23个STR基因座荧光复合扩增体系的法医学应用评估

目的评估新建立的23个STR复合扩增体系EX23的法医学应用价值。方法使用磁珠法提取样本DNA,应用23个STR复合扩增体系进行扩增,ABI3130XL遗传分析仪对扩增产物进行电泳,GeneMapperID 3.2软件进行基因分型,对法医学应用参数、灵敏度、种属、脱落细胞检材及降级检材分型效果进行观察,并与Sinofiler试剂盒比较。结果 DNA模板量在0.05~1.00ng时,各基因座分型结果清晰准确,均衡性好、特异性强。应用该复合扩增体系检验混合样本、降解检材及脱落细胞检材,均能获得正确的分型结果。统计结果显示该23个STR基因座累计个人识别（TDP）率达0.999999999,三联体累计非父排除率（CPE）达0.999999997。结论新建立的23个STR复合扩增体系分型效果良好,在广东地区汉族人群中具有高度多态性,可满足日常法医鉴定的需要。

六色荧光标记同步检测27个STR基因座的法医学应用评估

目的探讨同步检测27个STR基因座多态性及法医学应用价值。方法用Power PlexFusion 6C荧光标记系统对274份广东汉族无关个体的DNA进行PCR扩增,在3130XL遗传分析仪上进行电泳分析。用Gene MapperID-X软件分析基因型,用Power Stats v1.2软件分析群体遗传学参数。并观察该系统对微量及混合检材的检验效果。结果 23个常染色体STR基因座遗传多态性高,在广东汉族人群的累积个人识别率为1-2.3×10-28,累积非父排除率为0.999 999 999。DYS391、DYS570和DYS576的GD值分别为0.481、0.791和0.751,共检出58种单倍型,单倍型多态性为0.337。微量检材STR基因座检出率为93.33%,混合检材Y-STR基因座检出率为96.67%。结论 Power PlexFusion 6C系统遗传多态性高,可以用于亲缘鉴定、个体识别以及数据库建设。

17个Y-STR基因座在广东汉族人群中的单倍型频率及突变率

目的调查Y-filer检测系统中17个Y-STR基因座在广东汉族中的多态性及遗传稳定性,研究其法医学应用效能。方法应用Y-filer检验体系对广东汉族1000个男性无关个体及1000对确定亲子关系的父子进行Y-STR分型,计算17个Y-STR基因座的的单倍型频率,对发生突变的基因座进行单基因座扩增和测序验证后计算突变率。结果 1000个广东男性无关个体中没有发现相同的单倍型,单倍型多样性达到1.0000,17个Y-STR基因座的基因多样性值在0.4285（DYS391）~0.9654（DYS385a/b）之间。1000对父子17个基因座共观察17 000次减数分裂,共发现46次突变,平均突变率为0.0027（95%CI,0.0020~0.0036）。结论 Y-filer检测系统在广东汉族人群中具有高度多态性,在父权鉴定、个体识别等法医学应用中具有重要价值。

甲基苯丙胺致大鼠神经毒性及纹状体硝化作用的改变

目的探讨甲基苯丙胺(methamphetamine,MA)所导致的大鼠神经毒性及纹状体硝化作用的改变。方法建立MA给药模型,对照组给予等量生理盐水;观察两组大鼠的行为学改变,体温变化,纹状体中NO含量,NOS活性和蛋白质硝化水平的变化情况。结果MA组大鼠刻板行为评分和体温均高于对照组(P<0.01);与对照组相比,MA组大鼠纹状体NO含量及NOS活性增加(P<0.01);纹状体蛋白硝化水平明显增加(P<0.01),差异有显著性。结论MA可导致大鼠行为学改变和体温变化,大鼠脑组织NO含量、NOS活性及蛋白硝化水平的增高可能是MA中枢神经系统损伤的重要机制。

肌注安痛定致过敏性休克死亡1例

某男，34岁，平素体健。因“咽痛伴发热3h”至某医院就诊，查体：T39．3℃，咽充血，扁桃体Ⅰ度肿大，未见脓点。诊断：急性咽炎。予肌注安痛定2mL，5min后有不适感，15min后出现全身发绀、呼吸困难及神志不清等症状，立即给予吸氧、肾上腺素及胸外心脏按压等抢救．于3h后抢救无效死亡。

扫描电镜X射线能谱分析辅助诊断电击死1例

1 案例 简要案情：方某，男，16岁，某日16：00许，在自家饮食店门口收太阳棚，当其双手握住金属摇杆时．突然倒地死亡。据其父回忆，当时方某左手握住摇杆上端，右手握住摇杆把。现场发现太阳棚卷轴上捆绑着一根电缆，电缆接触到卷轴一侧的表皮破损。经检测证实金属摇杆带电。

先天性胆总管囊状扩张误诊致死1例

1 案例 案情：某女，14岁，因腹痛到医院就诊，以“肝囊肿”收入院。次日下午行超声引导下经皮肝囊肿穿刺抽液术，术中抽出胆汁样液体120mL。当晚腹部有隐痛，第2天腹痛加剧，突发昏迷，经抢救无效死亡。

混合人血清诱发豚鼠过敏反应死亡模型的改良

目的提高豚鼠过敏反应死亡的发生率和血清肥大细胞类胰蛋白酶检出水平。方法 74只清洁级豚鼠随机分为原模型组、原模型对照组、改良模型组、改良模型对照组和改良模型非致敏组。混合人血清作为过敏原,对注射方式、致敏、发敏方式进行改良,ELISA法测定各组豚鼠血清肥大细胞类胰蛋白酶和总IgE含量。结果原模型组过敏反应死亡发生率为54.2%,豚鼠不同程度心包积血,原模型组及其对照组共有9只因心脏压塞死亡;改良模型组过敏反应死亡发生率为75%,豚鼠无心脏压塞。原模型组血清总IgE含量与其对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),但其肥大细胞类胰蛋白酶含量较其对照组升高(P<0.05);改良模型组血清中总IgE和肥大细胞类胰蛋白酶含量均较其对照组升高(P<0.05)。结论改良模型的过敏反应死亡发生率显著提高,为研究血清总IgE和血清肥大细胞类胰蛋白提供了更有效的实验动物模型。

罗氏COBAS6000全自动电化学发光免疫分析仪性能验证

目的按ISO15189要求对罗氏COBAS 6000全自动电化学发光免疫分析仪的性能进行验证。方法对甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)的精密度、准确度、临床可报告范围(clinical reportable range,CRR)、分析测量范围(analytical measurement range,AMR)、参考区间进行验证实验。结果批内精密度变异系数(coefficient variation,CV)高低值分别为3.28%和3.46%;日间精密度CV高低值分别为4.39%和5.13%,均小于厂家提供的CV(10%)。相对偏差为0.862%,小于5%。分析测量范围为0.80-1 200 ng/ml,参考区间为0-20.00 ng/ml,临床可报告范围为0-60 000 ng/ml。结论罗氏COBAS 6000全自动电化学发光免疫分析仪的性能与厂家提供的资料基本一致,故可用其进行临床标本的检验工作,所得结果具有可信性。

高度腐败尸体急性一氧化碳中毒鉴定1例

1案例 某年2月10日下午,某街道一出租屋内发现一具男尸,尸体已经高度腐败,经辨认死者系租客吴某,男性,31岁。现场门锁未发现破坏痕迹,室内有两个煤炉．炉旁堆有一些蜂窝煤．其中一个煤炉内煤炭呈未完全燃烧状态。

DNATyper^(TM)15与Identifiler^(TM)试剂盒对陈旧骨骼、牙齿和指甲样本检验结果的比较分析

目的通过国产DNATyperTM15和进口IdentifilerTM试剂盒对陈旧骨骼、牙齿和指甲样本的检验结果比对分析,了解国产试剂盒对降解检材的检验效果,探讨在案件检验中应用的可行性。方法提取陈旧骨骼、牙齿和指甲样本的DNA后,用DNATyperTM15及IdentifilerTM试剂盒同步扩增,并用检出率、杂合子基因座上等位基因均衡性(PHR)和等位基因分型结果一致性,对DNATyperTM15和IdentifilerTM试剂盒进行比较。结果 45例陈旧骨骼、牙齿和指甲样本,DNATyperTM15试剂盒成功检出399例,检出率88.7%,IdentifilerTM试剂盒成功检出404例,检出率89.8%;DNATyperTM15试剂盒和IdentifilerTM试剂盒共同检出398例,在这398例样本中,PHR≤0.5分别为128个和117个;同一样本中,相同基因座上两种试剂盒检出的等位基因分型结果完全一致。经统计学分析,两种试剂盒的检出率和杂合子基因座上等位基因均衡性的检测结果均无统计学差异(P>0.05)。结论国产DNATyperTM15试剂盒可有效应用于实际案件中陈旧骨骼、牙齿及指甲样本的检验。

甲基苯丙胺所致大鼠心肌损伤及相关指标的变化

目的探讨甲基苯丙胺(MA)导致的大鼠心肌的形态学和心功能指标的变化。方法建立MA中毒模型组和对照组,检测两组大鼠心率、血压变化及HE染色观察大鼠心脏形态学变化,用ELISA法测定大鼠血清肌钙蛋白(Tn-T)和脑利钠肽(BNP)浓度。结果与对照组相比,MA组大鼠心率、血压显著升高;MA组大鼠心肌HE染色可见心肌损伤性改变,血清中Tn-T、BNP浓度较对照组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论甲基苯丙胺可导致大鼠心肌损伤,引起心功能减退。

广州地区冻死1例

1 案例资料 简要案情某年12月25日上午，本市郊外草坪上发现1具男性裸尸。据调查，死者系精神病患者，24Et裸身在街道徘徊，曾有人给予食物和衣物。24日和25日气温为16℃～24℃，小雨，轻微南到东南风天气。

PowerPlex~21复合扩增系统漏检微量男性成分1例

本案使用PowerPlex~Fusion 6C复合扩增系统对案件中嫌疑人接触手提包可疑部位擦拭物DNA同步检测常染色体及Y染色体STR。由于PowerPlex~Fusion 6C复合扩增系统新增的DYS391、DYS570和DYS576等3个Y-STR基因座能够灵敏地指示男性成分的存在,虽然该系统Y-STR基因座数量有限,但Y-STR基因座扩增不受女性成分影响,对男性成分比例很少或含量很低的混合检材可有效分型,从而为此类疑难案件的定性及侦破提供明确的指导方向。日常工作中对于一些特殊案件中提取的可能为男女混合且男性成分极微量的检材样本,采用同步检测常染色体及Y染色体STR复合扩增系统有独到的实用价值。