鼠,其中60只随机均分为血必净治疗组和模型组,观察术后48 h和72 h的存活率;另80只按随机数字表法分为正常组、假手术组、模型组和血必净治疗组。透射电镜观察术后24 h肝脏病理学改变。采用含有4 096条大鼠基因cDNA克隆的表达谱基因芯片,检测并分析脓毒症大鼠经血必净注射液治疗后24 h肝组织的基因表达变化,并以计算机软件筛选出差异表达的基因。结果:与模型组比较,血必净治疗组大鼠48 h和72 h存活率显著升高,且血必净注射液有延长存活时间的作用(P<0.05或P<0.01)。24 h血必净治疗组肝脏病理学损伤改变明显减轻。在4 096条基因中,有差异表达的基因122条,下调基因主要涉及神经细胞与神经传导、细胞信号转导、各种基本生物化学物质代谢酶类基因、能量代谢相关基因;上调基因主要涉及细胞骨架与运动类蛋白、细胞周期调控、各种基本生物化学物质代谢酶类基因以及能量代谢相关基因。结论:血必净注射液能延长脓毒症大鼠的存活时间,并具有肝脏保护效应,其作用环节可能涉及物质代谢、脂类代谢基因、免疫、细胞信号转导等多方面。

用floral dip法对黄瓜遗传转化的初步研究

用floral dip方法进行遗传转化已经在模式植物拟南芥、部分十字花科及豆科植物苜蓿中取得成功,但在黄瓜转化中未见报道。本研究首次采用floral dip法转化黄瓜,结果表明,采用0.05% silwet-77和含质粒pX6-GAD-GLP-1的工程农杆菌EHA105转化黄瓜自交系P2及2M1,分别收获种子544和1022粒:将收获种子经60 mR/L的卡那霉素筛选,其抗性植株移栽成活后分别进行PCR及斑点杂交检测,在2个自交系中均获得了阳性转化植株,转化率分别为0.55%和0.68%。本研究首次将floral dip法用于黄瓜遗传转化并获得成功,为扩展floral dip法的应用领域、研究floral dip法在葫芦科植物上的应用奠定了基础,同时也进一步完善了黄瓜转基因手段。