糖尿病性勃起功能障碍大鼠模型的建立

目的探讨利用链脲佐菌素(STZ)建立理想糖尿病性勃起功能障碍大鼠模型。方法30只SD大鼠,随机分为5组,分别为对照组、注射STZ40mg/kg组、60mg/kg组、80mg/kg组、100mg/kg组,每组6只,分别记录4d、1周、2周、3周的空腹血糖、阿朴吗啡诱导阴茎的勃起次数及体质量。结果4个时间点间的空腹血糖有显著性差异(P=0.001),不同STZ注射组别间的空腹血糖、勃起次数及体质量改变存在显著性差异(P<0.001,P=0.045及P<0.001),阿朴吗啡阴茎勃起实验的勃起次数及体质量的改变在4个时间点间不存在显著性差异(P=0.306和P=0.628)。结论最佳成糖尿病模型的STZ注射剂量应为60mg/kg,筛选糖尿病性勃起功能障碍模型的阿朴吗啡勃起实验筛选时间应定在注射STZ后的2周左右。

糖尿病性大鼠阴茎白膜弹性纤维改变对勃起功能的影响

目的了解糖尿病大鼠白膜中弹性纤维改变对勃起功能的影响。方法利用链脲佐菌素(STZ)制作糖尿病及糖尿病性勃起功能障碍模型,40只SPF级SD雄性大鼠,先按时间随机分为两组(每组20只),分别是注射STZ后7周组和4周组,再按处理因素即给予大鼠腹腔注射STZ(60mg/kg)是否成模,分为对照组(未注射STZ,5只)、糖尿病性勃起功能障碍模型组、糖尿病性非勃起功能障碍组、未成模组。利用维多利亚蓝-丽春红染色法对不同处理组的标本进行弹性纤维染色,利用彩色图文系统进行分析,以累积光密度(IOD)作为测量指标。结果各处理组间IOD存在显著性差异(F=10.433,P<0.001),糖尿病性勃起功能障碍组IOD均小于对照组、糖尿病非勃起功能障碍组及未成模组(P<0.05),糖尿病非勃起功能障碍组的IOD小于对照组(P<0.05),不同时间点间的IOD不存在显著性差异(F=0.685,P=0.415),不存在交互效应(F=0.905,P=0.452)。结论糖尿病可以导致白膜弹性纤维减少;白膜中的弹性纤维在勃起过程中起重要作用;白膜中弹性纤维的减少将导致勃起功能障碍。

链脲佐菌素致糖尿病性勃起功能障碍大鼠模型的建立

目的:对链脲佐菌素(STZ)致大鼠糖尿病(DM)性勃起功能障碍(ED)模型建立进行研究。方法:30只SD大鼠,随机分为5组:对照组、注射STZ 40 mg/kg组、注射STZ 60 mg/kg组、注射STZ 80 mg/kg组、注射缓冲液组,每组6只,分别记录4 d、1周、2周、3周的空腹血糖、阿朴吗啡(APO)诱导阴茎勃起次数及体质量。结果:空腹血糖及体质量在不同四个时间点和不同处理组间差异均有显著性(P均<0.001),APO诱导阴茎勃起实验的勃起次数在注射STZ40 mg/kg组与注射STZ 60 mg/kg组间差异存在显著性(P=0.043)。结论:STZ致大鼠DM模型的最佳注射剂量应为60 mg/kg,APO诱导剂量以100μg/kg作为筛选ED模型的标准。

高血压大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化

目的探讨高血压大鼠阴茎海绵体平滑肌是否存在表型转化及对勃起功能的影响。方法16周龄雄性自发性高血压大鼠(SHR)及其同系正常血压大鼠(WKY),测量尾动脉收缩压,颈部皮下注射阿朴吗啡后检测阴茎勃起功能,然后将大鼠分为高血压勃起功能障碍组(HBP&ED)、高血压组(HBP)和正常对照组(Control)。免疫组化染色和彩色图文分析系统分析各组大鼠阴茎海绵体中平滑肌细胞碱性调宁蛋白(calponin1)和骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达,实时荧光定量RT-PCR分析各组大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞calponin1mRNA和OPN mRNA的相对表达量。结果在大鼠阴茎海绵体中calponin1和calponin1mRNA表达情况:HBP&ED组低于HBP组(P=0.021,P=0.006)和control组(P=0.000,P=0.001),HBP组低于control组(P=0.000,P=0.015);OPN和OPN mRNA表达情况:HBP&ED组高于HBP组(P=0.000,P=0.000)及control组(P=0.000,P=0.000),HBP组高于control组(PP=0.013,P=0.000)。结论高血压大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞存在表型由收缩型向合成型转化,这种转化达到一定程度最终可能导致大鼠勃起功能障碍。

改良组织块法培养SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞

目的应用改良植块法体外培养大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞。方法15只SD雄性大鼠,随机分成3组,每组5只,分别采用组织块法、酶消化法及改良组织块法分离大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞,在含双抗及20%胎牛血清DMEM,37℃、5%CO2、95%空气的细胞培养箱静置中培养,相差显微镜观察细胞形态及扩增情况,用α-平滑肌肌动蛋白(a-SM-Actin)及结蛋白(desmin)免疫组织化学染色,鉴定细胞类型。结果α-平滑肌肌动蛋白在阴茎海绵体平滑肌细胞阳性率为96.3%,在成纤维细胞中阳性率为23.8%,结蛋白在阴茎海绵体平滑肌细胞阳性率为74.4%,在成纤维细胞中呈阴性。三组间结蛋白阳性细胞率具有显著差异,改良组织块法组结蛋白阳性细胞率高于组织块法和酶消化法组。结论结蛋白是鉴定海绵体平滑肌细胞的特异性指标,改良组织块法可获纯度更高、结构和功能良好的阴茎海绵体平滑肌细胞。

后腹腔镜配合经皮肾盂镜治疗输尿管结石合并肾结石:附2例报告

目的探讨后腹腔镜配合经皮肾盂镜治疗输尿管结石合并肾结石的可行性。方法后腹腔镜配合经皮肾盂镜治疗输尿管结石合并肾结石2例。术中暴露满意,手术时间分别为70、80min,术中出血约20ml。结果结石全部取出,术后恢复快,无并发症。结论后腹腔镜配合经皮肾盂镜治疗输尿管结石合并肾结石安全有效。

血小板源性生长因子-BB对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞增殖、迁移及表型转化的影响

目的了解血小板源性生长因子-BB(PDGFBBB)对大鼠阴茎海绵体平滑肌(CCSM)细胞增殖、迁移及表型转化的影响并初步探讨其作用机制。方法采用改良的组织块培养法培养Wistar大鼠CCSM细胞,并用细胞免疫荧光法鉴定。利用CCK-8法检测不同浓度的PDGFBB对培养的大鼠CCSM细胞增殖的影响,并筛选出最适PDGFBB作用浓度。分别用0 ng/m L PDGFBB与最适浓度PDGFBB处理CCSM细胞,利用划痕实验检测PDGFBB对CCSM细胞迁移的影响,24 h和48 h时利用q RT-PCR检测细胞中转录因子myocardin及收缩型表型标志物α-SMA、SMMHC mRNA表达水平;用最适浓度PDGFBB处理CCSM细胞0、24和48 h后,利用western blotting检测细胞中myocardin的蛋白表达水平。结果原代培养的CCSM细胞中α-SMA和smoothelin阳性率分别约为96.5%和96%;不同浓度的PDGFBB均能明显促进CCSM细胞增殖,其最适浓度为12.5 ng/m L。PDGFBB(12.5 ng/m L)能促进CCSM细胞迁移,下调CCSM细胞中myocardin、α-SMA和SMMHC mRNA表达水平(P均<0.01);在48 h内myocardin蛋白质的表达水平随着PDGFBB作用时间增加而降低。结论改良的组织块培养法可获得高纯的CCSM细胞;PDGFBB可促进CCSM细胞增殖、迁移,使细胞从收缩型向合成型转化,其机制可能是通过下调myocardin。