基于RT-qPCR技术的microRNA表达水平检测方法

微RNA(microRNA,miRNA)是一类细胞内源性的小分子非编码RNA,在多种生理和病理过程中发挥基因调控作用。MiRNA的表达水平定量分析是其功能研究中的重要过程,但miRNA的成熟体序列较短,因而其逆转录-定量聚合酶链式反应(reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)需采取与长链基因不同的特殊策略。现有miRNA的RT-qPCR方法可分为4种类型,包括茎环引物法、加尾法、直接逆转录法和其他方法。在PCR过程中对荧光信号的监测主要有探针法和染料法两种方式。本文对miRNA的RT-qPCR各种方法及其主要原理进行综述。