人血小板衍生生长因子B链成熟肽基因克隆及表达

目的 获得足量的PDGF BB蛋白 ,作为PDGF BB促进骨折愈合及创伤修复等进一步功能研究和临床应用的基础。方法 用基因重组技术构建pQE PDGF B原核表达载体 ,在M15大肠杆菌中进行PDGF B单体蛋白的表达。结果 经酶切鉴定、PCR鉴定及基因测序证明 ,pQE30载体上成功地插入了PDGF B成熟肽基因 ;重组表达载体pQE PDGF B在M15大肠杆菌中得到了高效表达 ,表达量约占全菌蛋白的 15 % ,表达的PDGF B单体蛋白经SDSPAGE电泳 ,显示了一条特异蛋白带 ,分子量为 15kD左右。结论 PDGF B原核表达载体的成功构建和PDGF B单体蛋白制备纯化为生产活性PDGF BB蛋白及其进一步功能研究奠定了基础。