线粒体单核苷酸多态性复合扩增体系在疑难检材中的法医学应用研究

目的应用线粒体单核苷酸多态性(SNPs)的复合PCR扩增体系应用于法医检验案件中的陈旧血痕、脱落细胞检材、腐败降解检材及骨组织等疑难检材,为解决法医学检验疑难检材的难题提供一种新的方法。方法用IdentifilerTM试剂盒进行目前使用的STR分型及已建立的18个线粒体SNPs(16个位于编码区和2个控制区)位点复合扩增毛细管电泳荧光检测体系,并行对照检验案件中的陈旧血痕、脱落细胞、腐败肌肉、软骨以及牙齿、骨等各种疑难检材。结果对于上述检材,STR与线粒体SNPs的检验成功率均达到80%以上,线粒体SNPs高于STR。对于高度腐败的肌肉及软骨、骨骼检材,线粒体SNPs的检验成功率明显高于STR。结论所建立的线粒体SNPs复合PCR扩增体系在疑难检材检验中具有良好的应用前景。

23个STR基因座荧光复合扩增体系的法医学应用评估

目的评估新建立的23个STR复合扩增体系EX23的法医学应用价值。方法使用磁珠法提取样本DNA,应用23个STR复合扩增体系进行扩增,ABI3130XL遗传分析仪对扩增产物进行电泳,GeneMapperID 3.2软件进行基因分型,对法医学应用参数、灵敏度、种属、脱落细胞检材及降级检材分型效果进行观察,并与Sinofiler试剂盒比较。结果 DNA模板量在0.05~1.00ng时,各基因座分型结果清晰准确,均衡性好、特异性强。应用该复合扩增体系检验混合样本、降解检材及脱落细胞检材,均能获得正确的分型结果。统计结果显示该23个STR基因座累计个人识别（TDP）率达0.999999999,三联体累计非父排除率（CPE）达0.999999997。结论新建立的23个STR复合扩增体系分型效果良好,在广东地区汉族人群中具有高度多态性,可满足日常法医鉴定的需要。

法医学常用15个STR基因座的突变分析

目的观察Sinofiler系统15个短串联重复序列(short tandem repeat,STR)基因座的突变现象和特点。方法选择Sinofiler试剂盒检测的案件8261例,筛选该试剂盒15个STR基因座的突变事件,判断突变等位基因的来源,统计各基因座的突变率,分析突变的特点。结果在15个基因座上发现175个突变事件,167例(95.43%)为一步突变,5例(2.86%)为二步突变,2例(1.14%)为三步突变,1例(0.57%)为五步突变。平均突变率为1.30×10^(-3)(95%CI 1.12×10^(-3)~1.51×10^(-3)),各基因座的突变率介于0.45×10^(-3)~2.56×10^(-3)。父、母来源突变比例为13.33∶1。增加重复单位和减少重复单位的突变事件比值为1.10∶1。15个基因座的突变率与杂合度之间没有统计学上的相关性。结论获得的15个STR基因座突变资料在亲子鉴定中有重要的应用价值。

在医科大学开设《生活方式与健康》选修课的体会

随着我国疾病谱与死因构成向慢性非传染性疾病的转变,不良的生活方式成为日益重要的常见病、多发病的病因。改善生活方式是预防这些疾病的最为经济和有效的方法。医科大学的学生(包括医学类与非医学类),由于某些文化传统根源,他们对生活方式的认识仍存在误区,仍不同程度地存在违反现代健康理念的行为。本课程着眼于饮食结构、人格和情绪特征、文体活动、环境有害物的接触以及自我保健能力的差异等方面,阐述生活方式与健康的密切关系,期望弥补医学院校大学生知识结构的盲点,提高其健康认知水平和自我保健能力,以利于科学有效的预防疾病的意识和方法向家庭和社会广泛辐射。通过对问卷调查结果进行分析,发现本课程触动了大部分学生的既有观念,并改善了他们的生活方式。

一种快速聚合酶链式反应方法的探究和法医学应用

目的优化和建立一套快速聚合酶链式反应(PCR)扩增体系和程序,缩短扩增时间,提高短串联重复序列分型的速率和办案效率。方法运用AmpFLSTR?Identifiler?Plus试剂盒和7种快速扩增酶进行筛选和优化,最后对筛选出的酶优化其扩增体系和扩增程序,并对几种常规检材中提取的DNA进行扩增和检测,然后对其分型结果进行验证和讨论。结果最终优化的扩增程序由常规的3 h左右缩短至24 min,DNA检验结果与常规方法一致。结论应用优化后的快速PCR扩增体系可以成功准确扩增DNA样本,显著提高DNA分型速率。

六色荧光标记同步检测27个STR基因座的法医学应用评估

目的探讨同步检测27个STR基因座多态性及法医学应用价值。方法用Power PlexFusion 6C荧光标记系统对274份广东汉族无关个体的DNA进行PCR扩增,在3130XL遗传分析仪上进行电泳分析。用Gene MapperID-X软件分析基因型,用Power Stats v1.2软件分析群体遗传学参数。并观察该系统对微量及混合检材的检验效果。结果 23个常染色体STR基因座遗传多态性高,在广东汉族人群的累积个人识别率为1-2.3×10-28,累积非父排除率为0.999 999 999。DYS391、DYS570和DYS576的GD值分别为0.481、0.791和0.751,共检出58种单倍型,单倍型多态性为0.337。微量检材STR基因座检出率为93.33%,混合检材Y-STR基因座检出率为96.67%。结论 Power PlexFusion 6C系统遗传多态性高,可以用于亲缘鉴定、个体识别以及数据库建设。

MALDI-TOF-IMS在生物医学中的研究进展及法医学应用展望

基质辅助激光解吸/电离-飞行时间质谱成像(matrix-assisted laser desorption/ionization time-offlight imaging mass spectrometry,MALDI-TOF-IMS)技术通过对生物组织切片的扫描,分析切片中的未知组分,获取组织的分子成像图,已成为研究生物标志物、脂类分布、药物代谢等方面的有力手段。本文对该技术在蛋白质鉴定、临床应用、药物研发、脂类研究及脑损伤方面的应用进行了综述。

在医学八年制中开展卫生学全英教学的体会

临床医学八年制教育的培养目标是培养素质高、基础厚、专业宽、创新能力强和具有独立研究能力的高层次的复合型人才,熟练掌握和综合应用英语是八年制教学中的重点。卫生学是一门涵盖广泛内容的必修基础类课程,本着培养国际化、高素质、综合型人才的目的,展开全英教学,为学生在以后的学习工作中进行国际交流打下良好基础。该文从师资配备、教材选择和教学模式等方面介绍了在卫生学全英教学过程中的体会和认识,期望为八年制全英教学的改革提供一些信息。

多重置换扩增技术用于法医学微量DNA检测效果

目的探讨多重置换扩增(MDA)技术对法医学微量DNA样品STR检测分型的效果。方法用MDA技术对不同模板量DNA进行全基因组扩增(WGA),扩增产物用实时荧光定量PCR技术定量、用Profiler PlusTM试剂盒检测基因型。结果该方法可对模板DNA增加104～106倍。1ng样品DNA的MDA产物可获得9个STR基因座和Amelogenin性别基因座的准确分型结果;低于0.1ng的样品DNA经MDA扩增后,基因座检出数增加,但可见等位基因不平衡或丢失现象。结论MDA技术可有效增加DNA模板量和提高微量DNA分型效果。但样品DNA量低于0.1ng时,MDA产物的STR分型结果判读须慎重。

PowerPlex21系统在亲子鉴定中的应用评估

目的评估PowerPlex21系统20个STR基因座在亲子鉴定中的检验能力。方法用PowerPlex21系统检测1 704例亲子鉴定,评估该系统在亲子鉴定中的排除能力和突变率。结果采用PowerPlex21系统,累积非父排除率和累积个体识别力均大于0.999 999 999 999 999 999 999 999 999 999。1704例亲子鉴定中有265例排除亲子关系,最常见为8~10个基因座排除;44例表现为1个STR基因座突变。结论 PowerPlex21系统用于亲子鉴定是高效的。

21-plex线粒体SNPs复合检测体系的建立及在广东地区汉族人群遗传多态性中的研究

目的:应用SNaPshot技术建立线粒体SNPs高通量检测体系并对广东汉族人群进行遗传多态性研究。方法:从线粒体基因组中选择21个SNPs位点,自行设计引物进行复合位点扩增,其PCR产物进行纯化和复合单碱基延伸并结合毛细管电泳,实现对线粒体多个SNPs位点的高通量检测。结果:建立了21-plex线粒体SNPs复合检测体系,并调查这21个SNPs位点在广东地区汉族人群的多态性,共检测到90种单倍型,单倍型多样性为97.1%。结论:初步研究结果显示所建立的线粒体SNPs复合检测体系,在法医学实践中具有良好的应用前景。

CBL结合PBL教学模式在法医临床学中的应用

法医临床学是法医学一门重要的分支学科,法医临床鉴定往往对案件的定罪量刑起到至关重要的作用,是一门实践性和应用性很强的学科。传统的教学方法既不能激发学生的学习兴趣,也已不适应学科的发展需求。为了克服传统教学方法的缺点,将以问题为基础的教学法(PBL)和以案例为基础的教学法(CBL)联合应用于法医临床学的教学中,可提高学生的法医临床鉴定技能和综合学习能力,达到提高法医临床学教学质量的目的。

荧光标记线粒体DNA SNPs检测体系建立及单倍型频率调查

【目的】利用荧光标记-单碱基延伸技术建立线粒体DNA SNPs高通量检测体系并应用于法医学检案。【方法】从线粒体DNA上选择18个SNPs(16个位于编码区和2个控制区)位点,自行设计PCR引物和单碱基延伸引物并结合毛细管电泳,实现对线粒体多个SNPs位点的高通量检测。【结果】建立了18个线粒体DNA SNPs复合检测体系,并调查这18个SNPs位点在广东地区汉族人群的单倍型频率。【结论】所建立的线粒体SNPs复合检测体系,在法医学应用中具有良好的应用前景。

内皮型一氧化氮合酶解偶联与动脉粥样硬化关系的研究进展

动脉粥样硬化经常发生在大中动脉，其斑块由脂质、白细胞、血管平滑肌细胞多种成分组成，病变发展到晚期，坏死中心会出现胆固醇结晶及钙沉积。而具临床意义的是斑块有可能突然破裂，会导致血栓形成而阻塞血管，主要表现为心肌梗死和脑卒中，严重影响人类的生活质量和健康。

判别函数在法医学溺死诊断中的应用

目的探讨判别函数在法医学溺死诊断中的价值。方法运用环境扫描电镜、能谱分析仪及图像分析软件观测生前入水溺死、死后抛尸入水尸体,根据异物颗粒面积、最大直径、整体密度等参数建立与溺死、死后入水判别函数。结果异物颗粒的最大直径和整体密度有助于判别函数鉴别溺水及死后抛尸入水,交叉验证判别函数符合率为89.0%,与传统方法相比,该法在保证实验结果可靠性的同时具有简便、快捷、客观等优势。结论判别方程对法医学实践鉴别溺水、死后入水具有积极的提示及勘验指导价值。

急性成人肠炎致死法医学鉴定1例

在法医学检案中,因急性出血性坏死性肠炎猝死的报道很多,但急性成人肠炎致死的案例鲜有报道。此外,本案被鉴定人曾在非法诊所治疗并服用成分不明的药物,检案过程尚需排除因不明药物致死的可能性,从而为类似案件的鉴定提供参考。

新生儿肝破裂法医学鉴定2例

1案例资料1．1案例一简要案情张某，男，1天，足月儿。某年5月22日凌晨3时由诊所医生于家里接生。当天下午起出现呕吐白色泡沫、面色苍白、哭声微弱的现象。次日9时送至当地市人民医院，查体示：体温不升，

17个Y-STR基因座在广东汉族人群中的单倍型频率及突变率

目的调查Y-filer检测系统中17个Y-STR基因座在广东汉族中的多态性及遗传稳定性,研究其法医学应用效能。方法应用Y-filer检验体系对广东汉族1000个男性无关个体及1000对确定亲子关系的父子进行Y-STR分型,计算17个Y-STR基因座的的单倍型频率,对发生突变的基因座进行单基因座扩增和测序验证后计算突变率。结果 1000个广东男性无关个体中没有发现相同的单倍型,单倍型多样性达到1.0000,17个Y-STR基因座的基因多样性值在0.4285（DYS391）~0.9654（DYS385a/b）之间。1000对父子17个基因座共观察17 000次减数分裂,共发现46次突变,平均突变率为0.0027（95%CI,0.0020~0.0036）。结论 Y-filer检测系统在广东汉族人群中具有高度多态性,在父权鉴定、个体识别等法医学应用中具有重要价值。

N-乙酰半胱氨酸减轻大鼠纹状体甲基苯丙胺神经毒性

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)对甲基苯丙胺(METH)中毒大鼠模型纹状体神经毒性的影响及作用机制。方法制备大鼠中毒模型,在METH前30min腹腔注射(ip)NAC,应用二氯荧光乙酰乙酸盐作为荧光指标检测纹状体ROS的含量,高效液相色谱方法检测DA浓度,TUNEL方法观察神经元损害情况,并计算神经元的凋亡率。结果NAC预处理能降低纹状体内ROS的含量,减轻DA浓度的下降程度,减少神经细胞的凋亡。结论NAC通过抑制METH诱导纹状体的氧化应激,减轻METH多巴胺能神经毒性。