α7nAChR-HDAC6通路在右美托咪啶降低幼鼠七氟烷神经毒性中的作用

目的:探讨α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)-组蛋白去乙酰化酶6(Histone deacetylase 6,HDAC6)通路在右美托咪啶降低幼鼠七氟烷神经毒性的作用。方法:7 d龄Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为5组(n=40):空白对照组(C组),七氟烷麻醉组(S组),右美托咪啶对照组(D组),七氟烷+右美托咪啶组(SD组),七氟烷+右美托咪啶+抑制剂MLA组(M组)。将幼鼠置于3%七氟烷培养箱2 h,连续3 d构建七氟烷模型。ELISA法检测幼鼠脑组织促炎因子(TNF-α、IL1β和IL-6)和脑损伤标志物(S-100β和NSE);尼式染色检测海马神经元CA1区存活情况;Western印迹检测海马α7nAChR和HDAC6蛋白表达;Y迷宫实验检测幼鼠认知水平。结果:S组幼鼠TNF-α、IL1β、IL-6和S-100β、NSE表达增加,α7nAChR降低,HDAC6增加,海马CA1区神经元存活降低,认知功能下降;右美托咪啶预处理降低七氟烷毒性;MLA可逆转右美托咪啶保护作用。结论:右美托咪啶降低七氟烷麻醉幼鼠神经毒性,其机制与α7nAChR-HDAC6通路有关。

肝缺血再灌注致大鼠海马损伤的差异表达蛋白

目的筛选肝缺血再灌注致大鼠海马损伤的差异表达蛋白。方法清洁级健康幼年雄性SD大鼠18只,2周龄,体质量20~30 g,采用随机数字表法分为2组(n=9):假手术组(S组)和肝缺血再灌注组(IR组)。采用肝缺血1 h恢复灌注的方法制备大鼠肝缺血再灌注损伤模型。于再灌注3 d时麻醉大鼠处死后分离海马组织,分析获得基因表达谱,R软件筛选差异表达基因,进一步通过Cytoscape和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析,构建蛋白质相互作用网络,确定差异表达显著蛋白,采用qPT-PCR和Western blot法验证。结果海马组织蛋白质组学分析共筛选出45个差异表达蛋白,包括36个表达显著上调的蛋白及9个表达显著下调的蛋白,通过CytoHubBA插件cystscape从PPI网络复合体中筛选出和损伤相关表达显著的蛋白:Ras相关C3肉毒菌毒物底物(RAC2)、HRAS、磷脂酰肌醇-3-激酶抑制蛋白(PTEN)和N-甲基-D-天氡氨酸离子能谷氨酸受体2b(GRIN2b)。qPT-PCR和Western blot结果表明,与S组相比,IR组大鼠海马组织RAC2、HRAS、PTEN和GRIN2b及其mRNA表达上调(P<0.05)。KEGG通路分析结果表明,差异表达蛋白在癌症中PD-L1的表达及检查点通路、长时程增强作用、Wnt信号通路的调节中显著富集。结论肝缺血再灌注致大鼠海马损伤的机制可能与RAC2、HRAS、PTEN和GRIN2b表达上调有关。