HGF+FGF4体外定向诱导人骨髓来源的多能成体祖细胞向肝样细胞分化的特征性表型鉴定

目的 探索人骨髓来源多能成体祖细胞 (hMAPCs)在肝细胞生长因子 (HGF) +成纤维生长因子 4 (FGF 4 )诱导下分化为肝细胞的可行性 ,为肝组织工程提供新的种子细胞来源。方法 取健康成人适量骨髓 ,采用梯度密度离心法分离获取单个核细胞并行贴壁培养 ,获取骨髓间充质干细胞(MSCs) ,将MSCs通过CD4 5、GlyA免疫微磁珠负分选得到hMAPCs;将获取的hMAPCs用HGF(2 0ng/ml) +FGF 4(10ng/ml)进行诱导分化 ,L 0 2人肝细胞株为阳性对照 ,未加任何诱导因素的hMAPCs为阴性对照 ;免疫细胞化学染色鉴定不同诱导分化阶段细胞的ALB、AFP、CK 18、CK 19等肝细胞特征的表型变化 ,并计数阳性细胞比率 ;Westernblot检测诱导分化第 2 1天、35天后细胞的ALB表达。结果 ALB、CK 18在诱导组中基本为阳性着色 ,CK 19均为阴性着色 ,AFP仅在诱导第 7天有阳性着色。在诱导分化第 2 1天、35天 ,ALB均有阳性表达。

骨髓基质细胞的成骨性分化

骨髓基质细胞具有多分化潜能,取材简便,来源丰富,被较多应用于组织工程研究,其中包括骨组织工程和牙周组织工程等,该文从骨髓基质细胞概述及其生物学特性、成骨潜能、成牙骨质潜能等方面作一综述。

免疫抑制剂对人胰岛细胞活性的影响

目的了解免疫抑制剂对人胰岛细胞活性的影响,探讨其在胰岛移植中的作用。方法体外分离、纯化人胰岛细胞,与不同浓度、不同种类的免疫抑制剂共同培养后,通过MTT法检测细胞活性。结果低浓度的雷帕霉素对胰岛细胞活性没有影响,高浓度(≥1ng/ml)的雷帕霉素显著降低胰岛细胞活性。赛尼哌和FTY720无论是高浓度还是低浓度对胰岛细胞活性均无影响。结论雷帕霉素对胰岛细胞有毒性作用,其程度与雷帕霉素浓度有关,赛尼哌和FTY720对胰岛细胞无明显毒性作用。