HSF1与XAF1基因在胃肠肿瘤中表达的研究

目的探讨X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)相关因子1(XAF1)与热休克转录因子1(HSF1)在胃肠癌中的表达情况及其相互关系。方法应用免疫印迹分析法检测胃癌、大肠癌组织以及胃肠道肿瘤细胞株中的XAF1及HSF1蛋白表达;用含有HSF1的真核表达载体转染胃肠道肿瘤细胞株或用RNA干扰的方法上调或下调HSF1表达,同步检测对XAF1表达的影响;用应激原(stressstimuli)刺激诱导HSF1表达,观察对XAF1表达的作用。结果在胃肠癌组织中HSF1的表达高于正常组织;在胃肠癌细胞株中XAF1与HSF1的表达呈负相关,应激刺激上调HSF1的同时下调XAF1表达。结论胃肠道肿瘤细胞高表达HSF1,其结果是抑制XAF1表达,这种机制应该是XAF1在(胃肠道)肿瘤细胞中低表达并导致肿瘤细胞凋亡缺失的原因之一。

HSF1与XAF1基因在胃肠肿瘤中表达的研究

目的已知X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)相关因子1(XAF1)在胃肠癌细胞中低表达,本研究的目的在于探讨XAF1与热休克转录因子1(HSF1)在胃肠癌中的表达情况及其相互关系。方法应用免疫印迹分析法检测胃癌、大肠癌组织以及胃肠道肿瘤细胞株中的XAF1及HSF1蛋白表达;用含有HSF1的真核表达载体转染胃肠道肿瘤细胞株或用RNA干扰的方法上调或下调HSF1表达,同步检测对XAF1表达的影响;用应激原刺激诱导HSF1表达,观察对XAF1表达的作用。结果在胃肠癌组织中HSF1的表达高于正常组织;在胃肠癌细胞株中XAF1与HSF1的表达呈负相关,应激刺激上调HSF1的同时下调XAF1表达。结论胃肠道肿瘤细胞高表达HSF1,其结果是抑制XAF1表达,这种机制应该是XAF1在(胃肠道)肿瘤细胞中低表达并导致肿瘤细胞凋亡缺失的原因之一。

X线照射对肝癌细胞株HepG2 TNFR-p75表达的研究

目的研究X线照射在体外培养人肝癌细胞株HepG2后,膜TNFR-p75表达变化情况。方法免疫细胞化学检测TNFR-p75蛋白的表达,流式细胞仪分析细胞凋亡率,光镜及电镜观察细胞形态变化。结果X线照射后的TNFR-p75蛋白表达显著增强(P<0.05);光镜及电镜发现细胞体积缩小,变圆,胞浆浓缩,核固缩深染;流式细胞仪分析细胞凋亡率显著增高。结论X线可通过上调TNFR-p75蛋白的表达,诱导细胞凋亡来发挥其抗增殖作用。

急性结肠炎慢性化小鼠模型的建立

背景:改变葡聚糖硫酸钠(DSS)的浓度和作用时间可建立适当的结肠炎模型,对于进一步研究其病因和发病机制具有重要意义。目的:建立急性结肠炎慢性化的小鼠模型,并探讨其病理学特征。方法:48只C57BL/6小鼠分为模型组和正常对照组。模型组自由饮用3%DSS溶液,5d后改饮用蒸馏水3周,建立急性结肠炎慢性化模型。正常对照组饮用蒸馏水26d。每日行疾病活动指数(DAI)评分。于实验第5、12、19、26d分别处死两组各6只小鼠,行结肠大体形态观察、组织病理学评分和炎症评分。结果:造模第5d,模型组小鼠均出现腹泻、血便、体质量减轻等症状,光学显微镜下可见结肠多灶性浅溃疡,上皮缺失或少许残留,隐窝破坏,杯状细胞减少,以中性粒细胞为主的炎性细胞浸润黏膜和黏膜下层。改饮用蒸馏水3周后,小鼠体质量恢复,腹泻减轻,血便等症状消失,但仍见灶性小溃疡,伴上皮不规则再生和数量较多的炎性细胞浸润。急、慢性期肠道病变均以远段结肠为重。结论:单个循环饮用3%DSS可诱导C57BL/6小鼠发生与人类临床和病理表现相似的急、慢性结肠炎,为进一步研究结肠炎提供了新的模型系统。

dUTP焦磷酸酶在大肠癌细胞和组织中的差异表达

目的验证dUTP焦磷酸酶(dUTPase)在人4种大肠癌细胞SW480,SW620,LoVo,SW1116和组织的差异表达。方法RT-PCR检测人4种大肠癌细胞SW480,SW620,LoVo,SW1116中焦磷酸酶的mRNA表达水平,并通过检测该酶水解dUTP释放的焦磷酸(PPi)来测定这4种大肠癌细胞dUTPase的酶活性。免疫细胞和组织化学检测焦磷酸酶的蛋白表达差异。结果dUTPase在SW620和LoVo细胞的mRNA水平和酶活性高于SW480和SW1116细胞。大肠癌SW620,LoVo细胞免疫化学dUTPase表达高于SW1116、SW480细胞。大肠增生性息肉和腺瘤性息肉dUTPase的表达低于大肠癌。结论焦磷酸酶dUTPase在人4种大肠癌细胞和组织存在差异表达。

RNAi沉默dUTPase对SW620细胞黏附的影响

目的采用RNAi沉默dUTPase的表达,观察SW620细胞黏性的改变。方法合成两条编码发夹siRNA序列的单链DNA,并将其克隆到pSilenCircle载体中,构建重组质粒sidUTPase/pSilenCircle和无关基因的重组质粒siFly/pSilenCircle。以上述重组质粒分别转染SW620细胞,RT-PCR和Westernblot检测dUTPase的表达,异质黏附实验分析细胞黏附性的改变。结果成功地构建了2个dUTPase发夹siRNA的真核表达载体sidUTPase/pSilenCircle和无关基因重组质粒siFly/pSilenCircle。与siFly/pSilen-Circle转染组比较,sidUTPase/pSilenCircle转染组SW620细胞dUTPase的表达明显下调,细胞异质黏附能力减弱。结论构建的dUTPase发夹siRNA的真核表达载体sidUTPase/pSilenCircle可有效抑制SW620细胞的dUTPase表达,降低细胞的异质黏附性。

早期大肠癌的诊断标准

大肠癌（colorecta1 cancer）是指大肠黏膜上皮在环境或遗传等多种致癌因素作用下发生的恶性病变,预后不良,死亡率较高。一般认为绝大多数大肠癌的发生归咎于腺瘤的癌变,部分直接起源于大肠正常黏膜生发中心的干细胞即denove癌,少数可由增生性息肉,

TM4SF9在大肠侧向发育性肿瘤细胞株中的表达及意义

目的:研究四分子交联体5(TM4SF9)在大肠侧向发育性肿瘤(laterallyspreadingturmor,LST)、SW480和Lovo细胞中的差异表达,以及TM4SF9表达差异与三个细胞株黏附能力的关系.方法:用基因芯片技术研究3个细胞株的共同差异表达基因,从中筛选出TM4SF9作为研究对象,用半定量RTPCR技术验证基因芯片检查结果,用黏附实验研究3个细胞株黏附性的差异.结果:基因芯片检查发现TM4SF9在3个细胞株中都有表达,Lovo细胞株表达最强,LST表达最弱,半定量RTPCR检查与基因芯片检查结果相符,黏附实验显示TM4SF9表达水平最高的细胞黏附性最强.结论:TM4SF9在LST,SW480,LOVO3个细胞株中存在差异表达,黏附性较强的细胞株表达较高,其与LST特性的关系值得进一步研究.

酪酸梭菌-双歧杆菌二联活菌制剂对慢性腹泻患者肠道菌群的影响

给慢性腹泻病人口服酪酸梭菌-双歧杆菌二联活菌制剂,然后检测患者服药前后的肠道菌群变化。患者服用药品后,葡萄球菌、酵母菌、消化球菌、真杆菌和小梭菌的数量无明显变化,肠杆菌、肠球菌的数量明显减少,拟杆菌、双歧杆菌、乳杆菌的数量明显增加,其中肠球菌、肠杆菌、拟杆菌和双歧杆菌的变化有显著性(P(0.05),提示酪酸梭菌-双歧杆菌二联活菌制剂对慢性腹泻病人的肠道菌群具有明显的影响、具有增殖拟杆菌、双歧杆菌和乳杆菌的作用。

酪酸梭菌-双歧杆菌二联活菌胶囊对腹泻的临床疗效观察

目的评估酪酸梭菌-双歧杆菌二联新型活菌制剂对腹泻的临床疗效。方法分别随机选取急性腹泻与慢性腹泻病例各38例,给临床腹泻患者口服酪酸梭菌-双歧杆菌二联活菌胶囊,每次2粒,每日3次,分别于第5天和第14天末观察病人腹痛、腹胀、腹泻等情况。同时检测慢性腹泻患者服药前后的肠道菌群变化。结果服用该药品后,与治疗前相比,接受治疗的急性腹泻患者有效率为100%;慢性腹泻患者中,治疗有效率为89.47%。所有患者的腹痛、腹胀明显改善。该药品能明显调节肠道菌群,表现为患者服用药品后,粪便中肠杆菌、肠球菌的数量明显减少,拟杆菌、双歧杆菌、乳杆菌的数量明显增加,其中肠球菌、肠杆菌、拟杆菌和双歧杆菌的变化有明显显著性(P<0.05)。结论酪酸梭菌-双歧杆菌二联活菌制剂对腹泻有良好的疗效,能明显改善患者的肠道菌群。