医科院校基础化学实验教学的研究与实践

分析了医科院校基础化学实验教学的现状,并从确立明确的教学目标、改革实验教学体系、更新实验教学内容、强化实验教学环节和手段、调动学生的积极性及增强学生的动手能力、充分发挥教师的指导作用、充分利用多媒体教学手段、改革实验报告形式、对学生实验进行全面考核等多方面提出了一些改进的办法及对策,取得了较好的效果.

虎杖苷对缺血缺氧下平滑肌细胞蛋白激酶C的影响

目的 观察虎杖苷对缺血缺氧作用下血管平滑肌细胞(VSMC)蛋白激酶C(PKC)活性的影响以探讨其抗休克作用的机制。方法 取大鼠胸主动脉培养VSMC,用Koyama方法复制VSMC缺血缺氧模型。用液体闪烁计数仪测定PKC的活性。结果 缺血缺氧状态下VSMC胞浆PKC的活性上升(vs正常组P<0 .05),但胞膜的PKC活性下降(vs正常组P<0 .05),经PD治疗后胞浆PKC的活性下降(vs缺血缺氧组、治疗对照组P<0. 05,vs正常组P>0 05 ),胞膜的PKC活性上升(vs缺血缺氧组、治疗对照组P<0 .05,vs正常组P>0 .05)。结论 PD对缺血缺氧作用下的VSMCPKC的活性有调节作用,这可能是PD抗休克作用的分子机制之一。

MBL对树突状细胞体外分化成熟的影响

目的: 探讨甘露聚糖结合凝集素 (MBL)对人外周血单核细胞来源的树突状细胞 (MoDC)分化成熟的影响。方法: 以天然人MBL刺激MoDC, 在倒置显微镜下观察DC的形态; 用FACS分析DC的表型; 用 3H- TdR掺入法测定DC刺激同种异体T细胞增殖的能力; 以酵母多糖颗粒吞噬试验评估DC的抗原摄取能力; 用ELISA检测DC培养上清中IL- 12和TNF- α的含量。结果: MBL刺激的DC表面分子CD1a、CD83、CD40、CD80、CD86和MHC DR的表达均上调,摄取酵母多糖颗粒的能力降低, 激发初始T细胞增殖的能力加强, 分泌的IL- 12增多但几乎不分泌TNF- α。结论: MBL能诱导DC分化成熟, 提示其可能通过调节DC的功能而参与获得性免疫应答。

中国白族、佤族和拉祜族人群MBL基因启动子区SNP的研究

目的:研究中国白族、佤族和拉祜族人群甘露聚糖结合凝集素(MBL)基因启动子区单核苷酸多态性(SNP)。方法:抽提人外周血白细胞基因组DNA,建立SSP-PCR及PCR-分子灯塔实时分析技术,检测MBL基因启动子区SNP位点-550(G/C,称H/L等位基因)、-220(G/C,X/Y等位基因)和 4+4(C/T,P/Q等位基因),分析其单倍型及基因型频率。结果:从 71例白族、73例佤族和 94例拉祜族人中,分别检出等位基因型LYP/LYP4例(5.6% )、4例(5. 5% )和 2例(2. 1% );HYP/LYQ6例 (8. 5% )、11例(15. 1% )和 12例 (12. 8% );LYP/LYQ21例 (29. 6% )、14例 (19.2% )和 51例 (54. 3% );LXP/LXP1例 (1. 4% )、2例 (2. 7% )和 0例;LYQ/LYQ10例(14. 1% )、14例 (19. 2% )、7例 (7. 4% );LXP/LYQ10例(14. 1% )、13例 (17. 8% )和 15例 (16. 0% );HYP/LYP4例(5. 6% )、3例(4. 1% )和 4例(4. 3% );HYP/LXP3例(4. 2% )、1例(1. 4% )和 0例;HYP/HYP12例(16. 9% )、11例(15. 1% )和 3例(3. 2% )。结论:中国白族、佤族、拉祜族普通人群之间,MBL基因启动子区等位基因L/H的分布存在差异(P<0. 01),X/Y和P/Q无统计学意义的差异(P>0. 05);各单倍型和各基因型的分布存在差异(P<0. 01);基因型LYP/LYQ和LXP/LYQ在 3个民族均有较高的分布,其总体频率分别达 36. 1%及 16.

基质金属蛋白酶在新生兔机械通气炎性反应中的作用

目的研究基质金属蛋白酶(MMPs)在新生兔机械通气肺损伤中的作用。方法新生兔75只,分为正常对照组3只,余下72只按2×2×3析因设计随机分为在高体积分数氧(100%)、低体积分数氧(45%)组,每组又分为高吸气峰压(PIP)、低PIP组共4组进行机械通气。通气中选取1、3、6 h 3个时间点活杀取肺,ELISA法检测肺组织匀浆MMP-2、MMP-9水平,同时测肺湿、干比,并结合病理片分析。结果1.高氧组MMP-2水平增加,同正常组相比有显著性差异。2.高氧组MMP-9均值低于正常组,有显著性差异;低氧组MMP-9均值高于正常组,但差异无意义;不同的PIP对MMP-9的影响无意义。3.MMP-2与MMP-9间呈正相关,同肺组织湿、干比呈正相关。结论新生兔机械通气6 h内,高氧通气能上调MMP-2,下调MMP-9,通气时机械拉伸上调MMP-2。机械通气影响MMPs合成,MMPs在新生兔机械通气肺损伤中发挥重要作用。

霍奇金淋巴瘤CD99基因表达缺失的意义

目的 :探讨经典型霍奇金淋巴瘤 (cHL)R S细胞CD99蛋白表达情况 .方法 :将 8例cHL全部按WHO新分类标准进行确诊 ,采用免疫组织化学SABC法进行CD99染色 ,观察每一病例R S细胞阳性表达率 ;流式细胞仪检测B淋巴瘤DG75细胞株 ,T淋巴瘤Jurkat细胞株 ,霍奇金淋巴瘤L4 2 8,HDLM 2细胞株CD99蛋白表达情况 .结果 :8例cHL中R S细胞CD99阴性表达率为 10 0 % (8/8) ;DG75细胞株CD99表达阳性 (87.3± 0 .4 ) % ,Jurkat细胞株CD99表达阳性(96 .8± 0 .6 ) % ,L4 2 8细胞株CD99表达阳性 (3.8± 0 .4 ) % ,HDLM 2细胞株CD99表达 (6 6 .4± 0 .3) %阳性 .结论 :CD99基因在霍奇金淋巴瘤表达缺失可作为诊断cHL的参考依据 .

模拟鼠伤寒脂多糖表位合成肽的初步研究

目的探讨3种模拟LPS表位的合成肽的抗原性。方法固相合成模拟LPS表位的线性十二肽P12(GPPQW-FFSQPQL)、环七肽13a(SACPSWASFWCGG)和13b(SACFQFYPAACGG),与钥孔嘁血蓝蛋白或蓝载体交联,ELISA鉴定合成肽-载体交联物与抗LPS抗体的反应性,竞争ELISA鉴定游离的合成肽对抗LPS抗体与LPS、表达LPS模拟位的阳性噬菌体克隆结合的抑制。结果合成肽-载体交联物可与LPS抗体结合;游离环七肽13a可抑制抗LPS单克隆抗体与LPS结合(IC50=125μg/mL)及抗LPS单克隆抗体与阳性噬菌体克隆K1的结合(IC50=15.6μg/mL);游离十二肽P12抑制抗LPS单克隆抗体与LPS结合(IC50=550μg/mL)及阳性噬菌体克隆P12与抗LPS单克隆抗体结合(IC50=375μg/mL);游离环七肽13b可抑制噬菌体克隆P4和LPS多克隆抗体的结合(IC50=31.25μg/mL)。结论模拟LPS表位的合成肽可模拟LPS表位的抗原性,环肽优于线性肽。

经络诊断的理论研究

对经络诊断进行了系统的整理,从理论渊源、经络与舌诊脉诊、经络诊断的分类等方面对经络诊断方法进行了阐述。

驻戈壁边防军人生活质量与睡眠质量关系的研究

目的调查驻戈壁边防军人生活质量与睡眠质量之间的关系。方法采用世界卫生组织生活质量评定量表(WHOQOL-BREF)和匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)量表,对302名驻戈壁边防军人进行测查。结果①驻戈壁边防军人生活质量的生理、心理、社会及环境领域得分分别为(14.45±2.21)分,(13.98±2.48)分,(14.26±2.72)分,(11.89±2.63)分,其中环境领域得分偏低;PSQI总均分为(6.79±3.39)分,49.7%军人存在睡眠质量问题。②不同睡眠质量者在生活质量各领域得分有显著差异(P<0.05),睡眠质量越好,生活质量各领域得分越高;③相关分析表明,生活质量生理、心理和环境领域与睡眠质量各因子均有不同程度的相关,多元逐步回归分析发现,日间功能障碍是影响生活质量最主要的因素。结论改善驻戈壁边防军人睡眠质量,有助于提高官兵生活质量水平。

灯盏细辛和灯盏花素对戊巴比妥钠致小鼠催眠的影响

目的:观察灯盏细辛和灯盏花素对戊巴比妥钠催眠小鼠的影响。方法:将小鼠随机分为灯盏细辛组、灯盏花素组、纳洛酮组及生理盐水组,观察对阈上剂量和催眠剂量的戊巴比妥钠致小鼠睡眠的影响,并考察了对小鼠自发活动和对小鼠的平衡功能影响。结果:灯盏细辛组、灯盏花素组及纳洛酮组与生理盐水组比较,能显著延长阈上剂量戊巴比妥钠致小鼠入睡时间,缩短睡眠持续时间(P＜0．05);缩短催眠剂量戊巴比妥钠所致小鼠翻正反射消失的持续时间(P＜0．05);对小鼠自发活动和小鼠平衡功能无明显影响。结论:灯盏细辛和灯盏花素对戊巴比妥钠催眠小鼠有催醒作用。

LMP1与绿色荧光蛋白融合基因慢病毒的制备

目的:制备EB病毒LMP1与绿色荧光蛋白(GFP)融合基因慢病毒.方法:采用RT-PCR方法获得LMP1全外显子片段,使之克隆到带绿色荧光蛋白慢病毒表达载体质粒FUGW中.经限制性酶切、PCR扩增和测序鉴定重组载体.在脂质体介导下将慢病毒包装系统的包装结构基因pCMV.△8.9、包膜基因VSVG、目的基因FUGW-LMP1导入病毒包装细胞293FT,荧光显微镜检测基因的表达,包装成病毒后,收集病毒上清,浓缩,PCR鉴定.结果:限制性内切酶酶切和DNA测序分析证实RT-PCR获得的LMP1 cDNA片段与Gen-Bank中的数据完全吻合;LMP1准确克隆入FUGW的多克隆位点.慢病毒的3种质粒可高效转染入293FT细胞,荧光显微镜下观察可见大量的绿色荧光.绿色荧光位于细胞的胞膜及胞质.结论:成功制备了LMP1与GFP融合基因慢病毒,为研究EBV瘤基因LMP1在多种疾病中的作用机制提供适合的稳定转染细胞的载体.

胸腺基质细胞对热应激小鼠胸腺细胞亚群变化及HSP70表达的影响

目的探讨胸腺基质细胞(TSC)对热应激小鼠胸腺细胞的调节作用。方法应用光镜、电镜、流式细胞术等观察初代培养的TSC对热应激胸腺细胞发育的调节作用。结果 TSC可大量粘附和吞噬胸腺细胞,使热应激胸腺细胞数量明显减少,但尚存的胸腺细胞中活细胞比例却明显增加,凋亡率明显减少。TSC可促进热应激胸腺细胞HSP70表达增加,使热应激胸腺细胞的DP及SP细胞,尤其是DP细胞数量明显减少。结论 TSC可清除大量的热应激胸腺细胞,TSC促进热应激胸腺细胞HSP表达增高可能具有双重意义:既可保护胸腺细胞,又可促进TSC识别和吞噬已受损的或凋亡的胸腺细胞。

新生兔机械通气肺损伤MMP-9与白细胞相关性的研究

目的:研究新生兔机械通气肺损伤中基质金属蛋白酶与灌洗液中白细胞相关关系及机械通气肺损伤的发生机制。方法:对生后日龄1～5天的新生兔72只,按2×2×3析因设计,随机分配在高浓度氧、低浓度氧两组,每组又分为高吸气峰压、低吸气峰压共4组进行机械通气,通气中选取1h、3h、6h3个时间点活杀取肺,左肺灌洗液细胞计数,沉渣涂片细胞分类,测湿干比,并结合病理片分析。ELISA法检测肺组织匀浆中MMP-9的浓度。结果:MMP-9与白细胞总数、单核巨噬细胞正相关,与湿干比呈正相关,与淋巴细胞、分叶核细胞不相关。结论:新生兔机械通气肺损伤,巨噬细胞可能是MMP-9的主要来源,巨噬细胞通过分泌MMP-9参与肺损伤的发生。

小鼠A20RS样细胞模型的初步建立

目的:研究EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)转染小鼠 B淋巴瘤细胞A20能否诱导出霍奇金淋巴瘤H/R S样细胞. 方法:采用RT PCR方法获得LMP1全外显子片段,使之克隆 到真核表达载体PLXSN中,限制性酶切、PCR扩增和测序鉴 定重组载体;运用脂质体介导转染技术,将LMP1的真核表达 重组质粒和空载体质粒导入A20细胞.结果:扩增的 LMP1cDNA长度为1.1kb,测序结果与已知序列吻合,重组真 核表达质粒经酶切鉴定表明获得正确重组子;经G418筛选获 得稳定整合了LMP1和空载体的亚克隆细胞,WesternBlot印迹 鉴定PLXSN LMP1组有LMP1蛋白的表达,出现了H/R S样细 胞形态改变.结论:建立了小鼠A20RS样细胞模型,为下一步 建立霍奇金淋巴瘤动物模型,研究其发病机制奠定了基础.

洋葱提取物对高血脂小鼠的降血脂作用

目的 :研究洋葱水提取物和醇提物对高血脂小鼠的降血脂作用。方法 :高脂饮食喂养小鼠 10d ,造成高脂血症动物模型 ,以洋葱提取物喂养高脂血症小鼠 3d ,检测小鼠血中胆固醇、甘油三酯的含量。结果 :洋葱水提物和醇提物均具有显著的降低胆固醇、甘油三脂的效果。结论

后装治疗与X刀的现状及其临床比较

目前后装技术与X刀在临床中应用广泛,各有所长,在某些肿瘤治疗中,两者联合应用的疗效比常规治疗好。随着体部定位技术和X刀的发展,X刀分为传统X刀和微型X刀,其中微型X刀具有传统X刀和后装技术的优势,前景看好,在临床应用中疗效肯定。本文就后装治疗与X刀的现状及其临床比较进行讨论。

新生兔机械通气肺灌洗液中白细胞的动态变化

目的:观察新生兔机械通气肺损伤中白细胞的变化规律。方法:实验于2006-03在南方医科大学儿科实验室进行。将72只新生新西兰兔,按2×2×3析因设计随机分配在高氧(FiO2=1.0)、低氧(FiO2=0.45)组,每组又分为高吸气峰压(2.45kPa)、低吸气峰压(0.98kPa)共4组进行机械通气,选取1,3,6h3个时间点处死动物取肺,每个时间点每组6只兔。取左肺灌洗液进行细胞计数,沉渣涂片细胞分类,测肺湿质量/干质量比,结合病理片分析,同时采用双变量Pearson相关分析法分析各指标间相关性。另取3只兔不干预,为正常对照组。结果:75只兔均进入结果分析。①灌洗液中白细胞计数:在高氧组略高于低氧组,高吸气峰压组略低于低吸气峰压组,差异均不显著(P>0.05);但随时间延长而增高,1,3,6h比差异显著[(11.04±4.00)×109,(16.05±3.99)×109,(15.63±4.83)×109L-1,P<0.001]。②肺湿质量/干质量比:高氧组和低氧组比、高吸气峰压组和低吸气峰压组比差异均不显著(P>0.05),均高于正常对照组(P=0.001);随时间延长其值增高,1,3,6h分别为5.49±0.22,5.64±0.23,5.71±0.22,P=0.003。③肺灌洗液白细胞分类:高氧组分叶核细胞百分率高于低氧组[(21.4±9.9)%,(15.4±7.6)%,P=0.000];高吸气峰压组淋巴细胞百分率高于低吸气峰压组[(53.0±16.3)%,(47.2±14.9)%,P=0.005],而巨噬细胞百分率则低于低吸气峰压组[(28.2±11.0)%,(35.2±12.5)%,P=0.001];随通气时间的延长分叶核细胞百分率下降,而巨噬细胞变化不大。④肺湿质量/干质量与灌洗液中白细胞总数呈正相关(r=0.356,P=0.002),与分叶核计数呈负相关(r=-0.247,P=0.036)。结论:白细胞计数变化同机械通气肺损伤程度一致,与肺水肿有相关性,分类计数的改变随通气策略不同而异。

医学形态学实验教学改革初探

采取课题立项的方式,对医学形态学实验教学进行综合改革研究,加强了实验室的集约化规模建设,整合教学内容新编实验教程,建设专业化实验教师队伍,规范新型的实验室管理运行机制.

L6细胞复合培养中平行结构支架材料的细胞黏附性观察

目的:检测在L6细胞培养过程中,具有平行结构支架材料的生物相容性。方法:将医用可吸收缝线平行折叠并制备成类似圆柱体样,与大鼠L6成肌细胞株体外复合培养。利用扫描电镜观察平行结构支架材料吸附的L6细胞的形态学结构,观察L6细胞在材料上的表面相容性。结果1天后,细胞在支架材料表面黏附、伸展,随时间的延长,显示出沿支架材料纵轴排列趋势,第6天的时候,可以见到类似肌小管的结构。结论:所制备的具有平行结构的支架材料具有良好的生物相容性。