miR-145在糖尿病性勃起功能障碍大鼠发病机制中的作用

目的探讨miR-145基因在糖尿病性勃起功能障碍(ED)大鼠发病过程中的作用。方法建立糖尿病性ED大鼠动物模型,取阴茎海绵体组织,提取总RNA,qRT-PCR法检验miR-145在糖尿病性ED大鼠、糖尿病性勃起功能正常大鼠及正常大鼠阴茎海绵体组织中表达差异。结果 miR-145在糖尿病性ED大鼠阴茎海绵体组织中的表达量下降。结论糖尿病可导致大鼠阴茎ED,miR-145基因表达下调可能与ED发生有关。

糖尿病性大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞凋亡和增殖特征分析

目的了解糖尿病性大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSM)凋亡和增殖特征,探讨其对糖尿病性大鼠CCSM数量的影响。方法利用链脲佐菌素建立糖尿病性大鼠模型。CCSM原代培养,并进行免疫细胞化学染色鉴定。采用WST-1检测细胞增殖率,采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,采用qRT-PCR检测阴茎海绵体组织增殖细胞核抗原(PCNA)和凋亡蛋白caspase-3mRNA的表达。结果造模后12周,糖尿病组和正常对照组大鼠体质量和随机血糖水平差异显著(P<0.001)。糖尿病组大鼠阴茎勃起功能较正常对照组大鼠差。原代培养所获细胞绝大部分为CCSM。糖尿病组CCSM的增殖速度明显低于正常对照组(P<0.001)。在生长因子刺激下,糖尿病组CCSM增殖速率也慢于正常对照组(P<O.05)。糖尿病组CCSM凋亡细胞个数及凋亡率均显著高于正常对照组(P<0.001)。与正常对照组比较,糖尿病性大鼠阴茎海绵体组织中PCNAmRNA表达下降,而caspase-3 mRNA表达增强,差异显著(P<0.001)。结论在长期糖尿病状态下,细胞凋亡增加与细胞增殖减慢并存,它们共同作用导致CCSM数量明显减少。

降钙素基因相关肽对糖尿病性ED大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化的影响

目的:了解降钙素基因相关肽(CGRP)对糖尿病性ED大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化的影响。方法:利用链脲佐菌素建立糖尿病及糖尿病性ED大鼠模型。阴茎海绵体平滑肌细胞原代培养,并进行免疫细胞化学染色鉴定。实验分为2组:正常对照组和糖尿病性ED大鼠组。不同浓度(0、10,60,100 nmol/L)CGRP作用24h后,利用qRT-PCR检测各组细胞碱性调宁蛋白和骨桥蛋白mRNA的表达。结果:各组原代培养阴茎海绵体平滑肌细胞α-肌动蛋白阳性细胞率为(95.94±0.03)%。与正常对照组比较,糖尿病组ED大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞碱性调宁蛋白mRNA表达显著减少(4.41±0.29 vs 10.35±0.62,P<0.01),而骨桥蛋白mRNA表达水平显著上调(5.28±0.32 vs 1.32±0.24,P<0.01)。当CGRP作用的终浓度为100 nmol/L时,糖尿病组大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞经CGRP作用后,与未经其作用相比,碱性调宁蛋白mRNA表达显著上调(6.90±0.22 vs 4.41±0.29,P<0.01),而骨桥蛋白mRNA表达水平显著减少(3.26±0.31 vs 5.28±0.32,P<0.01)。结论:CGRP可使糖尿病性ED大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型从合成型向收缩型转化。

糖尿病性勃起功能障碍大鼠的基因表达谱芯片数据分析

目的研究糖尿病性勃起功能障碍大鼠基因表达谱芯片数据,应用生物信息学方法挖掘与糖尿病性勃起功能障碍相关的基因,初步探讨其功能及相应分子机制。方法应用GeneSifter在线分析软件对5个正常大鼠阴茎组织和5个糖尿病性勃起功能障碍大鼠阴茎组织基因芯片数据进行分析。结果筛选得到661个差异表达基因,其中280个上调,381个下调。其中kruppel-like factor 5(klf5)基因上调表达4.01倍,ceruloplasmin(cp)基因上调表达5.14倍,collagen,type Ⅺ,alpha1基因下调表达5.84倍,collagen,type Ⅰ,alpha1下调表达5.77倍。661个差异表达基因的功能涉及糖蛋白生物合成、胶原纤维组建、血管发生过程、脂质代谢、细胞增殖等多种重要的生物学过程,以及脂肪酸代谢、神经变性机能紊乱、细胞外基质受体相互作用等信号通路。结论应用生物信息学方法分析糖尿病性勃起功能障碍大鼠基因表达谱发现上调的klf5、cp基因和下调的collagen基因在糖尿病性勃起功能障碍的发病机理中起重要作用,生物信息学方法可为糖尿病性勃起功能障碍发病机制的研究开辟新思路。

改良阴茎海绵体压力测定方法在建立糖尿病性ED大鼠模型中的应用研究

目的评价改良阴茎海绵体压力(intracavernous pressure,ICP)测定方法在建立糖尿病性勃起功能障碍(erectile dysfunction,ED)大鼠模型中的应用。方法将40只8周龄雄性SD大鼠随机分为糖尿病组及正常对照组,检测大鼠ICP及颈动脉压力(arterial pressure,AP),改良法采用带倒刺的穿刺针刺入阴茎脚。结果在糖尿病组及正常对照组中,与传统方法比较,采用改良阴茎海绵体压力测定方法所测的ICP与AP结果均无统计学意义(P>0.05),但改良法穿刺针不易脱出,保证了实验顺利进行,成功率大大提高(传统法成功率75%,改良法100%)。结论改良的带倒刺的穿刺针刺入阴茎脚测定大鼠阴茎海绵体压力具有稳定、准确、方便和不易脱出的特点,对筛选糖尿病性ED大鼠动物模型、评价大鼠阴茎勃起功能具有重要意义。

经腹腔与经腹膜外途径腹腔镜前列腺癌根治术疗效比较的Meta分析

目的:用Meta分析评价经腹腔入路腹腔镜前列腺癌根治术(TLRP)与经腹膜外入路腹腔镜前列腺癌根治术(ELRP)治疗局限性前列腺癌的疗效和安全性。方法:通过计算机检索Medline、Cochrane临床对照试验中心数据库、中国学术期刊全文数据库、万方数据库和中国生物医学文献数据库,按纳入和排除标准,两位研究员独立进行文献筛查、质量评价和数据提取,交叉核对,并用Stata12.0软件进行Meta分析评价手术时间、术中出血量、术后尿管留置天数、肠功能恢复时间、术后住院天数等相关指标。结果:共纳入9篇文献,共942例患者,其中行TLRP患者492例,行ELRP患者450例。Meta分析结果显示:TLRP与ELRP两者在手术时间[SMD=0.60,95%CI(-0.06,1.26)]、术中出血量[SMD=0.01,95%CI(-0.35,0.36)]、术后留置尿管时间[SMD=0.10,95%CI(-0.21,0.40)]、术后住院天数[SMD=0.45,95%CI(-0.01,0.91)]方面无统计学差异,在肠功能恢复时间[SMD=1.18,95%CI(0.26,2.10)]有显著性差异。结论:TLRP和ELRP在治疗局限性前列腺癌在手术时间、术中出血量、留置尿管时间、术后住院天数方面无统计学差异,在肠功能恢复时间上,ELRP比TLRP更具有优势。

血小板源性生长因子-BB对SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞表型转化影响的初步研究

目的:研究血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)对SD大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(CCSMC)表型转化的影响。方法:改良组织块法原代培养大鼠CCSMC,并进行细胞免疫荧光鉴定。实验分为空白对照组和不同浓度(5、10、20、40 ng/ml)PDGF-BB组,处理24 h;以及空白对照组和20 ng/ml PDGF-BB作用细胞不同时间(24、48、72 h)组,利用qRT-PCR检测各组细胞α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、平滑肌肌球蛋白重链(SMMHC)、碱性调宁蛋白和骨桥蛋白(OPN)mRNA的表达。结果:原代培养CCSMCα-SMA阳性细胞率达95%以上。与空白对照组比较,不同浓度PDGF-BB作用大鼠CCSMC后α-SMA、SMMHC、碱性调宁蛋白的mRNA表达显著减少(P均<0.05);OPN mRNA表达水平显著上调(P<0.05)。与空白对照组比较,随20 ng/ml PDGF-BB作用细胞时间的延长,α-SMA、SMMHC、碱性调宁蛋白的mRNA表达显著减少,OPN mRNA表达水平上调,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:PDGF-BB可促使SD大鼠CCSMC表型从收缩型向合成型转化。

“仁”为医家之本——浅析医患现状及育人对策

随着我国社会主义市场经济的推进,医学科学快速发展。科技的日新月异与道德精神文明的滞后缓行所演化的矛盾也在不同的社会领域多元呈现,医患关系成了日益突出的社会问题。21世纪的医学人才不仅要有高深的专业知识,优秀的政治素质,良好的心理机制,还应具备深厚的人文素养才能使日渐突现的医患关系得以缓解。本文将从人文关怀、医患沟通、道德伦理等方面,浅谈当前医患关系的现状,并结合医学教育,让医学生树立以仁为本的理念,做到理解、尊重、关心患者,为构筑和谐的新型医患关系而立论张本。

PDGF-BB对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞增殖和细胞周期的影响

目的探讨血小板源性生长因子BB（PDGF-BB）对大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞（CCSMC）增殖和周期的影响。方法使用改良组织块贴壁法原代培养大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞，将细胞分为空白对照组和不同浓度PDGF-BB处理组，分别采用MTS法和流式细胞术检NPDGF-BB对CCSMC增殖和周期的影响。结果MTS法提示PDGF-BB促进CCSMC增殖，且在一定时间范围和浓度范围内分别呈时间依赖和浓度依赖；流式细胞术结果显示PDGF-BB作用后G0／G1期细胞由（90．79±3．46）％减少至（77．57±5．72）％；而S期的细胞由（7．85±2．68）％升高至（16．47±4．42）％；G2／M期由（2．46±1．25）％升高至（5．96±2．18）％，两组间差异具统计学意义（P〈0．05）。结论PDGF-BB可促进大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞增殖。