目的观察慢病毒载体转染豚鼠巩膜成纤维细胞的有效性及对细胞活性的影响。方法转染组用慢病毒携带绿色荧光蛋白(lentiviral mediated green fluorescent protein,Lenti-GFP)转染豚鼠巩膜成纤维细胞,对照组加入空白培养液,转染组按最佳...目的观察慢病毒载体转染豚鼠巩膜成纤维细胞的有效性及对细胞活性的影响。方法转染组用慢病毒携带绿色荧光蛋白(lentiviral mediated green fluorescent protein,Lenti-GFP)转染豚鼠巩膜成纤维细胞,对照组加入空白培养液,转染组按最佳感染复数(multiplicity of infection,MOI)为50、100、200、400加入Lenti-GFP,转染2d、3d、4d、5d、6d和7d后,在倒置显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况,流式细胞仪检测转染效率,MTT法检测病毒对细胞增殖的影响。结果 Lenti-GFP转染细胞后48h可以看见绿色荧光;在同一MOI值下,随时间延长转染效率增高,第5天达到高峰;在MOI为400,转染5d时转染效率达82.86%;转染5d行MTT检测显示:MOI为50～400时,同一转染时间各组IOD值与对照组比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论慢病毒载体可以在体外稳定而有效地转染豚鼠巩膜成纤维细胞,且不影响细胞活性,是巩膜成纤维细胞理想的基因转染载体。展开更多
目的探究黄酮类化合物槲皮素对大鼠胶质瘤C6细胞侵袭、迁移、增殖及其细胞周期的影响。方法将C6胶质瘤细胞分成Q0、Q50、Q100和Q1504个组;Q0组加适量二甲亚砜处理,Q50、Q100和Q150组槲皮素的浓度分别为50、100和150μmol/L。分别通过tra...目的探究黄酮类化合物槲皮素对大鼠胶质瘤C6细胞侵袭、迁移、增殖及其细胞周期的影响。方法将C6胶质瘤细胞分成Q0、Q50、Q100和Q1504个组;Q0组加适量二甲亚砜处理,Q50、Q100和Q150组槲皮素的浓度分别为50、100和150μmol/L。分别通过transwell体外侵袭实验,transwell体外迁移实验,Click-iT Edu test技术和流式细胞术检测槲皮素对其侵袭迁移,增殖能力及其细胞周期的影响。结果槲皮素处理36h后,Q50、Q100和Q150组的侵袭细胞比率分别为45.81%、13.63%和4.63%;与对照组(100%)相比,其侵袭细胞比率显著降低(P均<0.05)。槲皮素处理12h后,Q50、Q100和Q150的迁移细胞比率分别为:57.98%、33.60%和11.79%;与对照组(100%)相比,其迁移细胞比率显著降低(P均<0.05)。槲皮素处理24h后,Q0、Q50、Q100和Q150组的增殖细胞百分比分别为45.37%、21.49%、7.30%和1.12%;G0/Gl期C6细胞所占比例分别为60.86%、52.11%、35.64%、39.63%,S期分别为34.39%、40.86%、63.48%、60.36%,G2/M期分别为4.76%、6.87%、0.88%、0.11%;Q50、Q100、Q150组的G0/Gl、S、G2/M期细胞比例与Q0组比较,具有显著的统计学差异(P均<0.05);结论研究发现,槲皮素能明显降低胶质瘤细胞的侵袭迁移能力;并可通过阻滞C6细胞的细胞周期进程来抑制其增殖。展开更多
文摘目的观察慢病毒载体转染豚鼠巩膜成纤维细胞的有效性及对细胞活性的影响。方法转染组用慢病毒携带绿色荧光蛋白(lentiviral mediated green fluorescent protein,Lenti-GFP)转染豚鼠巩膜成纤维细胞,对照组加入空白培养液,转染组按最佳感染复数(multiplicity of infection,MOI)为50、100、200、400加入Lenti-GFP,转染2d、3d、4d、5d、6d和7d后,在倒置显微镜下观察绿色荧光蛋白表达情况,流式细胞仪检测转染效率,MTT法检测病毒对细胞增殖的影响。结果 Lenti-GFP转染细胞后48h可以看见绿色荧光;在同一MOI值下,随时间延长转染效率增高,第5天达到高峰;在MOI为400,转染5d时转染效率达82.86%;转染5d行MTT检测显示:MOI为50～400时,同一转染时间各组IOD值与对照组比较,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论慢病毒载体可以在体外稳定而有效地转染豚鼠巩膜成纤维细胞,且不影响细胞活性,是巩膜成纤维细胞理想的基因转染载体。
文摘目的探究黄酮类化合物槲皮素对大鼠胶质瘤C6细胞侵袭、迁移、增殖及其细胞周期的影响。方法将C6胶质瘤细胞分成Q0、Q50、Q100和Q1504个组;Q0组加适量二甲亚砜处理,Q50、Q100和Q150组槲皮素的浓度分别为50、100和150μmol/L。分别通过transwell体外侵袭实验,transwell体外迁移实验,Click-iT Edu test技术和流式细胞术检测槲皮素对其侵袭迁移,增殖能力及其细胞周期的影响。结果槲皮素处理36h后,Q50、Q100和Q150组的侵袭细胞比率分别为45.81%、13.63%和4.63%;与对照组(100%)相比,其侵袭细胞比率显著降低(P均<0.05)。槲皮素处理12h后,Q50、Q100和Q150的迁移细胞比率分别为:57.98%、33.60%和11.79%;与对照组(100%)相比,其迁移细胞比率显著降低(P均<0.05)。槲皮素处理24h后,Q0、Q50、Q100和Q150组的增殖细胞百分比分别为45.37%、21.49%、7.30%和1.12%;G0/Gl期C6细胞所占比例分别为60.86%、52.11%、35.64%、39.63%,S期分别为34.39%、40.86%、63.48%、60.36%,G2/M期分别为4.76%、6.87%、0.88%、0.11%;Q50、Q100、Q150组的G0/Gl、S、G2/M期细胞比例与Q0组比较,具有显著的统计学差异(P均<0.05);结论研究发现,槲皮素能明显降低胶质瘤细胞的侵袭迁移能力;并可通过阻滞C6细胞的细胞周期进程来抑制其增殖。
